| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩写词 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| 1 金柑属及其杂交种四季桔种质资源保存研究进展 | 第14-17页 |
| ·金柑属及其杂交种四季桔种质资源保存现状及存在的问题 | 第14-15页 |
| ·金柑属及其杂交种四季桔试管苗离体保存研究进展 | 第15-17页 |
| ·金柑属植物离体保存材料的选择 | 第15-16页 |
| ·金柑属植物离体保存方法 | 第16-17页 |
| 2 种质资源离体保存过程中的遗传变异研究 | 第17-18页 |
| ·影响体细胞无性系变异的因素 | 第17页 |
| ·体细胞无性系变异的检测 | 第17-18页 |
| 3 蛋白质组学在植物上的应用 | 第18-19页 |
| ·蛋白质组学研究内容及支柱技术 | 第18-19页 |
| ·蛋白质组学在植物生命活动中的应用 | 第19页 |
| 4 本研究的目的意义和主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 金弹和四季桔胚苗获得及再生体系的建立 | 第20-45页 |
| 第一节 金弹和四季桔胚培养及其再生体系建立 | 第20-37页 |
| 1 试验材料与方法 | 第20-23页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-23页 |
| ·无菌系的建立 | 第21页 |
| ·种胚剥取 | 第21页 |
| ·四季桔种子萌发最适盐浓度和糖含量的筛选 | 第21页 |
| ·四季桔胚培养培养试管苗增殖最适激素种类的筛选 | 第21-22页 |
| ·四季桔胚培养试管苗增殖最适激素浓度配比的筛选 | 第22页 |
| ·四季桔胚培养试管苗壮苗最适激素浓度配比的筛选 | 第22-23页 |
| ·四季桔试管苗最适的生根培养基筛选 | 第23页 |
| ·10份金弹和四季桔资源胚培养试管苗的无菌系的建立 | 第23页 |
| 2 结果分析 | 第23-36页 |
| ·不同种皮剥除方式对种胚完整性的影响 | 第23-24页 |
| ·不同盐浓度和糖含量配比对四季桔种子萌发的影响 | 第24-27页 |
| ·不同盐浓度对四季桔种子萌发的影响 | 第25页 |
| ·不同糖含量对四季桔种子萌发的影响 | 第25-26页 |
| ·对种子萌发最适合的盐浓度和糖含量配比 | 第26-27页 |
| ·不同激素种类对四季桔胚苗生长的影响 | 第27页 |
| ·不同激素浓度对四季桔试管苗增殖的影响 | 第27-30页 |
| ·不同BA浓度对四季桔试管苗增殖的影响 | 第29页 |
| ·不同NAA浓度对四季桔试管苗增殖的影响 | 第29页 |
| ·最适合四季桔试管苗增殖的BA与NAA浓度组合 | 第29-30页 |
| ·不同激素浓度对四季桔试管苗壮苗的影响 | 第30-33页 |
| ·不同BA浓度对四季桔试管苗壮苗的影响 | 第32页 |
| ·不同NAA浓度对四季桔试管苗壮苗的影响 | 第32页 |
| ·最适合四季桔试管苗壮苗的BA和NAA浓度组合 | 第32-33页 |
| ·不同激素浓度对四季桔试管苗生根的影响 | 第33-36页 |
| ·不同NAA浓度对四季桔试管苗生根的影响 | 第35页 |
| ·不同IBA浓度对四季桔试管苗生根的影响 | 第35页 |
| ·最适合四季桔试管苗生根的NAA与IBA浓度组合 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| ·盐浓度和糖含量对金弹和四季桔种子萌发的影响 | 第36-37页 |
| ·金弹和四季桔试管苗玻璃化和愈伤化现象 | 第37页 |
| ·金弹和四季桔试管苗自发生根现象 | 第37页 |
| 第二节 金弹和四季桔珠心胚的鉴定 | 第37-45页 |
| 1 材料与方法 | 第37-39页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·试剂和仪器 | 第37-38页 |
| ·药品 | 第37-38页 |
| ·仪器 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-39页 |
| ·DNA的提取 | 第38页 |
| ·DNA质量检测 | 第38页 |
| ·DNA酶切及电泳 | 第38-39页 |
| ·RAPD-P CR扩增及电泳 | 第39页 |
| ·球心胚的鉴定 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-43页 |
| ·四季桔基因组DNA微量提取与纯度分析 | 第39-40页 |
| ·四季桔基因组DNA酶切结果分析 | 第40-41页 |
| ·四季桔基因组DNA的PCR扩增结果分析 | 第41页 |
| ·四季桔珠心胚苗的鉴定 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| ·四季桔基因组DNA微量提取的关键技术 | 第43-44页 |
| ·四季桔基因组DNA基因组提取方法的应用价值 | 第44页 |
| ·RAPD-PCR技术对金弹和四季桔珠心胚的鉴定 | 第44-45页 |
| 第三章 金弹和四季桔珠心胚试管苗离体保存 | 第45-56页 |
| 第一节 金弹和四季桔珠心胚培养试管苗离体保存条件优化 | 第45-52页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·四季桔试管苗不同类型在不同培养基中的离体保存试验 | 第45-46页 |
| ·生长调节剂对四季桔试管苗保存影响试验 | 第46页 |
| ·保存容器的类型,培养基体积和封口方式对四季桔试管苗保存影响试验 | 第46页 |
| ·10份金弹和四季桔资源珠心胚的离体保存 | 第46页 |
| 2 结果分析 | 第46-51页 |
| ·不同类型与不同培养基组合对四季桔试管苗离体保存时间的影响 | 第46-49页 |
| ·不同类型的试管苗对四季桔试管苗保存1a成活率的影响 | 第47-48页 |
| ·不同培养基组分对四季桔试管苗保存1a成活率的影响 | 第48页 |
| ·试管苗保存1a成活率的影响最大的试管苗类型和培养基组分 | 第48-49页 |
| ·生长调节剂对四季桔试管苗生长和保存的影响 | 第49页 |
| ·保存容器的类型,培养基体积和封口方式对培养基水分的影响 | 第49-51页 |
| ·保存容器的类型对四季桔试管苗生长和保存的影响 | 第49-50页 |
| ·封口方式对培养基失水率的影响 | 第50-51页 |
| ·培养基体积对四季桔试管苗生长和保存时间的影响 | 第51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| ·试管苗类型对无继代保存时间的影响 | 第51页 |
| ·培养基组分和失水对保存时间的影响 | 第51-52页 |
| ·生长调节剂对保存时间的影响 | 第52页 |
| ·保存容器及封口方式对保存时间的影响 | 第52页 |
| 第二节 金弹和四季桔珠心胚的离体种质保存检测 | 第52-56页 |
| 1 材料与方法 | 第53页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·方法 | 第53页 |
| ·金弹和四季桔试管苗复壮继代检测 | 第53页 |
| ·金弹和四季桔试管苗遗传稳定性检测 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-54页 |
| ·金弹和四季桔复壮继代 | 第53-54页 |
| ·金弹和四季桔试管苗保存过程中的变异检测 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| ·金弹和四季桔试管苗复壮继代 | 第54-55页 |
| ·金弹和四季桔试管苗限制生长保存过程中的遗传变异 | 第55-56页 |
| 第四章 四季桔珠心胚试管苗离体保存过程中的蛋白质组学研究 | 第56-78页 |
| 第一节 四季桔心胚试管苗离体保存过程中双向电泳研究 | 第56-66页 |
| 1 材料与方法 | 第56-59页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·仪器与试剂 | 第56-57页 |
| ·蛋白质样品的提取 | 第57页 |
| ·丙酮干粉的制备 | 第57页 |
| ·蛋白质样品的提取 | 第57页 |
| ·蛋白质总量测定 | 第57-58页 |
| ·蛋白质总量提取 | 第57页 |
| ·二喹啉甲酸(BCA)试剂配制 | 第57-58页 |
| ·BCA测定方法 | 第58页 |
| ·四季桔蛋白质样品双向电泳 | 第58-59页 |
| ·第一向等电聚焦(IEF)电泳 | 第58页 |
| ·第二向SDS-PAGE | 第58-59页 |
| ·电泳后的检测 | 第59页 |
| 2 结果分析 | 第59-65页 |
| ·四季桔试管苗蛋白总量测定 | 第59-61页 |
| ·不同pH梯度范围对四季桔蛋白质组分分离结果比较 | 第61-62页 |
| ·四季桔试管苗双向电泳分离图谱 | 第62页 |
| ·四季桔试管苗蛋白质组分变化 | 第62-65页 |
| ·四季桔试管苗蛋白质组分变化与保存时间的关系 | 第63页 |
| ·四季桔试管胚苗特异蛋白质组分变化 | 第63-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| ·四季桔试管苗与不继代保存的生理状态 | 第65页 |
| ·影响金弹和四季桔试管苗不继代长期保存的蛋白质 | 第65-66页 |
| ·双向电泳分离蛋白质的应用效果 | 第66页 |
| 第二节 四季桔试管苗保存过程中特异蛋白的肽质量指纹(MALDI-TOF)图谱分析 | 第66-78页 |
| 1 材料与方法 | 第66-67页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·肽的原位酶解 | 第66-67页 |
| ·考马斯亮蓝染色凝胶的脱色 | 第66-67页 |
| ·酶解 | 第67页 |
| ·肽段提取 | 第67页 |
| ·肽质量指纹(MALDI-TOF)图谱分析 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-76页 |
| ·肽质量指纹(MALDI-TOF)图谱分析的蛋白质组分位置 | 第67-68页 |
| ·蛋白质组分X1、X2的肽质量指纹(MALDI-TOF)图谱分析 | 第68-71页 |
| ·蛋白质组分J1、J2的肽质量指纹(MALDI-TOF)图谱分析 | 第71-75页 |
| ·蛋白质组分J3的肽质量指纹(MALDI-TOF)图谱分析 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-78页 |
| ·热激蛋白(HSPs)的功能 | 第76-77页 |
| ·miraculin蛋白的功能 | 第77-78页 |
| 第五章 小结 | 第78-81页 |
| 1. 种质遗传的稳定性 | 第78页 |
| 2. 建立了高效的金弹和四季桔试管苗再生体系 | 第78页 |
| 3. 离体保存限制生长因子对柑桔试管苗保存的影响 | 第78-79页 |
| 4. 10份金弹和四季桔珠心胚苗保存长达1年 | 第79页 |
| 5. 试管苗限制生长保存遗传稳定性的RAPD分析 | 第79页 |
| 6. 四季桔试管苗离体保存过程中的蛋白质组学研究 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 附录Ⅰ | 第85-87页 |
| 附录Ⅱ | 第87-92页 |
| 附录Ⅲ | 第92-96页 |
| 附录Ⅳ | 第96-100页 |
| 附录Ⅴ | 第100-103页 |
| 图版及图版说明 | 第103-119页 |
| 在学期间发表论文情况与参加学术会议情况 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
