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霍山蹦蝗和意大利蝗全线粒体基因组的测序及分析

第一部分 前言第1-35页
 1 基因组与线粒体基因组学研究概况第12-23页
   ·基因组学研究概况第12-17页
     ·人类基因组计划与模式生物基因组计划第12-14页
     ·结构与功能基因组学第14-15页
     ·比较及进化基因组学第15页
     ·基因组测序方法第15-17页
   ·线粒体基因组学研究概况第17-20页
     ·线粒体基因组学研究内容第17-18页
     ·节肢动物全线粒体基因组测序现状第18-20页
     ·线粒体RNA二级结构变化第20页
   ·基因组与线粒体基因组研究价值第20-23页
     ·基因组学研究意义第20-21页
     ·线粒体基因组学研究意义第21-23页
 2 线粒体基因组研究技术和方法第23-26页
   ·线粒体基因组测序策略比较第23-25页
     ·密度梯度离心分离策略第23-24页
     ·基于长PCR策略及优点第24页
     ·基于长PCR策略的类型第24-25页
   ·线粒体基因组序列分析方法第25页
   ·利用全线粒体基因组联合数据进行系统发育分析第25-26页
 3 直翅目昆虫的分类学地位及其全线粒体基因组研究现状第26-35页
   ·分类学研究概况第26-29页
     ·节肢动物门简介第26页
     ·六足总纲简介第26-27页
     ·昆虫纲简介第27-29页
   ·直翅目、蝗亚目、蝗总科分类学关系第29-31页
     ·斑腿蝗科第30页
     ·直翅目及斑腿蝗科的化石资料第30-31页
   ·霍山蹦蝗与意大利蝗介绍第31-32页
   ·蝗虫与人类的关系第32页
   ·直翅目全线粒体基因组研究现状第32-34页
   ·本论文研究的目的和意义第34-35页
第二部分 材料与方法第35-50页
 1 实验材料第35-44页
   ·标本的采集、保存与鉴定第35页
   ·仪器和试剂第35-38页
     ·主要实验仪器第35-36页
     ·主要实验试剂第36-38页
     ·计算机和生物信息学软件第38页
   ·实验方法第38页
   ·总DNA提取及检测第38-39页
   ·长PCR和二次PCR的引物设计第39-41页
   ·长PCR扩增及纯化第41-43页
   ·二次PCR扩增及纯化第43页
   ·二次PCR扩增产物的直接测序和克隆后测序第43-44页
 2 测序数据处理和初步分析第44页
 3 序列的组装与注释第44-50页
   ·测序结果的片段拼接与组装第44页
   ·mtDNA限制性内切酶酶切图谱分析第44-45页
   ·线粒体基因组序列的基因定位与注释第45页
   ·tRNA和1rRNA的二级结构的预测第45页
   ·利用全线粒体基因组序列进行系统发育分析第45-50页
     ·外群的选择第45-46页
     ·参考序列下载第46页
     ·序列比对和组成分析第46页
     ·氨基酸序列各位点间变异速率的估计第46-47页
     ·MP法重建六足类昆虫的系统发育树第47页
     ·NJ法重建六足类昆虫的系统发育树第47页
     ·ML法重建六足类昆虫的系统发育树第47-50页
第三部分 结果分析与讨论第50-109页
 1 线粒体基因组研究方法第50-55页
   ·基因组总DNA提取第50页
   ·长PCR扩增、纯化第50-51页
   ·二次PCR扩增第51-52页
   ·二次PCR产物直接测序或克隆测序第52页
   ·测序策略的讨论第52-55页
     ·基于长PCR技术的二次PCR测序策略的优点第52-53页
     ·实验中的几个关键问题第53-55页
 2 序列组装第55-57页
   ·霍山蹦蝗(Sinopodisma houshana)序列组装结果第55页
   ·意大利蝗(Calliptamus italicus)序列组装结果第55-56页
   ·霍山蹦蝗和意大利蝗线粒体基因组序列酶切图谱分析第56-57页
 3 全线粒体基因组的结构和组成分析第57-109页
   ·全线粒体基因组的基本情况第57-68页
     ·基因结构和基因顺序第57-59页
     ·基因间重叠现象第59页
     ·基因间隔序列第59-65页
     ·碱基组成情况分析第65-68页
   ·蛋白质基因和密码子组成分析第68-91页
     ·蛋白质的起始与终止密码子使用情况第68-69页
     ·蛋白质基因密码子使用情况第69-84页
     ·蛋白质基因密码子偏向性与线粒体tRNA的对应关系第84-85页
     ·蛋白质基因的碱基组成偏向性第85-87页
     ·氨基酸频率与线粒体tRNA和高频密码子匹配度的关系及机制第87-89页
     ·蛋白质基因的亲水性结构分析第89-91页
   ·tRNA注释结果及结构预测第91-95页
   ·tRNA~(Ser(AGN))异构体的探讨第95-97页
   ·rRNA注释结果及结构预测第97-101页
   ·AT富含区(A+T-Rich Region)及重复序列第101页
   ·部分六足类全线粒体基因组联合数据的系统发育分析第101-109页
     ·蛋白质的氨基酸序列比对结果和数据集组成分析第101页
     ·氨基酸序列取代模型和遗传距离计算第101-102页
     ·MP、NJ、ML法重建的六足总纲系统发育树第102-109页
第四部分 结论第109-111页
参考文献第111-124页
附录:部分测序荧光峰图举例第124-128页
致谢第128-129页
攻读学位期间发表论文第129页

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