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鹰嘴豆蛋白酶解物的制备及其抗氧化肽的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-20页
第一章 绪论第20-42页
   ·鹰嘴豆简介第20页
   ·鹰嘴豆生物活性物质的研究概述第20-22页
     ·鹰嘴豆蛋白质第20-21页
     ·鹰嘴豆活性肽第21-22页
       ·抑制血管紧缩素(ACE)活性肽第21页
       ·鹰嘴豆抑真菌肽及抗HIV-1 反转录酶肽第21页
       ·鹰嘴豆免疫肽和抗过敏肽第21-22页
     ·鹰嘴豆黄酮类物质第22页
   ·抗氧化肽的研究进展第22-25页
     ·抗氧化肽的来源及抗氧化活性第22-25页
       ·天然抗氧化肽第22-23页
       ·蛋白水解抗氧化肽第23-25页
   ·抗氧化能力的测定方法第25-29页
     ·抑制脂类物质氧化能力的测定第25-26页
       ·食用油脂或富含油脂的食物检测底物第26页
       ·亚油酸及甲基亚油酸作为被氧化基质第26页
       ·低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(HLDL)作被氧化的底物第26页
     ·测定抗氧化剂清除自由基能力的方法第26-29页
       ·羟自由基(OH·)捕获能力的测定方法第27页
       ·超氧阴离子自由基(02·-)捕获能力的测定第27-28页
       ·DPPH 自由基捕获能力的测定方法第28页
       ·DMPD 自由基捕获能力的测定第28页
       ·ORAC 法第28-29页
       ·TRAP 法第29页
     ·螯合金属离子的测定方法第29页
     ·体内抗氧化酶活及脂质过氧化物的测定第29页
   ·抗氧化肽的分离纯化与结构鉴定第29-32页
     ·抗氧化肽的分离纯化第29-31页
       ·离子交换色谱(ion exchange chromatography, IEC)第29-30页
       ·凝胶色谱法(gel chromatcgraphy, GC)第30页
       ·反相高效液相色谱(RP-HPLC)第30页
       ·亲和层析(Affinity chromatography, AC)第30页
       ·电泳法第30页
       ·毛细管区带电泳(Capiliary zone electrophoresis, CZE)第30-31页
       ·毛细管等电聚焦电泳(Capillary osoelectricfocusing, CIEF)第31页
       ·毛细管凝胶电泳(capillary gel electrophoresis,CCE)第31页
     ·抗氧化肽的结构鉴定第31-32页
   ·本课题的立题依据和意义第32-33页
   ·本课题的研究内容第33-34页
  参考文献第34-42页
第二章 鹰嘴豆蛋白酶解工艺的研究第42-60页
   ·前言第42页
   ·材料与仪器第42-43页
     ·材料第42页
     ·主要仪器第42-43页
   ·实验方法第43-47页
     ·鹰嘴豆蛋白提取工艺第43页
     ·总氮测定第43页
     ·多糖含量的测定第43页
     ·总酚含量的测定第43页
     ·氨基酸组成的测定第43-44页
     ·蛋白酶酶活测定第44-45页
       ·标准曲线的绘制第44页
       ·蛋白酶测定第44-45页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解工艺第45-46页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解用酶的筛选实验第46页
     ·碱性蛋白酶Alcalase 酶解鹰嘴豆蛋白的单因素试验第46页
     ·最佳酶解条件的优化第46页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物还原能力的测定第46页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物捕获超氧阴离子自由基的测定第46-47页
   ·结果与分析第47-58页
     ·原料鹰嘴豆蛋白的成分分析第47页
     ·鹰嘴豆蛋白的氨基酸组成第47-48页
     ·蛋白酶的筛选第48-50页
       ·不同蛋白酶对鹰嘴豆蛋白水解度(DH)的影响第48-49页
       ·不同酶对鹰嘴豆蛋白抗氧化性的影响第49-50页
     ·Alcalase 蛋白酶水解鹰嘴豆蛋白的单因素试验第50-52页
       ·温度对水解度的影响第50页
       ·pH 值对水解度的影响第50-51页
       ·底物浓度对水解度影响第51页
       ·加酶量与底物浓度比(E第51-52页
     ·酶解条件的优化第52-58页
       ·Alcalase 水解鹰嘴豆蛋白工艺的试验分析与回归方程的建立第52-57页
       ·验证实验第57-58页
   ·本章小结第58页
 参考文献第58-60页
第三章 鹰嘴豆蛋白酶解物体外抗氧化活性的研究第60-76页
   ·前言第60页
   ·材料与仪器第60-61页
     ·材料第60-61页
     ·主要仪器第61页
   ·试验方法第61-63页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物还原能力的测定第61页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物对DPPH 自由基的捕获能力的测定第61-62页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物的超氧阴离子自由基捕获能力的测定第62页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物的羟自由基(·OH)捕获能力的测定—采用邻氮二菲法比色法第62页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物螯合金属离子能力的测定第62-63页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物抗脂质过氧化能力第63页
