| 独创声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第7-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| ·发生史 | 第11-12页 |
| ·病原学 | 第12-16页 |
| ·分类 | 第12页 |
| ·形态 | 第12页 |
| ·IBV的基因组结构 | 第12-13页 |
| ·IBV的主要结构蛋白和功能 | 第13-16页 |
| ·IBV的转录和复制 | 第16-17页 |
| ·IBV的分子变异机制 | 第17-18页 |
| ·IBV的理化特性和血凝性 | 第18-19页 |
| ·IBV的诊断 | 第19-20页 |
| ·IBV血清学诊断方法 | 第20页 |
| ·IBV的分子生物学诊断方法 | 第20页 |
| ·IBV的免疫与防治 | 第20-22页 |
| ·研究的目的意义 | 第22页 |
| ·主要内容 | 第22-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·病毒及分子生物学相关材料 | 第23页 |
| ·化学试剂及配制方法： | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-35页 |
| ·IBV M41总RNA的提取 | 第25页 |
| ·RT-PCR法扩增IBV E蛋白基因 | 第25-26页 |
| ·E片段的克隆 | 第26-27页 |
| ·阳性重组子的筛选与鉴定 | 第27-28页 |
| ·E片段表达载体的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第29页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第29-31页 |
| ·GST标签多克隆抗血清的制备 | 第31页 |
| ·WESTERN BLOTTING检测GST-E融合蛋白的活性 | 第31-32页 |
| ·IBV感染SPF鸡体内抗IBV E蛋白抗体的检测 | 第32页 |
| ·各型IBV E蛋白基因碱基和氨基酸序列分析 | 第32-34页 |
| ·各群冠状病毒代表株E蛋白基因和氨基酸序列分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-45页 |
| ·IBV E蛋白基因RT-PCR结果 | 第35页 |
| ·重组质粒PMD18-T-E的酶切 | 第35页 |
| ·重组质粒PMD18-T-E的PCR鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒PMD18-T-E的测序 | 第36页 |
| ·重组质粒PGEX-6P-1-E的酶切鉴定 | 第36页 |
| ·重组质粒PGEX-6P-1-E的PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒PGEX-6P-1-E的测序 | 第37页 |
| ·PGEX-6P-1-E融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第37页 |
| ·表达融合蛋白PGEX-6P-1-E的Western Blotting的检测 | 第37-38页 |
| ·IBV感染SPF鸡体内抗IBV E蛋白抗体的检测 | 第38页 |
| ·各型IBV E蛋白基因碱基序列分析结果 | 第38-42页 |
| ·各型IBV E蛋白基因氨基酸序列分析结果 | 第42-43页 |
| ·各群冠状病毒E蛋白基因碱基和氨基酸序列分析结果 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·IBV E蛋白的克隆及表达载体构建 | 第45页 |
| ·表达载体的选择 | 第45页 |
| ·GST标签多克隆抗血清的制备和应用 | 第45-46页 |
| ·IBV E蛋白研究意义 | 第46页 |
| ·IBV各种毒株E蛋白序列分析结果 | 第46-47页 |
| ·各群冠状病毒E蛋白基因的序列分析结果 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |
