摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 引言 | 第10-19页 |
·我国盐碱地现状 | 第10页 |
·根瘤菌研究与应用现状 | 第10-14页 |
·苜蓿根瘤菌资源调查 | 第10-11页 |
·根瘤菌耐盐研究 | 第11-13页 |
·根瘤菌的应用研究进展 | 第13-14页 |
·耐盐基因工程研究进展 | 第14-16页 |
·对耐盐机理的研究 | 第14-15页 |
·耐盐相关基因的克隆、鉴定与应用 | 第15-16页 |
·HAL1的作用机理及研究进展 | 第16-17页 |
·研究背景、目的与意义 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-30页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·植物材料 | 第19页 |
·质粒和菌种 | 第19页 |
·试剂盒、酶类 | 第19页 |
·引物 | 第19-20页 |
·培养基 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-30页 |
·酵母DNA提取 | 第20-21页 |
·DNA浓度与纯度的测定 | 第21页 |
·DNA片段的PCR制备 | 第21-22页 |
·DNA片段的胶内回收 | 第22页 |
·HAL1基因片段的TA克隆与测序 | 第22-23页 |
·原核表达载体的构建 | 第23-24页 |
·质粒的提取 | 第24-25页 |
·三亲杂交 | 第25页 |
·工程菌中的PGEX-GST-HAL1融合蛋白的诱导和分离 | 第25-28页 |
·工程菌的遗传稳定性测定 | 第28页 |
·受体苜蓿根瘤菌的结瘤实验 | 第28-29页 |
·耐盐性实验 | 第29页 |
·工程菌的促生作用 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-38页 |
·HAL1基因的克隆与测序 | 第30-31页 |
·HAL1基因的克隆 | 第30页 |
·TA克隆 | 第30页 |
·HAL1的测序 | 第30-31页 |
·表达载体的构建 | 第31-32页 |
·工程菌株的筛选 | 第32-33页 |
·工程菌中的融合蛋白 | 第33-34页 |
·工程菌中融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第33页 |
·工程菌中融合蛋白的含量的测定 | 第33-34页 |
·工程菌在自生传代培养条件下的稳定性测定 | 第34页 |
·受体苜蓿根瘤菌的结瘤实验 | 第34-35页 |
·耐盐性检测 | 第35-37页 |
·工程菌株耐盐性实验 | 第35-36页 |
·用工程菌接种的苜蓿的耐盐实验 | 第36-37页 |
·工程菌的促生作用 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
·关于转化基因的选择和对照植株结瘤的问题 | 第38页 |
·GST融合蛋白提取中的参数优化 | 第38-39页 |
·工程菌中的重组质粒的稳定性问题 | 第39页 |
·关于耐盐工程菌今后的应用问题 | 第39-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
个人简介 | 第47页 |