| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-22页 |
| 1 虫媒病毒概述 | 第11-12页 |
| 2 虫媒病毒与虫媒病毒病 | 第12页 |
| 3 概述乙脑病毒,盖塔病毒和塔希那病毒 | 第12-15页 |
| ·乙脑病毒 | 第12-13页 |
| ·盖塔病毒 | 第13-14页 |
| ·塔希那病毒 | 第14-15页 |
| 4 虫媒病毒病的症状及治疗 | 第15页 |
| 5 传统虫媒病毒诊断技术 | 第15-16页 |
| 6 新型分子诊断技术 | 第16-20页 |
| ·普通PCR | 第16-17页 |
| ·巢式PCR(Nested-PCR) | 第17页 |
| ·单引物差异PCR | 第17-18页 |
| ·多重PCR(Multiplex PCR) | 第18页 |
| ·实时定量PCR(Realtime PCR) | 第18页 |
| ·多重实时定量PCR(Multiplex Realtime PCR) | 第18-19页 |
| ·链特异性实时定量PCR | 第19页 |
| ·PCR-ELISA | 第19-20页 |
| ·基因芯片技术(Microarray) | 第20页 |
| 7 本研究的技术核心 | 第20页 |
| ·一步法多重RT-PCR | 第20页 |
| ·酶联杂交 | 第20页 |
| 8 开展本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 材料与方法 | 第22-33页 |
| 1 材料 | 第22-24页 |
| ·病毒毒株 | 第22页 |
| ·标本 | 第22页 |
| ·细胞系 | 第22页 |
| ·细胞培养液 | 第22页 |
| ·生化和分子生物学试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-33页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第24-25页 |
| ·细胞培养与病毒扩增 | 第25-26页 |
| ·病毒的滴定 | 第26-28页 |
| ·稀释引物 | 第28页 |
| ·三种病毒引物特异性检测 | 第28-30页 |
| ·测定单重RT-PCR检测极限 | 第30页 |
| ·建立一步三重RT-PCR酶联杂交检测法 | 第30-32页 |
| ·敏感性分析 | 第32页 |
| ·三种病毒间PCR扩增产物和种特异性探针的交叉反应 | 第32页 |
| ·临床适应性分析 | 第32-33页 |
| 结果 | 第33-43页 |
| 1 引物与探针的设计 | 第33-34页 |
| 2 细胞培养和病毒扩增 | 第34-35页 |
| 3 三种病毒滴度测定 | 第35-36页 |
| 4 验证引物特异性 | 第36-37页 |
| 5 单重RT-PCR测定JEV检测极限 | 第37-38页 |
| 6 多重RT-PCR测定JEV检测极限 | 第38-39页 |
| 7 一步法三重RT-PCR酶联杂交方法的建立及其敏感性分析 | 第39-40页 |
| 8 三种病毒PCR产物与种特异性探针交叉反应验证 | 第40-41页 |
| 9 临床标本检测 | 第41-43页 |
| 讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51-52页 |
| 附录A | 第52-53页 |
| 附录B | 第53-54页 |
