| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-24页 |
| 1. 莨菪烷生物碱概况 | 第13-16页 |
| ·莨菪烷生物碱的合成途径 | 第14页 |
| ·莨菪烷生物碱的化学合成 | 第14-16页 |
| 2. 三分三植物的相关资料 | 第16-17页 |
| ·植物性状 | 第16页 |
| ·生药材鉴定 | 第16-17页 |
| 3. 细胞培养 | 第17-19页 |
| 4. 利用植物代谢工程手段提高托品烷生物碱的含量 | 第19-22页 |
| ·托品生物碱合成途径中的关键酶及其基因克隆 | 第19-21页 |
| ·诱导子对莨菪烷生物碱合成途径的调控 | 第21-22页 |
| 5. 利用植物代谢工程手段提高莨菪生物碱的含量 | 第22-23页 |
| 6. 本研究的目标及拟解决的问题 | 第23-24页 |
| 第二章 材料和方法 | 第24-40页 |
| 1. 材料 | 第24-26页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·载体 | 第24页 |
| ·试剂及溶液 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·常用试剂 | 第25-26页 |
| 2. 实验方法 | 第26-40页 |
| ·三分三托品烷生物碱合成关键酶基因的克隆 | 第26-33页 |
| ·三分三总RNA 的提取与检测 | 第26-28页 |
| ·三分三腐胺 N-甲基转移酶基因(AaPMT)及莨菪碱6β－羟化酶码基因（AaH6H）的克隆 | 第28-33页 |
| ·AaPMT 及AaH6H 在三分三根、茎、叶的RT-PCR 分析 | 第33-34页 |
| ·甲基茉莉酸（MJ）对AaPMT 在三分三中表达影响的RT-PCR 分析 | 第34页 |
| ·AaPMT 的基因组拷贝数分析 | 第34-35页 |
| ·植物双元表达载体的构建 | 第35-40页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第40-60页 |
| 1. 总RNA 的提取 | 第40页 |
| 2. 三分三腐胺N-甲基转移酶基因(AaPMT)的克隆 | 第40-47页 |
| ·3'RACE | 第40-41页 |
| ·5'RACE | 第41-45页 |
| ·分子进化分析 | 第45-46页 |
| ·三分三腐胺N-甲基转移酶基因(AaPMT)的基因组分析 | 第46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 3. 三分三莨菪碱6β－羟化酶编码基因（AaH6H）的克隆 | 第47-56页 |
| ·3'RACE | 第47页 |
| ·5'RACE | 第47页 |
| ·AaH6H 基因 cDNA 全长扩增及序列分析和蛋白质二级机构预测 | 第47-51页 |
| ·分子进化分析 | 第51-52页 |
| ·三分三莨菪碱 6β-羟化酶基因(AaH6H )的基因组分析 | 第52-53页 |
| ·三分三莨菪碱 6β-羟化酶基因(AaH6H)的表达部位特异性分析 | 第53-54页 |
| ·甲基茉莉酸对莨菪碱6β－羟化酶基因的诱导 | 第54-56页 |
| ·小结 | 第56页 |
| 4. 植物双元表达载体的构建 | 第56-60页 |
| ·PCR 扩增AaH6H 和AaPMT 基因 | 第56页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1304~+ + AaH6H + AaPMT的构建 | 第56-59页 |
| ·植物单元表达载体pCAMBIA1304+ + AaH6H 和pCAMBIA1304~+ + AaPMT 的构建 | 第59页 |
| ·植物表达载体转化发根农杆菌C58C1 | 第59-60页 |
| 第四章 论文小结与展望 | 第60-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录：硕士期间发表论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
