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辣椒对疫病的抗性及其机理研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第一章 文献综述第15-38页
   ·辣椒疫霉菌第15-21页
     ·辣椒疫霉的起源与分布第15页
     ·辣椒疫霉菌的生物学特性第15-17页
     ·辣椒疫霉菌的症状和流行规律第17-18页
     ·辣椒疫霉菌致病机理研究第18-19页
     ·辣椒疫霉病的防治第19-21页
   ·辣椒抗病性机制研究第21-27页
     ·抗病性鉴定方法的研究第21-23页
     ·组织结构和形态学研究第23-24页
     ·生理生化研究第24-26页
     ·遗传学研究第26-27页
     ·植物抗病基因的克隆第27页
   ·转录水平上的基因克隆方法第27-32页
   ·RACE 技术原理及其研究进展第32-34页
   ·实时定量PCR第34-35页
   ·植物基因工程第35页
   ·本研究的目的意义及研究内容第35-37页
     ·本研究的目的意义第35-36页
     ·本研究的研究内容第36-37页
   ·技术路线第37-38页
第二章 辣椒抗疫病离体侧枝接种鉴定技术研究第38-46页
   ·供试材料第38页
     ·供试菌株第38页
     ·供试品种第38页
     ·培养基第38页
   ·方法第38-40页
     ·疫霉菌的培养和病原菌孢子诱导第38页
     ·离体侧枝接种方法第38-39页
     ·接种方式实验第39页
     ·接种浓度实验第39页
     ·接种温光条件实验第39页
     ·离体侧枝鉴定和其他方法的比较第39-40页
   ·结果与分析第40-42页
     ·接种方式的影响第40页
     ·接种浓度影响第40页
     ·温光条件的影响第40-41页
     ·几种鉴定方法的比较第41-42页
   ·讨论第42-46页
第三章 辣椒抗疫病的生理生化研究第46-57页
   ·供试材料第46页
     ·供试菌株第46页
     ·供试品种第46页
     ·化学药品第46页
     ·主要仪器第46页
   ·方法第46-49页
     ·辣椒苗的准备第46页
     ·病原菌的准备第46-47页
     ·接种及采样第47页
     ·Hoagland’s(霍格兰氏)营养液配制第47页
     ·过氧化物酶的测定第47页
     ·苯丙氨酸解氨酶活性的测定第47-48页
     ·多酚氧化酶活性的测定第48页
     ·β-1,3-葡聚糖酶活性测定第48页
     ·几丁质酶活性测定第48页
     ·几丁质胶体制备第48-49页
     ·DNS 配制第49页
   ·结果与分析第49-55页
     ·接种后过氧化物酶活性的变化第49-50页
     ·接种后苯丙氨酸解氨酶活性的变化第50-51页
     ·接种后多酚氧化酶活性的变化第51-52页
     ·接种后β-1,3-葡聚糖酶活性的变化第52-53页
     ·接种后几丁质酶活性的变化第53-55页
   ·讨论第55-57页
第四章 辣椒抗疫病相关基因片段的克隆第57-75页
   ·供试材料第57页
     ·供试菌株第57页
     ·供试品种第57页
     ·化学药品第57页
     ·载体第57页
     ·主要仪器第57页
   ·方法第57-67页
     ·RNA 提取方法第57-60页
     ·cDNA 的合成第60-62页
     ·cDNA-AFLP 技术分析第62-67页
   ·结果与分析第67-73页
     ·RNA 的提取第67-68页
     ·不同方法合成cDNA 双链第68-69页
     ·酶切连接和预扩增结果第69页
     ·选择性扩增结果第69-70页
     ·差异表达条带的二次扩增、克隆与验证阳性克隆第70页
     ·差异片段的序列同源性比较分析第70-71页
     ·差异片段的RT-PCR 验证第71-73页
   ·讨论第73-75页
     ·基于cDNA-AFLP 技术结果的可靠性第73页
     ·胶回收过程中片段丢失现象第73页
     ·辣椒抗疫病相关基因的分析第73-75页
第五章 辣椒抗疫病相关基因全长的获得和生物信息学分析第75-107页
   ·供试材料第75页
   ·方法第75-76页
     ·引物设计第75页
     ·RACE 扩增第75-76页
     ·生物信息学分析第76页
   ·结果与分析第76-105页
     ·部分片段的RACE 结果第76-77页
     ·辣椒CanTF 基因全长的获得和序列分析第77-81页
     ·辣椒CanPOD 基因全长的获得和序列分析第81-86页
     ·辣椒CanBPM4 基因全长的获得和序列分析第86-90页
     ·辣椒CanNADPH 基因全长的获得和序列分析第90-95页
     ·辣椒CanZf 基因全长的获得和序列分析第95-99页
     ·辣椒CanOBP 基因的生物信息学分析第99-105页
   ·讨论第105-107页
     ·SMART RACE 技术的优点第105页
     ·辣椒抗疫病相关基因的获得第105-106页
     ·生物信息学分析方法的产生和利用第106-107页
第六章 辣椒抗疫病相关基因的表达分析第107-123页
   ·供试材料第107页
     ·供试菌株第107页
     ·供试品种第107页
     ·化学药品第107页
     ·主要仪器第107页
   ·方法第107-110页
     ·辣椒材料的处理第107-108页
     ·RNA 提取方法第108页
     ·反转录第108-109页
     ·Real-time PCR 反应第109页
     ·半定量RT-PCR 反应第109-110页
     ·引物第110页
     ·数据处理第110页
   ·结果与分析第110-120页
     ·RNA 的提取第110-111页
     ·CanPOD 基因的半定量RT-PCR 表达分析第111-112页
     ·CanOBP 基因的实时定量表达分析第112-116页
     ·CanZf 基因的实时定量表达分析第116-120页
   ·讨论第120-123页
     ·实时荧光定量PCR 技术要点第120-121页
     ·CanPOD 基因分析第121页
     ·CanOBP 基因分析第121-122页
     ·CanZf 基因分析第122-123页
第七章 辣椒遗传转化单倍体受体系统研究第123-131页
   ·材料第123页
   ·方法第123-125页
     ·选取花蕾第123页
     ·花蕾消毒和剥取花药第123页
     ·基因型筛选第123页
     ·不同激素配比设置第123-124页
     ·培养方法第124页
     ·炼苗移栽第124页
     ·单倍体鉴定第124-125页
   ·结果与分析第125-129页
     ·基因型对花药培养胚状体诱导率的影响第125-126页
     ·不同培养基对辣椒花药培养的影响第126页
     ·温度预处理对花药培养的影响第126-127页
     ·炼苗移栽第127-129页
     ·倍性鉴定第129页
     ·辣椒小孢子培养第129页
   ·讨论第129-131页
     ·单倍体作为转基因受体的可行性第129-130页
     ·基因型对花药培养的影响第130页
     ·不正常花粉胚第130页
     ·污染问题第130-131页
第八章 结论第131-134页
参考文献第134-143页
附录第143-148页
致谢第148-149页
作者简介第149页

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