| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-32页 |
| ·研究技术路线 | 第16-17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验材料说明 | 第18-20页 |
| ·实验方法 | 第20-31页 |
| ·shRNA序列设计与合成 | 第20-22页 |
| ·shRNA表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·慢病毒包装 | 第24页 |
| ·细胞感染 | 第24-25页 |
| ·Real-time PCR | 第25-27页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western blot) | 第27-29页 |
| ·MTT实验 | 第29页 |
| ·FITC-PI双染流式细胞术 | 第29-30页 |
| ·单细胞凝胶电泳(SCGE) | 第30-31页 |
| ·数据分析 | 第31-32页 |
| 第三章 结果 | 第32-51页 |
| ·HBE和HaCat细胞中5-LOX蛋白的表达 | 第32-33页 |
| ·5-LOX抑制剂AA-861对HBE细胞5-LOX蛋白表达的影响 | 第33-34页 |
| ·5-LOX基因沉默 | 第34-36页 |
| ·重组质粒构建后阳性克隆筛选 | 第34-35页 |
| ·克隆测序 | 第35页 |
| ·慢病毒滴度检测 | 第35页 |
| ·慢病毒感染HBE细胞 | 第35-36页 |
| ·Real-time PCR检测B(a)P对慢病毒感染HBE 5-LOX的影响 | 第36-38页 |
| ·Western Blot检测B(a)P对慢病毒感染HBE 5-LOX的影响 | 第38-39页 |
| ·苯并(a)芘对HBE存活率的影响(MTT) | 第39-42页 |
| ·苯并(a)芘对HBE凋亡和死亡率的影响(FCM) | 第42-48页 |
| ·苯并(a)芘对HBE DNA损伤(单细胞凝胶电泳) | 第48-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-59页 |
| ·苯并(a)芘对支气管上皮细胞和表皮细胞中5-LOX蛋白表达的调节 | 第51-52页 |
| ·5-LOX慢病毒载体制备和HBE细胞转染效率 | 第52-54页 |
| ·5-LOX介导苯并(a)芘活化所致的细胞毒性和DNA损伤 | 第54-56页 |
| ·RNAi在氧化酶研究中作为一种有效的抑制策略运用的可能性 | 第56-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 综述 | 第66-76页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读硕士学位期间已完成的相关论文 | 第77页 |
