摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-38页 |
·辣椒疫霉菌 | 第15-21页 |
·辣椒疫霉的起源与分布 | 第15页 |
·辣椒疫霉菌的生物学特性 | 第15-17页 |
·辣椒疫霉菌的症状和流行规律 | 第17-18页 |
·辣椒疫霉菌致病机理研究 | 第18-19页 |
·辣椒疫霉病的防治 | 第19-21页 |
·辣椒抗病性机制研究 | 第21-27页 |
·抗病性鉴定方法的研究 | 第21-23页 |
·组织结构和形态学研究 | 第23-24页 |
·生理生化研究 | 第24-26页 |
·遗传学研究 | 第26-27页 |
·植物抗病基因的克隆 | 第27页 |
·转录水平上的基因克隆方法 | 第27-32页 |
·RACE 技术原理及其研究进展 | 第32-34页 |
·实时定量PCR | 第34-35页 |
·植物基因工程 | 第35页 |
·本研究的目的意义及研究内容 | 第35-37页 |
·本研究的目的意义 | 第35-36页 |
·本研究的研究内容 | 第36-37页 |
·技术路线 | 第37-38页 |
第二章 辣椒抗疫病离体侧枝接种鉴定技术研究 | 第38-46页 |
·供试材料 | 第38页 |
·供试菌株 | 第38页 |
·供试品种 | 第38页 |
·培养基 | 第38页 |
·方法 | 第38-40页 |
·疫霉菌的培养和病原菌孢子诱导 | 第38页 |
·离体侧枝接种方法 | 第38-39页 |
·接种方式实验 | 第39页 |
·接种浓度实验 | 第39页 |
·接种温光条件实验 | 第39页 |
·离体侧枝鉴定和其他方法的比较 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-42页 |
·接种方式的影响 | 第40页 |
·接种浓度影响 | 第40页 |
·温光条件的影响 | 第40-41页 |
·几种鉴定方法的比较 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-46页 |
第三章 辣椒抗疫病的生理生化研究 | 第46-57页 |
·供试材料 | 第46页 |
·供试菌株 | 第46页 |
·供试品种 | 第46页 |
·化学药品 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
·方法 | 第46-49页 |
·辣椒苗的准备 | 第46页 |
·病原菌的准备 | 第46-47页 |
·接种及采样 | 第47页 |
·Hoagland’s(霍格兰氏)营养液配制 | 第47页 |
·过氧化物酶的测定 | 第47页 |
·苯丙氨酸解氨酶活性的测定 | 第47-48页 |
·多酚氧化酶活性的测定 | 第48页 |
·β-1,3-葡聚糖酶活性测定 | 第48页 |
·几丁质酶活性测定 | 第48页 |
·几丁质胶体制备 | 第48-49页 |
·DNS 配制 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-55页 |
·接种后过氧化物酶活性的变化 | 第49-50页 |
·接种后苯丙氨酸解氨酶活性的变化 | 第50-51页 |
·接种后多酚氧化酶活性的变化 | 第51-52页 |
·接种后β-1,3-葡聚糖酶活性的变化 | 第52-53页 |
·接种后几丁质酶活性的变化 | 第53-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第四章 辣椒抗疫病相关基因片段的克隆 | 第57-75页 |
·供试材料 | 第57页 |
·供试菌株 | 第57页 |
·供试品种 | 第57页 |
·化学药品 | 第57页 |
·载体 | 第57页 |
·主要仪器 | 第57页 |
·方法 | 第57-67页 |
·RNA 提取方法 | 第57-60页 |
·cDNA 的合成 | 第60-62页 |
·cDNA-AFLP 技术分析 | 第62-67页 |
·结果与分析 | 第67-73页 |
·RNA 的提取 | 第67-68页 |
·不同方法合成cDNA 双链 | 第68-69页 |
·酶切连接和预扩增结果 | 第69页 |
