| 缩略词表1 | 第1-10页 |
| 缩略词表2 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-36页 |
| 1 引言 | 第16-17页 |
| 2 鸡的性比及性别控制 | 第17-21页 |
| ·性比及适应性性别分配 | 第17-18页 |
| ·影响鸡性比的因素 | 第18-19页 |
| ·鸡性比调控的研究现状 | 第19-21页 |
| 3 禽类性别决定与性腺分化 | 第21-28页 |
| ·禽类的性别决定 | 第21-25页 |
| ·禽类的性腺分化 | 第25-26页 |
| ·禽类性腺发育相关基因 | 第26-28页 |
| 4 功能基因组学研究方法及在性腺发育研究中的应用 | 第28-31页 |
| ·基于mRNA水平的基因表达研究方法 | 第28-29页 |
| ·基于生物信息学的基因功能探讨 | 第29-30页 |
| ·基于突变体的基因功能研究 | 第30页 |
| ·基于蛋白质组学的基因功能研究 | 第30-31页 |
| 5 利用抑制消减杂交技术分离差异表达基因 | 第31-34页 |
| ·抑制消减杂交技术的发展历程 | 第31页 |
| ·抑制消减杂交技术的原理和基本操作过程 | 第31-33页 |
| ·抑制消减杂交在分离差异表达基因中的应用 | 第33-34页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 早期鸡胚性别鉴定及鸡群子代性比分析 | 第36-52页 |
| 1 前言 | 第36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-41页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·实验样品 | 第36-37页 |
| ·主要仪器和设备 | 第37页 |
| ·主要药品及试剂 | 第37页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配制 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第38-39页 |
| ·双重PCR鉴定鸡的性别 | 第39-40页 |
| ·种蛋孵化、胚胎发育阶段划分及性别鉴定 | 第40-41页 |
| ·数据统计及分析 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-46页 |
| ·性别鉴定分子方法的建立及准确性验证 | 第41-43页 |
| ·早期死亡鸡胚的性别判定 | 第43-44页 |
| ·鸡群子代性比分析 | 第44-45页 |
| ·高繁殖力母鸡亲本性比分析 | 第45页 |
| ·孵化过程中死亡鸡胚性比分析 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-52页 |
| ·禽类的性别鉴定 | 第46-47页 |
| ·性别鉴定中性染色体连锁特异片段的选择 | 第47-48页 |
| ·早期鸡胚性别鉴定的可行性及其应用 | 第48-49页 |
| ·子代性比偏向的原因 | 第49页 |
| ·性别偏向性死亡的原因 | 第49-50页 |
| ·鸡的性比调控 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第三章 性分化早期鸡胚性别差异表达基因的分离 | 第52-83页 |
| 1 前言 | 第52页 |
| 2 材料和方法 | 第52-65页 |
| ·实验材料 | 第52-54页 |
| ·实验样品 | 第52页 |
| ·主要仪器和设备 | 第52-53页 |
| ·试剂盒、主要试剂及酶、载体及菌株 | 第53-54页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配制 | 第54页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第54页 |
| ·主要参考数据库 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-65页 |
| ·胚胎性腺组织总RNA的提取 | 第54-55页 |
| ·鸡胚性腺mRNA的分离 | 第55-57页 |
| ·抑制消减杂交 | 第57-62页 |
| ·消减文库的构建 | 第62-63页 |
| ·消减cDNA文库的斑点杂交筛选 | 第63-65页 |
| ·阳性克隆cDNA片段测序及序列分析 | 第65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-78页 |
| ·胚胎性腺总RNA的提取和检测 | 第65-66页 |
