缩写表 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
Ⅰ 引言 | 第9-12页 |
Ⅱ 材料和方法 | 第12-15页 |
一、植物材料 | 第12页 |
二、处理方法 | 第12页 |
1、Tc诱导处理 | 第12页 |
2、聚乙二醇(PEG 6000)处理 | 第12页 |
3、CaM抑制剂处理 | 第12页 |
三、测定方法 | 第12-15页 |
1、CaM的提取 | 第12-13页 |
2、CaM的测定 | 第13页 |
3、无机磷的测定 | 第13页 |
4、蛋白质的测定 | 第13页 |
5、脯氨酸含量的测定 | 第13页 |
6、GDH活性的测定 | 第13页 |
7、ProDH活性的测定 | 第13-14页 |
8、P5CS活性的测定 | 第14页 |
9、OAT、Arginase活性的测定 | 第14-15页 |
四、试剂与仪器 | 第15页 |
Ⅲ 实验结果 | 第15-64页 |
一、诱导表达细胞核CaM转基因烟草株系的筛选 | 第15-21页 |
1、转基因烟草诱导24小时和48小时的检测结果 | 第15-18页 |
2、两个诱导表达细胞核CaM的转基因烟草幼苗在Tc诱导48小时过程中CaM活性变化 | 第18-20页 |
3、两个诱导表达细胞核CaM的转基因烟草叶圆片在Tc诱导48小时过程中CaM活性动态变化 | 第20-21页 |
二、正常生长条件下操纵细胞CaM水平对烟草幼苗脯氨酸代谢的影响 | 第21-41页 |
1、0-48h内T2.1、T2.25、T1.1的CaM活性动态变化 | 第21-22页 |
2、操纵细胞CaM水平上调对转基因烟草幼苗脯氨酸含量的影响 | 第22-24页 |
3、操纵细胞CaM水平上调对转基因烟草脯氨酸代谢关键酶活性的影响 | 第24-32页 |
4、CPZ处理对转基因烟草幼苗脯氨酸代谢的影响 | 第32-41页 |
(1) CPZ处理浓度的选择 | 第32-34页 |
(2) 25 μmol/L CPZ处理对转基因烟草脯氨酸含量的影响 | 第34-36页 |
(3) 25 μmol/L CPZ处理对转基因烟草脯氨酸代谢关键酶活性的影响 | 第36-41页 |
三、渗透胁迫下操纵细胞CaM水平对烟草叶圆片脯氨酸代谢的影响 | 第41-64页 |
1、PEG6000胁迫强度的确定 | 第41-42页 |
2、PEG6000处理96h内T2.1、T2.25、T1.1叶圆片的CaM活性动态变化 | 第42-43页 |
3、PEG6000处理T2.1、T2.25、T1.1叶圆片脯氨酸含量的影响 | 第43-45页 |
4、PEG6000处理对转基因烟草叶圆片脯氨酸代谢关键酶活性的影响 | 第45-53页 |
5、CPZ处理对渗透胁迫下转基因烟草叶圆片脯氨酸代谢的影响 | 第53-64页 |
(1) 25 μmol/L CPZ处理对渗透胁迫下烟草叶圆片CaM活性的影响 | 第53-54页 |
(2) 25 μmol/L CPZ处理对渗透胁迫下烟草叶圆片脯氨酸含量的影响 | 第54-56页 |
(3) CPZ处理对渗透胁迫下烟草叶圆片脯氨酸代谢关键酶活性的影响 | 第56-64页 |
Ⅳ 讨论 | 第64-67页 |
一、CaM在转基因烟草脯氨酸代谢中的作用 | 第64-65页 |
二、操纵细胞CaM水平对植物中两条脯氨酸合成途径的影响 | 第65-67页 |
结束语 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
致谢 | 第73页 |