| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-38页 |
| 1 水稻秸秆资源及其降解方式 | 第16-21页 |
| ·水稻秸秆的组成与结构 | 第16-18页 |
| ·水稻秸秆的预处理 | 第18-19页 |
| ·物理方法预处理水稻秸秆 | 第18页 |
| ·化学方法预处理水稻秸秆 | 第18-19页 |
| ·生物方法预处理水稻秸秆 | 第19页 |
| ·水稻秸秆纤维素的降解方式 | 第19-21页 |
| ·水稻秸秆的酸水解 | 第20页 |
| ·水稻秸秆的酶水解 | 第20-21页 |
| 2 纤维素酶的性质与用途 | 第21-27页 |
| ·纤维素酶的多酶体系 | 第21-22页 |
| ·纤维素酶的分子结构 | 第22-24页 |
| ·纤维素酶的作用机理 | 第24-25页 |
| ·纤维素酶的分子量大小 | 第25-26页 |
| ·纤维素酶的最适反应条件与稳定性 | 第26页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第26-27页 |
| 3 纤维素酶的生产 | 第27-30页 |
| ·纤维素酶的生产菌种选育 | 第27-29页 |
| ·纤维素酶的生产 | 第29-30页 |
| 4 水稻秸秆原料生物转化燃料乙醇 | 第30-34页 |
| ·燃料乙醇的优越性和使用现状 | 第30-31页 |
| ·水稻秸秆纤维素生物转化燃料乙醇的方法 | 第31-32页 |
| ·分步水解发酵法生产燃料乙醇 | 第31页 |
| ·同步糖化发酵法生产燃料乙醇 | 第31-32页 |
| ·固定化细胞发酵生产燃料乙醇 | 第32页 |
| ·酿酒酵母途径工程应用于燃料乙醇的生产 | 第32-34页 |
| 5 本研究的目的、意义和主要内容 | 第34-38页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第34-35页 |
| ·本研究的思路和技术路线 | 第35-36页 |
| ·本研究的主要内容 | 第36-38页 |
| 第二章 纤维素酶高产菌株的选育及产酶条件研究 | 第38-60页 |
| 1 材料与方法 | 第38-44页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·试剂与溶液配制 | 第38-39页 |
| ·菌种与菌种分离源 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·主要仪器与设备 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-44页 |
| ·水稻秸秆的预处理 | 第40页 |
| ·纤维素酶高产菌的分离与纯化 | 第40页 |
| ·纤维素酶高产菌的初步鉴定 | 第40页 |
| ·纤维素酶高产菌的原生质体紫外诱变 | 第40-41页 |
| ·YT02产纤维素酶的液体发酵培养方法 | 第41-42页 |
| ·不同预处理水稻秸秆的酶水解 | 第42页 |
| ·分析方法 | 第42-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-58页 |
| ·不同预处理水稻秸秆的各组分含量 | 第44页 |
| ·纤维素酶高产菌的分离与筛选 | 第44-46页 |
| ·纤维素高产菌YT01的菌种鉴定 | 第46页 |
| ·纤维素酶高产菌YT01的原生质体紫外诱变 | 第46-47页 |
| ·液体发酵培养基成分与发酵条件对YT02产纤维素酶的影响 | 第47-56页 |
| ·不同碳源对YT02产酶的影响 | 第47-48页 |
| ·不同预处理水稻秸秆对YT02产酶的影响 | 第48-49页 |
| ·不同氮源对YT02产纤维素酶的影响 | 第49-50页 |
| ·微晶纤维素添加量对YT02产纤维素酶的影响 | 第50页 |
| ·不同无机盐对YT01产纤维素酶的影响 | 第50-51页 |
| ·起始pH对YT01产纤维素酶的影响 | 第51-52页 |
| ·装液量对YT02产纤维素酶的影响 | 第52页 |
| ·转速对YT02产纤维素酶的影响 | 第52-53页 |
| ·培养温度对YT02产纤维素酶的影响 | 第53-54页 |
| ·接种量对YT02产纤维素酶的影响 | 第54-55页 |
| ·培养时间对YT02产酶的影响 | 第55-56页 |
| ·纤维素酶的酶学性质研究 | 第56-57页 |
| ·温度对纤维素酶各组分酶活的影响 | 第56页 |
