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大豆GmMFT基因克隆、表达模式及功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-19页
   ·种子萌发调控机制第13-15页
   ·种子发育和萌发过程实时荧光定量 RT-qPCR 内参基因的选择第15-16页
   ·植物 MFT 基因家族第16-17页
   ·本研究的目的与意义第17-19页
第二章 大豆种子发育和萌发过程 RT-qPCR 内参基因的证实第19-31页
   ·材料与方法第19-25页
     ·植物材料第19页
     ·总 RNA 提取第19-20页
     ·cDNA 第一链的合成第20-22页
     ·候选内参基因和目标基因的选择第22页
     ·基因引物设计和扩增效率测定第22页
     ·RT-qPCR第22-23页
     ·RT-qPCR 数据分析第23-25页
   ·结果与分析第25-30页
     ·内参基因的表达水平第25-26页
     ·内参基因的表达稳定性分析第26-29页
     ·内参基因的可靠性验证第29-30页
   ·讨论第30-31页
第三章 大豆 GmMFT 基因表达模式与功能分析第31-50页
   ·材料与方法第31-39页
     ·植物材料第31页
     ·菌株及载体第31页
     ·常用试剂及培养基的配制第31页
     ·拟南芥原生质体转化所用试剂第31-32页
     ·MFT 蛋白氨基酸序列比对和系统进化树的构建第32页
     ·PCR 和 RT-qPCR 引物设计第32页
     ·总 RNA 提取第32-33页
     ·cDNA 第一链的合成第33-35页
     ·RT-qPCR第35页
     ·GmMFT 和 AtMFT 基因的克隆第35-36页
     ·过表达载体构建第36-37页
     ·拟南芥原生质体制备第37页
     ·拟南芥原生质体转化第37页
     ·农杆菌感受态的制备第37页
     ·农杆菌转化第37-38页
     ·拟南芥转化第38页
     ·DNA 提取第38页
     ·转基因拟南芥筛选第38-39页
     ·转基因拟南芥开花表型分析第39页
     ·转基因拟南芥种子萌发表型分析第39页
   ·结果与分析第39-47页
     ·GmMFT 基因的克隆与生物信息学分析第39-40页
     ·GmMFT 基因的表达模式第40-44页
     ·GmMFT 和 N-端截短的 GmMFT 蛋白的亚细胞定位第44页
     ·GmMFT 基因异源表达拟南芥分析第44-47页
   ·讨论第47-50页
第四章 结论第50-51页
   ·筛选出适合大豆种子发育和萌发过程基因表达研究的内参基因第50页
   ·大豆 GmMFT 基因抑制种子萌发第50-51页
参考文献第51-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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