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耐盐根瘤工程菌的获得及接种后对紫花苜蓿生长的影响

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-19页
   ·我国盐碱地现状第10页
   ·根瘤菌研究与应用现状第10-14页
     ·苜蓿根瘤菌资源调查第10-11页
     ·根瘤菌耐盐研究第11-13页
     ·根瘤菌的应用研究进展第13-14页
   ·耐盐基因工程研究进展第14-16页
     ·对耐盐机理的研究第14-15页
     ·耐盐相关基因的克隆、鉴定与应用第15-16页
   ·HAL1的作用机理及研究进展第16-17页
   ·研究背景、目的与意义第17-19页
2 材料与方法第19-30页
   ·实验材料第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·质粒和菌种第19页
     ·试剂盒、酶类第19页
     ·引物第19-20页
     ·培养基第20页
   ·实验方法第20-30页
     ·酵母DNA提取第20-21页
     ·DNA浓度与纯度的测定第21页
     ·DNA片段的PCR制备第21-22页
     ·DNA片段的胶内回收第22页
     ·HAL1基因片段的TA克隆与测序第22-23页
     ·原核表达载体的构建第23-24页
     ·质粒的提取第24-25页
     ·三亲杂交第25页
     ·工程菌中的PGEX-GST-HAL1融合蛋白的诱导和分离第25-28页
     ·工程菌的遗传稳定性测定第28页
     ·受体苜蓿根瘤菌的结瘤实验第28-29页
     ·耐盐性实验第29页
     ·工程菌的促生作用第29-30页
3 结果第30-38页
   ·HAL1基因的克隆与测序第30-31页
     ·HAL1基因的克隆第30页
     ·TA克隆第30页
     ·HAL1的测序第30-31页
   ·表达载体的构建第31-32页
   ·工程菌株的筛选第32-33页
   ·工程菌中的融合蛋白第33-34页
     ·工程菌中融合蛋白的诱导表达及纯化第33页
     ·工程菌中融合蛋白的含量的测定第33-34页
   ·工程菌在自生传代培养条件下的稳定性测定第34页
   ·受体苜蓿根瘤菌的结瘤实验第34-35页
   ·耐盐性检测第35-37页
     ·工程菌株耐盐性实验第35-36页
     ·用工程菌接种的苜蓿的耐盐实验第36-37页
   ·工程菌的促生作用第37-38页
4 讨论第38-40页
   ·关于转化基因的选择和对照植株结瘤的问题第38页
   ·GST融合蛋白提取中的参数优化第38-39页
   ·工程菌中的重组质粒的稳定性问题第39页
   ·关于耐盐工程菌今后的应用问题第39-40页
5 结论第40-41页
参考文献第41-46页
致谢第46-47页
个人简介第47页

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