·选择性扩增结果 | 第69-70页 |
·差异表达条带的二次扩增、克隆与验证阳性克隆 | 第70页 |
·差异片段的序列同源性比较分析 | 第70-71页 |
·差异片段的RT-PCR 验证 | 第71-73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
·基于cDNA-AFLP 技术结果的可靠性 | 第73页 |
·胶回收过程中片段丢失现象 | 第73页 |
·辣椒抗疫病相关基因的分析 | 第73-75页 |
第五章 辣椒抗疫病相关基因全长的获得和生物信息学分析 | 第75-107页 |
·供试材料 | 第75页 |
·方法 | 第75-76页 |
·引物设计 | 第75页 |
·RACE 扩增 | 第75-76页 |
·生物信息学分析 | 第76页 |
·结果与分析 | 第76-105页 |
·部分片段的RACE 结果 | 第76-77页 |
·辣椒CanTF 基因全长的获得和序列分析 | 第77-81页 |
·辣椒CanPOD 基因全长的获得和序列分析 | 第81-86页 |
·辣椒CanBPM4 基因全长的获得和序列分析 | 第86-90页 |
·辣椒CanNADPH 基因全长的获得和序列分析 | 第90-95页 |
·辣椒CanZf 基因全长的获得和序列分析 | 第95-99页 |
·辣椒CanOBP 基因的生物信息学分析 | 第99-105页 |
·讨论 | 第105-107页 |
·SMART RACE 技术的优点 | 第105页 |
·辣椒抗疫病相关基因的获得 | 第105-106页 |
·生物信息学分析方法的产生和利用 | 第106-107页 |
第六章 辣椒抗疫病相关基因的表达分析 | 第107-123页 |
·供试材料 | 第107页 |
·供试菌株 | 第107页 |
·供试品种 | 第107页 |
·化学药品 | 第107页 |
·主要仪器 | 第107页 |
·方法 | 第107-110页 |
·辣椒材料的处理 | 第107-108页 |
·RNA 提取方法 | 第108页 |
·反转录 | 第108-109页 |
·Real-time PCR 反应 | 第109页 |
·半定量RT-PCR 反应 | 第109-110页 |
·引物 | 第110页 |
·数据处理 | 第110页 |
·结果与分析 | 第110-120页 |
·RNA 的提取 | 第110-111页 |
·CanPOD 基因的半定量RT-PCR 表达分析 | 第111-112页 |
·CanOBP 基因的实时定量表达分析 | 第112-116页 |
·CanZf 基因的实时定量表达分析 | 第116-120页 |
·讨论 | 第120-123页 |
·实时荧光定量PCR 技术要点 | 第120-121页 |
·CanPOD 基因分析 | 第121页 |
·CanOBP 基因分析 | 第121-122页 |
·CanZf 基因分析 | 第122-123页 |
第七章 辣椒遗传转化单倍体受体系统研究 | 第123-131页 |
·材料 | 第123页 |
·方法 | 第123-125页 |
·选取花蕾 | 第123页 |
·花蕾消毒和剥取花药 | 第123页 |
·基因型筛选 | 第123页 |
·不同激素配比设置 | 第123-124页 |
·培养方法 | 第124页 |
·炼苗移栽 | 第124页 |
·单倍体鉴定 | 第124-125页 |
·结果与分析 | 第125-129页 |
·基因型对花药培养胚状体诱导率的影响 | 第125-126页 |
·不同培养基对辣椒花药培养的影响 | 第126页 |
·温度预处理对花药培养的影响 | 第126-127页 |
·炼苗移栽 | 第127-129页 |
·倍性鉴定 | 第129页 |
·辣椒小孢子培养 | 第129页 |
·讨论 | 第129-131页 |
·单倍体作为转基因受体的可行性 | 第129-130页 |
·基因型对花药培养的影响 | 第130页 |
·不正常花粉胚 | 第130页 |
·污染问题 | 第130-131页 |
第八章 结论 | 第131-134页 |
参考文献 | 第134-143页 |
附录 | 第143-148页 |
致谢 | 第148-149页 |
作者简介 | 第149页 |