| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-23页 |
| 1.植物脂肪酸类型与利用研究 | 第14-15页 |
| 2.植物脂肪酸生物合成的途径 | 第15-17页 |
| 3.PEP羧化酶基因的结构与功能研究 | 第17-19页 |
| 4.Ω-3脂肪酸脱氢酶基因的结构与功能研究 | 第19页 |
| 5.二酰甘油酰基转移酶DGAT基因的结构与功能研究 | 第19-20页 |
| 6.反义RNA技术及其在植物基因工程中的应用 | 第20-21页 |
| 7.花生转基因研究进展 | 第21页 |
| 8.本研究的目的意义 | 第21-23页 |
| 第二章 花生丙酮酸羧化酶基因的克隆反义表达载体的构建与转化 | 第23-44页 |
| 1 材料与方法 | 第23-44页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌种与质粒 | 第23页 |
| ·所用引物 | 第23-24页 |
| ·酶与生化试剂 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-34页 |
| ·植物材料的培养 | 第24页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·核酸质量检测 | 第25页 |
| ·PEP的PCR反应 | 第25页 |
| ·PCR产物的回收 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的克隆: | 第26-27页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第27-28页 |
| ·测序 | 第28页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第28-31页 |
| ·CaCl_2法制备感受态细胞及转化和提取质粒 | 第31页 |
| ·测序及序列分析 | 第31页 |
| ·液氮冻融法制各农杆菌感受态细胞及转化和提取质粒 | 第31-33页 |
| ·农杆菌侵染花生 | 第33-34页 |
| ·农杆菌侵染拟南芥 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-43页 |
| ·种子特异性反义表达载体的构建 | 第35-40页 |
| ·PEP基因片段的序列分析 | 第40页 |
| ·花生丙酮酸羧化酶基因核苷酸序列分析 | 第40-41页 |
| ·转化拟南芥 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 花生Ω-3脂肪酸脱氢酶FAD3基因的克隆及其植物表达载体的构建与转化 | 第44-53页 |
| 1 材料与方法 | 第44-53页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·菌种与质粒 | 第44页 |
| ·所用引物 | 第44页 |
| ·酶与生化试剂 | 第44页 |
| ·所用载体 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·植物材料的培养 | 第45页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第45页 |
| ·核酸质量检测 | 第45页 |
| ·FAD3的PCR反应 | 第45页 |
| ·PCR产物的回收 | 第45页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·测序 | 第47页 |
| ·液氮冻融法制备农杆菌感受态细胞及转化和菌落PCR鉴定 | 第47页 |
| ·农杆菌侵染花生 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-52页 |
| ·种子特异性超量表达载体的构建 | 第47-50页 |
| ·测序分析结果 | 第50页 |
| ·转化花生 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 第四章 花生的二酰甘油酰基转移酶基因DGAT基因的克隆及其植物表达载体的构建与转化 | 第53-68页 |
| 1 材料与方法 | 第54-68页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·菌种与质粒 | 第54页 |
| ·所用引物 | 第54页 |
| ·酶与生化试剂 | 第54-55页 |
| ·所用载体 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-61页 |
| ·植物材料的培养 | 第55页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第55页 |
| ·核酸质量检测 | 第55页 |
| ·PCR反应 | 第55-60页 |
| ·CaCl_2法制各感受态细胞及转化和提取质粒 | 第60-61页 |
| ·测序及序列分析 | 第61页 |
| ·液氮冻融法制备农杆菌感受态细胞及转化和提取质粒 | 第61页 |
| ·农杆菌侵染花生 | 第61页 |
| ·拟南芥的转化 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-67页 |
| ·种子特异性超量表达载体的构建 | 第61-66页 |
| ·DGAT基因片段的序列分析 | 第66-67页 |
| ·转化拟南芥 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录一 载体的测序序列 | 第74-78页 |
| 附录二 测序峰图 | 第78-97页 |
| 1.PEP基因序列峰图 | 第78-84页 |
| 2.反义PEP-1基因序列峰图 | 第84-86页 |
| 3.反义PEP-2基因序列峰图 | 第86-88页 |
| 4.反义PEP-3基因序列峰图 | 第88-90页 |
| 5.DGAT基因序列峰图 | 第90-93页 |
| 6.FAD3基因序列峰图 | 第93-97页 |
| 附录三 用到的MARKER电泳图 | 第97-98页 |
| 附录四 本实验所用质粒载体 | 第98-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
