1 引言 | 第1-18页 |
·研究的目的和意义 | 第10页 |
·哺乳动物细胞核移植研究概况 | 第10-11页 |
·细胞核移植的基本技术环节 | 第11-14页 |
·卵母细胞的去核 | 第11-12页 |
·卵裂球分离 | 第12页 |
·细胞融合 | 第12-13页 |
·卵母细胞激活 | 第13页 |
·胚胎培养 | 第13-14页 |
·胚胎移植 | 第14页 |
·影响细胞核移植成功效率的主要因素 | 第14-18页 |
·细胞周期阶段对细胞核移植克隆胚胎效率的影响 | 第14-17页 |
·去核效果及核质比的影响 | 第17页 |
·核移操作的影响 | 第17页 |
·卵母细胞移核后激活效果的影响 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-24页 |
·试验材料 | 第18-20页 |
·试验主要仪器及设备 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要操作液及配制 | 第19页 |
·试验材料来源 | 第19-20页 |
·试验方法 | 第20-24页 |
·羊卵巢的采集与运输 | 第20页 |
·卵母细胞的采集 | 第20页 |
·卵母细胞的体外成熟 | 第20页 |
·卵母细胞成熟情况评定 | 第20-21页 |
·MⅡ期染色质与第一极体相对位置的检测 | 第21页 |
·供核细胞的准备及单个卵裂球的分离 | 第21页 |
·显微操作 | 第21-22页 |
·EOBC的电融合及卵母细胞的激活 | 第22-23页 |
·重构胚的体外培养 | 第23页 |
·统计分析 | 第23-24页 |
3 实验结果 | 第24-28页 |
·不同卵母细胞采集方法对采卵效果和卵母细胞发育能力的影响 | 第24页 |
·山羊卵母细胞不同体外成熟时间的成熟率及对去核效率的影响 | 第24-25页 |
·体外不同成熟培养时间与卵母细胞成熟效果的关系 | 第24页 |
·体外不同成熟培养时间对MⅡ期染色体与第一极体相对位置及去核率的影响 | 第24-25页 |
·不同去核方法对山羊卵母细胞去核率和重构胚体外发育能力的影响 | 第25页 |
·不同注核方法对山羊卵母细胞注核成功率和重构胚体外发育能力的影响 | 第25-26页 |
·不同电融合和电激活参数对山羊重构胚体外发育能力的影响 | 第26-27页 |
·电场强度对山羊重构胚体外发育能力的影响 | 第26页 |
·脉冲宽度对山羊重构胚体外发育能力的影响 | 第26-27页 |
·电脉冲重复次数对山羊重构胚体外发育能力的影响 | 第27页 |
·不同激活方法对山羊重构胚体外发育能力的影响 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-36页 |
·不同采卵方法对采卵效果的影响 | 第28页 |
·不同体外成熟时间对山羊卵母细胞成熟和去核效果的影响 | 第28-29页 |
·不同去核方法对山羊卵母细胞去核率和重构胚体外发育能力的影响 | 第29-31页 |
·不同注核方法对山羊卵母细胞注核成功率和重构胚体外发育能力的影响 | 第31-32页 |
·不同电融合和电激活参数对山羊重构胚体外发育能力的影响 | 第32-34页 |
·不同激活方法对山羊重构胚体外发育能力的影响 | 第34-36页 |
5 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-41页 |
附录 | 第41-46页 |
作者简历 | 第46-47页 |
致谢 | 第47页 |