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菌株Dyella ginsengisoli LA-4降解联苯及基因的克隆与表达

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
引言第13-14页
1 联苯/多氯联苯生物降解研究进展第14-35页
   ·联苯/多氯联苯的性质及污染现状第14-18页
     ·联苯/多氯联苯的物理化学性质第14-15页
     ·联苯/多氯联苯的来源及危害第15-17页
     ·多氯联苯的污染状况第17-18页
   ·联苯/多氯联苯生物修复研究进展第18-33页
     ·微生物对PCBs厌氧还原脱卤的研究进展第18-19页
     ·联苯/多氯联苯好氧生物降解研究进展第19-32页
     ·多氯联苯的厌氧-好氧联合生物降解研究进展第32页
     ·含联苯废水的生物处理进展第32-33页
   ·本论文的研究内容及意义第33-35页
2 联苯好氧降解菌株的分离与鉴定第35-46页
   ·材料与方法第35-39页
     ·实验材料第35-38页
     ·联苯降解菌的驯化与分离第38页
     ·联苯降解菌株的鉴定方法第38-39页
   ·结果与讨论第39-45页
     ·联苯降解菌株的分离第39-40页
     ·菌株LA-4的形态和生理生化特性第40-41页
     ·菌株的Biolog鉴定第41-43页
     ·菌株抗性实验第43页
     ·菌株LA-4的16S rDNA序列分析第43-45页
   ·本章小结第45-46页
3 联苯降解菌Dyella ginsengisoli LA-4的特性研究第46-63页
   ·材料与方法第46-51页
     ·实验材料第46-47页
     ·实验方法第47-51页
   ·结果与讨论第51-62页
     ·菌株生长与降解条件的确定第51-53页
     ·菌株LA-4生长降解曲线的测定第53-54页
     ·菌株LA-4底物广谱性分析第54页
     ·表面活性剂Tween-80对联苯降解促进作用的研究第54-55页
     ·氯化钠对联苯降解的影响研究第55-56页
     ·金属离子对联苯降解的影响研究第56-57页
     ·菌株LA-4休眠细胞对不同浓度联苯的降解研究第57页
     ·菌株LA-4的粗酶活性分析第57-59页
     ·菌株LA-4降解联苯的机理研究第59-62页
   ·本章小结第62-63页
4 联苯生物强化降解及强化体系的DNA指纹解析第63-73页
   ·材料与方法第63-67页
     ·实验材料第63-65页
     ·实验方法第65-67页
   ·结果与讨论第67-72页
     ·菌株LA-4游离态细胞对联苯降解的强化作用第67-68页
     ·DGGE指纹方法对强化体系的群落动态解析第68-72页
   ·本章小结第72-73页
5 菌株LA-4联苯降解相关基因的扩增及序列分析第73-95页
   ·材料与方法第73-81页
     ·实验材料第73-76页
     ·实验方法第76-81页
   ·结果与讨论第81-93页
     ·菌株LA-4的联苯降解基因保守区的扩增第81-82页
     ·菌株LA-4的联苯降解基因保守区侧翼未知序列的扩增第82-91页
     ·菌株LA-4的bph基因簇序列分析第91-93页
   ·本章小结第93-95页
6 联苯降解基因的表达及对联苯及多氯联苯的生物转化第95-119页
   ·材料与方法第95-104页
     ·实验材料第95-98页
     ·实验方法第98-104页
   ·结果与讨论第104-118页
     ·菌株LA-4的联苯双加氧酶大亚基BphA1序列分析第104-106页
     ·联苯降解基因表达载体及基因工程菌的构建第106-112页
     ·菌株LA-4的联苯降解基因在大肠杆菌中的表达第112-113页
     ·重组的联苯双加氧酶的活性第113-114页
     ·BphABC复合酶系对联苯及多氯联苯的生物转化第114页
     ·BphAB复合酶系对联苯及多氯联苯生物转化及产物的分析第114-118页
   ·本章小结第118-119页
7 2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶的表达与特性研究第119-134页
   ·材料与方法第119-123页
     ·实验材料第119-120页
     ·实验方法第120-123页
   ·结果与讨论第123-132页
     ·菌株LA-4的2,3-二羟基联苯双加氧酶序列分析第123-124页
     ·BphC_LA-4的三级结构预测与模拟第124-126页
     ·菌株LA-4的bphC基因的表达与表达产物纯化第126-128页
     ·BphC_LA-4的酶促降解实验第128-129页
     ·金属离子及抑制剂对BphC_LA-4酶活性影响第129-130页
     ·BphC_LA-4的酶与底物复合物结构分析第130-132页
   ·本章小结第132-134页
8 芳环间位断裂产物水解酶的表达与特性研究第134-152页
   ·材料与方法第134-141页
     ·实验材料第134-136页
     ·实验方法第136-141页
   ·结果与讨论第141-150页
     ·MfphA氨基酸序列分析第141-143页
     ·MfphA三级结构预测与模拟第143-144页
     ·mfphA基因表达载体及基因工程菌的构建第144-145页
     ·mfphA基因的表达与表达产物纯化第145-147页
     ·酶促降解实验第147-148页
     ·MfphA的酶动力学研究第148-149页
     ·金属离子对MfphA酶活性的影响第149页
     ·抑制剂对MfphA酶活性的影响第149-150页
   ·本章小结第150-152页
9 结论与展望第152-156页
   ·主要结论第152-154页
   ·本论文的创新之处第154页
   ·有待深入研究的问题第154-156页
参考文献第156-168页
创新点摘要第168-169页
附录A 菌株LA-4的16SrDNA序列登录GenBank第169-170页
附录B 菌株LA-4的bphA1基因保守区序列登录GenBank第170-171页
附录C 菌株LA-4的bphB/C基因保守区序列登录GenBank第171-173页
附录D 菌株LA-4的bph基因簇序列登录GenBank第173-181页
附录E 菌株LA-4专利菌种保藏证明第181-182页
附录F pMD18-T simp1e Vector载体的结构第182-183页
附录G pET28(a)载体的结构第183-184页
攻读博士学位期间发表学术论文情况第184-185页
致谢第185-186页
作者简介第186-187页

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