| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-29页 |
| ·泛素途径研究概况 | 第9-15页 |
| ·泛素途径的发现 | 第9页 |
| ·泛素-蛋白酶体途径基本进程 | 第9-10页 |
| ·泛素-蛋白酶体途径与疾病 | 第10-12页 |
| ·参与泛素-蛋白酶体途径的酶类 | 第12-15页 |
| ·DCN-1蛋白的研究概况 | 第15-18页 |
| ·Neddylation途径修饰蛋白Cullin | 第15页 |
| ·Neddylation途径基本进程 | 第15-16页 |
| ·Neddylation途径同泛素-蛋白酶途径的关系 | 第16-17页 |
| ·Neddylation途径相关蛋白DCN-1的研究进展 | 第17-18页 |
| ·蛋白质结构研究方法 | 第18-21页 |
| ·克隆和表达载体 | 第19页 |
| ·蛋白质表达 | 第19-20页 |
| ·蛋白质纯化 | 第20页 |
| ·高通量蛋白质结晶(high-throughput protein crystallization) | 第20页 |
| ·晶体的收获和储存 | 第20-21页 |
| ·同步加速器线束的数据收集 | 第21页 |
| ·相互作用分子的检测方法 | 第21-27页 |
| ·亲和层析及免疫印迹检测 | 第22-23页 |
| ·表面等离子共振(SPR)法 | 第23-27页 |
| ·本研究的目的意义及方法 | 第27-29页 |
| ·研究内容及方法 | 第27页 |
| ·研究目的及意义 | 第27-29页 |
| 第二章 载体构建及融合蛋白的表达纯化 | 第29-36页 |
| ·材料和方法 | 第29-31页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·结果 | 第31-34页 |
| ·重组质粒PGEX-4T-2-Dcn1P的构建 | 第31-32页 |
| ·融合蛋白的表达及纯化 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 DCN1P蛋白晶体的筛选及优化 | 第36-41页 |
| ·材料和方法 | 第36-37页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-39页 |
| ·Dcn1P蛋白晶体的初筛 | 第37页 |
| ·Dcn1P蛋白晶体的优化 | 第37-38页 |
| ·Dcn1P蛋白晶体重原子浸泡 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 与DCN1P相互作用蛋白检测 | 第41-47页 |
| ·材料和方法 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·结果 | 第43-46页 |
| ·推测相互作用蛋白与Dcn1p的亲和层析与免疫印迹检测 | 第43-44页 |
| ·Rbx1同Dcn1p结合关系的表面等离子共振(SPR)检测 | 第44-46页 |
| ·Rbx1同Dcn1p结合关系的定量实验 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 缩略词 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
