| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-46页 |
| ·引言 | 第13-15页 |
| ·研究背景 | 第13-15页 |
| ·研究目的和意义 | 第15页 |
| ·项目来源与经费支持 | 第15页 |
| ·国内外研究现状与评述 | 第15-43页 |
| ·锦鸡儿的生物性状及研究现状 | 第15-17页 |
| ·植物脂肪酸合成及其重要性 | 第17-22页 |
| ·植物脂肪酸合成酶及关键基因研究 | 第22-28页 |
| ·油酰磷脂酰胆碱去饱和酶(FAD2)研究进展 | 第28-31页 |
| ·RACE 技术的概念及发展 | 第31-39页 |
| ·酵母作为基因表达系统的研究进展 | 第39-43页 |
| ·研究目标和主要研究内容 | 第43-44页 |
| ·研究目标 | 第43页 |
| ·主要研究内容 | 第43-44页 |
| ·研究技术路线 | 第44-45页 |
| ·实验整体安排与实验相关性 | 第45-46页 |
| 第二章 中间锦鸡儿 FAD2 基因全长 cDNA 克隆 | 第46-60页 |
| ·材料与方法 | 第46-52页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-52页 |
| ·实验结果 | 第52-57页 |
| ·RNA 的提取及双链cDNA 的合成 | 第52-53页 |
| ·扩增获得FAD2 保守序列 | 第53页 |
| ·5’RACE 扩增获得5’末端序列 | 第53-54页 |
| ·3’RACE 扩增获得3’末端序列 | 第54页 |
| ·FAD2 全长基因的扩增 | 第54-56页 |
| ·四个FAD2 基因的同源性比较 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·中间锦鸡儿种子总RNA 的提取 | 第57页 |
| ·RACE 技术的改进 | 第57-58页 |
| ·关于中间锦鸡儿FAD2 基因家族的成员数 | 第58页 |
| ·FAD2 基因的可能分工 | 第58页 |
| ·FAD2 基因的同源性比对 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第三章 中间锦鸡儿4 个FAD2 蛋白生物信息学比较分析 | 第60-73页 |
| ·材料与方法 | 第60-61页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·研究方法 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-70页 |
| ·信号肽分析 | 第61-63页 |
| ·蛋白二级结构分析 | 第63-65页 |
| ·亲/疏水性及跨膜分析 | 第65-67页 |
| ·四个FAD2 蛋白的翻译后修饰作用 | 第67-68页 |
| ·四个FAD2 蛋白稳定性分析 | 第68-70页 |
| ·棕榈酰化位点预测 | 第70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·信号肽预测 | 第70页 |
| ·二级结构预测 | 第70页 |
| ·磷酸化修饰 | 第70-71页 |
| ·蛋白半衰期和翻译相对效率预测 | 第71页 |
| ·棕榈酰化位点预测 | 第71-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第四章 FAD2-2A、FAD2-1A、FAD2-18 基因SOUTHERN 检测及其在不同组织的表达分析 | 第73-84页 |
| ·材料与方法 | 第73-79页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-79页 |
| ·实验结果 | 第79-82页 |
| ·Southern 检测 | 第79页 |
| ·定量PCR | 第79-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·Southern 检测 | 第82页 |
| ·FAD2 基因的表达谱分析 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第五章 中间锦鸡儿FAD2-2A、FAD2-1A 和FAD2-18 基因酵母表达及调控分析 | 第84-118页 |
| ·材料和方法 | 第84-95页 |
| ·材料 | 第84-87页 |
| ·实验方法 | 第87-95页 |
| ·实验结果 | 第95-115页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第95-96页 |
| ·酵母转化 | 第96页 |
| ·20℃下诱导外源基因表达样品分析 | 第96-104页 |
| ·15℃低温处理样品基因表达分析 | 第104-109页 |
| ·30℃高温处理样品基因表达分析 | 第109-115页 |
| ·讨论 | 第115-117页 |
| ·20℃诱导表达FAD2 基因的调控分析 | 第115页 |
| ·低温和高温处理FAD2 基因表达调控分析 | 第115-116页 |
| ·中间锦鸡儿FAD2 基因调控方式与其它物种比较分析 | 第116-117页 |
| ·小结 | 第117-118页 |
| 第六章 结论 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-135页 |
| 附录 | 第135-141页 |
| 在读期间的学术研究 | 第141-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
