| 原创性声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第3-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 本文所用主要缩略词 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-36页 |
| 第一章 植物抗病相关基因研究进展 | 第14-29页 |
| 1 植物的抗病机制 | 第14-15页 |
| 2 植物抗病反应的分子假说与作用模式 | 第15-16页 |
| 3 植物抗病基因的克隆策略 | 第16-18页 |
| ·转座子标签法 | 第16-17页 |
| ·图位克隆法 | 第17页 |
| ·基于保守序列的候选基因法 | 第17-18页 |
| 4 植物抗病基因的结构与分类 | 第18-24页 |
| ·NBS-LRR类 | 第19-20页 |
| ·LRR-TM类 | 第20页 |
| ·LRR-TM-STK类 | 第20-21页 |
| ·STK类 | 第21页 |
| ·TM类 | 第21页 |
| ·其他类型 | 第21-24页 |
| 5 防卫反应基因及其应用 | 第24-29页 |
| ·与植保素合成有关的基因 | 第24-25页 |
| ·病程相关蛋白基因 | 第25-29页 |
| ·β-1，3-葡聚糖酶基因及其应用 | 第26-27页 |
| ·几丁质酶基因及其应用 | 第27-29页 |
| 第二章 棉花黄萎病及其抗病育种的研究进展 | 第29-35页 |
| 1 棉花黄萎病的发现 | 第29页 |
| 2 棉花黄萎病菌在我国的危害 | 第29页 |
| 3 黄萎病的致病机理 | 第29-30页 |
| 4 棉花对黄萎病的抗病机制 | 第30-33页 |
| ·棉花与黄萎病菌的识别与互作机制 | 第30-31页 |
| ·棉花对黄萎病的形态抗性 | 第31-32页 |
| ·棉花对黄萎病的生理生化抗性 | 第32-33页 |
| ·抗毒素与抗病性的关系 | 第32页 |
| ·酶与抗病性的关系 | 第32页 |
| ·糖类物质与抗病性的关系 | 第32-33页 |
| ·内源激素与抗病性的关系 | 第33页 |
| 5 棉花抗黄萎病分子育种 | 第33-35页 |
| ·棉花黄萎病的分子标记辅助育种 | 第33-34页 |
| ·棉花抗黄萎病的转基因研究 | 第34-35页 |
| 本研究的目的与意义 | 第35-36页 |
| 第二部分 研究报告 | 第36-85页 |
| 第三章 海岛棉抗病基因类似物与防卫基因类似物的分离及特征分析 | 第36-64页 |
| 1. 材料与方法 | 第37-48页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·DNA的提取 | 第37-39页 |
| ·引物与PCR扩增 | 第39页 |
| ·扩增产物的电泳，回收，克隆及测序 | 第39-41页 |
| ·序列分析与进化树的构建 | 第41-42页 |
| ·Southern杂交分析 | 第42-44页 |
| ·试剂及其配制 | 第42页 |
| ·Southern印迹 | 第42-43页 |
| ·DIG标记探针 | 第43页 |
| ·杂交 | 第43页 |
| ·洗膜与显色 | 第43-44页 |
| ·RNA的提取所用材料与方法 | 第44-46页 |
| ·材料与病菌处理 | 第44页 |
| ·接种方法 | 第44页 |
| ·取材 | 第44页 |
| ·RNA的提取 | 第44-46页 |
| ·RT-PCR | 第46-47页 |
| ·DNA的消化 | 第46页 |
| ·cDNA第一链的合成: | 第46页 |
| ·RT-PCR | 第46-47页 |
| ·RGAP与DGAP的PCR扩增与 PAGE/银染 | 第47-48页 |
| ·定位分析 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-61页 |
| ·棉花RGAs与DGAs的克隆鉴定 | 第48页 |
| ·棉花RGAs与DGAs的序列分析 | 第48-55页 |
| ·棉花NBS类RGAs的序列分析 | 第48-49页 |
| ·棉花STK类RGAs的序列分析 | 第49-54页 |
| ·棉花DGAs的序列分析 | 第54-55页 |
| ·棉花NBS类RGAs的基因组杂交 | 第55-56页 |
| ·棉花RGAs与DGAS的表达分析 | 第56-57页 |
| ·部分RGAs与DNAs的染色体定位 | 第57-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| ·利用简并引物需要注意的问题 | 第61页 |
| ·棉花NBS类RGAs的多样性 | 第61页 |
| ·NBS类基因在棉花基因组中的拷贝数 | 第61-62页 |
| ·PCR法分离STK类RGAs | 第62页 |
| ·PCR法分离DGAs | 第62页 |
| ·RGAs与DGAs的染色体定位 | 第62-63页 |
| ·棉花RGAs和DGAs与黄萎病抗性的关系 | 第63-64页 |
| 第四章 一个棉花β-1，3-葡聚糖酶基因全长cDNA的克隆与特征分析 | 第64-76页 |
| 1 材料与方法 | 第64-67页 |
| ·实验材料 | 第64-65页 |
| ·RNA的提取 | 第65页 |
| ·cDNA片段来源及5’RACE与3’RACE | 第65-66页 |
| ·Southern杂交 | 第66页 |
| ·Northern杂交 | 第66-67页 |
| ·RNA甲醛琼脂糖凝胶变性电泳 | 第66页 |
| ·Northern转膜 | 第66页 |
| ·探针的制备与杂交 | 第66-67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-73页 |
| ·棉花β-1，3-葡聚糖酶基因全长序列的获得 | 第67-68页 |
| ·β-1，3-葡聚糖酶基因的结构分析 | 第68-70页 |
| ·棉花GbGLU与其它作物及棉花中已克隆的β葡聚糖酶的比较分析 | 第70-72页 |
| ·GbGLU的基因组杂交 | 第72-73页 |
| ·GbGLU的表达分析 | 第73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| ·棉花GbGLU的结构特征及其在基因组中的拷贝数 | 第73-74页 |
| ·β-1，3-葡聚糖酶与抗病相关保守功能域的预测 | 第74页 |
| ·棉花GbGLU与黄萎病抗性的关系 | 第74-75页 |
| ·GbGLU对棉花黄萎病抗性育种的意义 | 第75-76页 |
| 第五章 一个棉花受体类似蛋白激酶基因cDNA全长的克隆与特征分析 | 第76-85页 |
| 1 材料与方法 | 第76-77页 |
| ·实验材料 | 第76页 |
| ·RNA的提取 | 第76页 |
| ·5’RACE与3’RACE | 第76页 |
| ·Southern杂交 | 第76-77页 |
| ·Northern杂交 | 第77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-83页 |
| ·棉花受体类似蛋白激酶cDNA全长的克隆 | 第77-79页 |
| ·棉花GbRLK的结构分析 | 第79-80页 |
| ·GbRLK与棉花中已克隆的该类基因及其它作物激酶类基因的比较分析 | 第80-82页 |
| ·GbRLK在棉花基因组中拷贝数分析 | 第82页 |
| ·GbRLK的表达分析 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| ·侯选基因法克隆棉花抗病基因的可行性 | 第83页 |
| ·棉花GbRLK的结构与特征 | 第83页 |
| ·棉花GbRLK的可能作用机理 | 第83-85页 |
| 全文结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 发表论文及申请专利情况 | 第98页 |