| ·pH对纤维素酶各组分酶活的影响 | 第56-57页 |
| ·纤维素酶对不同预处理水稻秸秆的酶解试验 | 第57-58页 |
| 3 结论与讨论 | 第58-60页 |
| ·关于筛选出的纤维素酶高产菌株 | 第58页 |
| ·纤维素酶生产菌的改造 | 第58-59页 |
| ·青霉YT02产酶条件与酶学特性 | 第59-60页 |
| 第三章 YT02产纤维素酶发酵培养基的优化研究 | 第60-78页 |
| 1 材料与方法 | 第60-62页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·试剂 | 第60页 |
| ·供试菌种 | 第60页 |
| ·培养基 | 第60-61页 |
| ·主要仪器与设备 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-62页 |
| ·实验设计 | 第61页 |
| ·培养方法 | 第61页 |
| ·分析方法 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-76页 |
| ·部分因子实验筛选发酵培养基的主要影响因子 | 第62-65页 |
| ·最陡爬坡实验逼近发酵培养基最优点 | 第65-66页 |
| ·中心组合设计优化YT02发酵培养基组成 | 第66-74页 |
| ·发酵过程中pH、残余还原糖与纤维素酶变化的测定结果 | 第74-76页 |
| 3 结论与讨论 | 第76-78页 |
| 第四章 YT02分批发酵产纤维素酶的研究 | 第78-91页 |
| 1 材料与方法 | 第78-80页 |
| ·材料 | 第78-79页 |
| ·试剂 | 第78页 |
| ·菌株 | 第78-79页 |
| ·培养基 | 第79页 |
| ·主要仪器 | 第79页 |
| ·方法 | 第79-80页 |
| ·用于分批发酵的种子培养 | 第79页 |
| ·恒温分批发酵对YT02产纤维素酶的影响 | 第79页 |
| ·变温分批发酵对YT02产纤维素酶的影响 | 第79页 |
| ·溶氧量对YT02分批发酵产纤维素酶的影响 | 第79-80页 |
| ·分段溶氧对YT02分批发酵产纤维素酶的影响 | 第80页 |
| ·分析方法 | 第80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-88页 |
| ·发酵温度对YT02产纤维素酶的影响结果 | 第80-83页 |
| ·变温发酵对YT02产纤维素酶的影响结果 | 第83-84页 |
| ·溶氧对YT02产纤维素酶的影响结果 | 第84-87页 |
| ·分段溶氧分批发酵对YT02产纤维素酶的影响结果 | 第87-88页 |
| 3 结论与讨论 | 第88-91页 |
| 第五章 YT02产纤维素酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第91-111页 |
| 1 材料与方法 | 第91-102页 |
| ·材料 | 第91-93页 |
| ·试验材料 | 第91页 |
| ·主要试剂 | 第91-92页 |
| ·常用储备液及缓冲液 | 第92-93页 |
| ·主要仪器 | 第93页 |
| ·方法 | 第93-102页 |
| ·蛋白质浓度的测定方法 | 第93-94页 |
| ·纤维素酶的分离纯化 | 第94-98页 |
| ·纤维素酶SDS-PAGE凝胶电泳纯化及酶相对分子量的测定 | 第98-100页 |
| ·酶蛋白的N端测序 | 第100-101页 |
| ·酶蛋白的质谱分析 | 第101-102页 |
| 2 结果与分析 | 第102-109页 |
| ·DEAE-Sephadex A-25阴离子交换层析结果 | 第102-103页 |
| ·层析收集管酶蛋白同洗脱缓冲液NaCl浓度的关系 | 第102-103页 |
| ·层析收集管酶蛋白活性检测 | 第103页 |
| ·Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析结果 | 第103-104页 |
| ·Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析分离酶蛋白 | 第103页 |
| ·分子筛凝胶过滤层析纤维素酶活测定结果 | 第103-104页 |