   ·结果与讨论第63-72页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物还原能力的测定第63-64页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物对 DPPH 自由基的捕获能力第64-65页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物的超氧阴离子自由基捕获能力第65-66页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物的羟自由基(·OH)捕获能力第66-67页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物对金属离子的螯合作用第67-68页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物对亚油酸自氧化的抑制能力第68-69页
     ·不同水解度鹰嘴豆蛋白酶解物的相对分子量分布第69-71页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物体外抗氧化性的讨论第71-72页
   ·本章小结第72-73页
 参考文献第73-76页
第四章 鹰嘴豆蛋白酶解物体内抗氧化活性第76-86页
   ·前言第76-77页
   ·材料与仪器第77页
     ·材料第77页
     ·仪器第77页
   ·方法第77-79页
     ·动物分组第77页
     ·组织样品的制备及蛋白质含量的测定第77-78页
     ·血清、肝脏和心脏匀浆SOD 活性测定第78页
     ·血清、肝脏和心脏匀浆中GSH-Px 的测定第78页
     ·血清、肝脏和心脏匀浆中丙二醛(MDA)含量的测定第78-79页
     ·统计学分析第79页
   ·结果与讨论第79-83页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物灌胃实验小鼠的体重变化第79页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物对小鼠血清抗氧化功能的影响第79-80页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物对小鼠肝脏组织抗氧化功能的影响第80页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物对小鼠心脏组织抗氧化功能的影响第80-81页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物体内抗氧化活性的讨论第81-83页
   ·本章小结第83页
 参考文献第83-86页
第五章 鹰嘴豆蛋白酶解物抗氧化活性肽的分离纯化及鉴定第86-102页
   ·前言第86页
   ·材料与仪器第86-87页
     ·材料第86页
     ·主要仪器设备第86-87页
   ·试验方法第87-88页
     ·样品制备第87页
     ·凝胶色谱分离抗氧化肽第87页
     ·半制备RP-HPLC 分离抗氧化肽第87页
     ·RP-HPLC 分析抗氧化肽第87页
     ·抗氧化肽氨基酸组成分析第87页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解物相对分子量分布的测定第87-88页
     ·MALDI-TOF-TOF MS 质谱分析第88页
     ·抗氧化活性的测定第88页
       ·鹰嘴豆蛋白酶解物抗脂质过氧化能力第88页
       ·鹰嘴豆蛋白酶解物对 DPPH 自由基的捕获能力的测定第88页
       ·鹰嘴豆蛋白酶解物清除超氧阴离子自由基的测定第88页
       ·鹰嘴豆蛋白酶解物的羟自由基(·OH)捕获能力的测定第88页
   ·结果与讨论第88-99页
     ·凝胶过滤色谱分离鹰嘴豆蛋白酶解物第88-93页
       ·凝胶过滤色谱分离条件的确定第88-89页
       ·凝胶过滤色谱分离组分抗氧化活性的测定第89-92页
       ·组分Fra.IV 的相对分子量组成分析第92-93页
     ·半制备RP-HPLC 分离鹰嘴豆蛋白酶解物Fra.IV第93-94页
     ·鹰嘴豆蛋白酶解抗氧化肽的结构鉴定第94-97页
       ·鹰嘴豆蛋白酶解抗氧化肽的纯度的鉴定第94-95页
       ·鹰嘴豆蛋白酶解抗氧化肽的氨基酸组成分析第95页
       ·鹰嘴豆蛋白酶解抗氧化肽的结构鉴定第95-97页
     ·抗氧化活性肽的序列比对第97页
     ·Fra.IV-7 抗氧化能力的测定第97-99页
   ·本章小结第99页
 参考文献第99-102页
第六章 超高压处理对鹰嘴豆酶解物抗氧化性影响的研究第102-118页
   ·前言第102页
   ·材料与设备第102-103页
     ·主要材料第102-103页
     ·主要设备第103页
   ·实验方法第103-105页
     ·酶解在超高压处理之后进行的实验方法第103-104页
       ·鹰嘴豆分离蛋白溶液的配制第103页
       ·鹰嘴豆分离蛋白溶液的超高压处理第103页
       ·鹰嘴豆分离蛋白的酶解工艺第103-104页
       ·水解度的测定第104页
       ·鹰嘴豆蛋白的紫外扫描第104页
     ·酶解在超高压处理过程中进行的实验方法第104页
       ·鹰嘴豆分离蛋白溶液的配制第104页
       ·鹰嘴豆分离蛋白溶液的超高压处理第104页
       ·酶活力的测定第104页
     ·鹰嘴豆酶解物的抗氧化活性的测定第104页
     ·CPH 相对分子量分布的测定第104-105页
   ·结果与讨论第105-115页
     ·超高压预处理对CPI 紫外吸收光谱的影响第105页
     ·超高压预处理对CPI 水解度的影响第105-107页
     ·超高压预处理对CPH 抗氧化性的影响第107-108页
     ·超高压下酶解对Alcalase 活力的影响第108页
     ·超高压下酶解对CPI 水解度的影响第108-110页
     ·超高压下酶解对CPH 抗氧化性的影响第110页
     ·超高压下酶解对CPH 相对分子量分布的影响第110-115页
   ·本章小结第115-116页
 参考文献第116-118页
主要结论第118-120页
展望第120-121页
论文创新点第121-122页
附录一:氨基酸序列为 ASN-ARG-TYR-HIS-GLU 的查新结果第122-123页
在学期间发表的论文第123-124页
致谢第124页

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