| ·抑制消减文库构建 | 第66-69页 |
| ·Driver cDNA和Tester cDNA的制备 | 第66-67页 |
| ·抑制性消减杂交产物及消减效率 | 第67-69页 |
| ·消减cDNA文库插入片段的鉴定 | 第69页 |
| ·斑点杂交 | 第69-70页 |
| ·差异表达克隆序列分析 | 第70-78页 |
| ·差异表达克隆的序列比对 | 第70-71页 |
| ·差异表达克隆的同源基因 | 第71-75页 |
| ·差异表达基因在鸡基因组中的分布 | 第75-76页 |
| ·差异表达克隆cDNA片段与鸡性腺文库的同源EST比较 | 第76-78页 |
| 4 讨论 | 第78-83页 |
| ·抑制消减杂交的质量检测 | 第78-79页 |
| ·斑点杂交筛选阳性差异表达克隆 | 第79页 |
| ·已分离的差异表达基因的特征 | 第79-81页 |
| ·染色质水平(转录前水平)起作用的基因 | 第79-80页 |
| ·转录水平起作用的基因 | 第80-81页 |
| ·线粒体基因 | 第81页 |
| ·与性腺发育相关的基因 | 第81-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 第四章 鸡胚性腺发育相关候选基因的表达谱分析 | 第83-104页 |
| 1 前言 | 第83页 |
| 2 材料和方法 | 第83-92页 |
| ·实验材料 | 第83-85页 |
| ·实验样品 | 第83-84页 |
| ·主要仪器和设备 | 第84页 |
| ·主要试剂和酶 | 第84页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配制 | 第84-85页 |
| ·实验方法 | 第85-92页 |
| ·半定量RT-PCR分析基因表达谱 | 第85-88页 |
| ·Real-time定量PCR分析基因表达谱 | 第88页 |
| ·整体组织原位杂交(WISH) | 第88-92页 |
| 3 结果与分析 | 第92-101页 |
| ·功能候选基因的发育表达谱 | 第92-95页 |
| ·消减文库中差异表达基因的发育表达谱 | 第95-100页 |
| ·SMARCE1基因的组织原位杂交分析 | 第100-101页 |
| 4 讨论 | 第101-104页 |
| ·功能候选基因在鸡与哺乳动物性腺发育中的表达 | 第101页 |
| ·消减文库中差异表达基因的发育表达谱 | 第101-102页 |
| ·SMARCE1基因在鸡胚中原位组织表达 | 第102-103页 |
| ·小结 | 第103-104页 |
| 第五章 两个鸡性别差异表达基因的克隆及序列特征分析 | 第104-117页 |
| 1 前言 | 第104页 |
| 2 材料和方法 | 第104-107页 |
| ·实验材料 | 第104页 |
| ·实验样品 | 第104页 |
| ·主要试剂 | 第104页 |
| ·实验方法 | 第104-107页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第104-106页 |
| ·RACE-PCR克隆差异表达的基因的cDNA全长 | 第106-107页 |
| ·RACE-PCR产物的回收和纯化、克隆及测序 | 第107页 |
| ·序列分析 | 第107页 |
| 3 结果与分析 | 第107-114页 |
| ·基因F071 cDNA的克隆及分析 | 第107-111页 |
| ·5′-RACE和3′-RACE | 第108页 |
| ·基因F071核苷酸序列和推导的氨基酸序列分析 | 第108-109页 |
| ·基因F071核苷酸序列和氨基酸序列比对分析 | 第109-111页 |
| ·A041 cDNA全长的克隆及分析 | 第111-114页 |
| ·5′-RACE和3′-RACE | 第111-112页 |
| ·A041分子的核苷酸序列和推导的氨基酸序列分析 | 第112页 |
| ·A041分子的核苷酸序列比对分析 | 第112-114页 |
| 4 讨论 | 第114-117页 |
| ·蛋白的结构域及其功能位点的预测分析 | 第114页 |
| ·F071基因与HMG-14基因 | 第114-115页 |
| ·A041与非编码RNA | 第115-116页 |
| ·小结 | 第116-117页 |
| 第六章 结论与展望 | 第117-119页 |
| 1 已经取得的结果 | 第117-118页 |
| 2 需进一步研究的工作 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-131页 |
| 在读期间已发表论文题录 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132页 |