| ·纤维素酶各纯化步骤纯化情况 | 第104-105页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯酸胺凝胶电泳 | 第105-106页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯酸胺凝胶电泳银染结果 | 第105-106页 |
| ·纤维素酶分子量SDS-PAGE凝胶电泳测定结果 | 第106页 |
| ·酶蛋白的N端测序结果 | 第106-108页 |
| ·酶蛋白的质谱分析结果 | 第108-109页 |
| 3 结论与讨论 | 第109-111页 |
| 第六章 酿酒酵母纤维二糖代谢途径的构建及其细胞固定化研究 | 第111-127页 |
| 1 材料和方法 | 第111-118页 |
| ·材料 | 第111-113页 |
| ·菌株和质粒 | 第111页 |
| ·分子克隆用酶和试剂 | 第111-112页 |
| ·水稻秸秆水解液的制备 | 第112-113页 |
| ·方法 | 第113-118页 |
| ·含纤维二糖酶基因(BGL1)的重组质粒pYMIKP-BGL1的构建方法 | 第113-114页 |
| ·酿酒酵母纤维二糖代谢途径的搭建方法 | 第114-116页 |
| ·酿酒酵母工程菌细胞的固定化方法 | 第116-117页 |
| ·固定化酵母细胞发酵方法 | 第117页 |
| ·分析方法 | 第117-118页 |
| 2 结果与分析 | 第118-123页 |
| ·表达BGL1基因的重组菌株的构建结果 | 第118-120页 |
| ·目的基因BGL1的获得 | 第118页 |
| ·含目的基因BGL1重组质粒的构建 | 第118-119页 |
| ·酿酒酵母工业菌株NAN-27转化子的获得 | 第119页 |
| ·转化子NAN-28细胞纤维二糖酶活性测定结果 | 第119-120页 |
| ·不同固定化条件对NAN-28细胞固定化的影响结果 | 第120-121页 |
| ·不同溶剂对固定化细胞转化纤维二搪的测定结果 | 第120页 |
| ·不同海藻酸钠浓度对固定化细胞凝胶特性的影响 | 第120-121页 |
| ·酵母包埋量对固定化细胞转化纤维二糖的影响结果 | 第121页 |
| ·固定化细胞与游离细胞分批发酵实验结果 | 第121-122页 |
| ·固定化细胞重复分批发酵试验结果 | 第122-123页 |
| 3 结论与讨论 | 第123-127页 |
| ·酿酒酵母纤维二糖代谢途径的构建 | 第123-125页 |
| ·酿酒酵母工程菌细胞固定化 | 第125-127页 |
| 第七章 串联式生物反应器转化水稻秸秆生产燃料乙醇的研究 | 第127-139页 |
| 1 材料与方法 | 第127-131页 |
| ·材料 | 第127页 |
| ·试剂 | 第127页 |
| ·菌种 | 第127页 |
| ·主要仪器与设备 | 第127页 |
| ·方法 | 第127-131页 |
| ·稻草粉的预处理 | 第127-128页 |
| ·纤维素酶的制备 | 第128页 |
| ·稻草粉的酶解糖化 | 第128-129页 |
| ·水稻秸秆生物转化燃料乙醇 | 第129-130页 |
| ·测定方法 | 第130-131页 |
| 2 结果与分析 | 第131-137页 |
| ·不同预处理方法对水稻秸秆糖化效果的影响结果 | 第131页 |
| ·不同温度对水稻秸秆糖化效果的影响结果 | 第131-132页 |
| ·不同pH对稻草粉糖化效果的影响结果 | 第132-133页 |
| ·不同加酶量对稻草粉糖化效果的影响结果 | 第133页 |
| ·不同底物浓度对稻草粉糖化效果的影响结果 | 第133-134页 |
| ·水稻秸秆同步糖化发酵(SSF)结果 | 第134-135页 |
| ·串联式反应器转化水稻秸秆生产乙醇 | 第135-137页 |
| ·固定化NAN-28细胞发酵生产燃料乙醇结果 | 第135-136页 |
| ·串联式生物反应器的稳定性结果 | 第136-137页 |
| ·分批添料式协同酶解发酵生产燃料乙醇结果 | 第137页 |
| 3 结论与讨论 | 第137-139页 |
| ·二级串联式生物反应器生产乙醇 | 第137-138页 |
| ·分批添料式协同酶解发酵工艺 | 第138页 |
| ·水稻秸秆资源的全利用 | 第138-139页 |
| 第八章 结论 | 第139-141页 |
| 主要参考文献 | 第141-161页 |
| 英文缩写与主要符号表 | 第161-162页 |
| 本研究的特色与创新 | 第162-163页 |
| 发表与待发表的学术论文及成果 | 第163-164页 |
| 致谢 | 第164-165页 |
| 作者简介 | 第165页 |
