中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-34页 |
第一节 体细胞克隆中的核重编程 | 第11-18页 |
1 DNA甲基化 | 第11-13页 |
2 组蛋白乙酰化 | 第13-14页 |
3 X染色体失活 | 第14-15页 |
4 端粒 | 第15-16页 |
5 印记基因的表达 | 第16-17页 |
6 其它与发育相关基因的表达 | 第17页 |
7 结语 | 第17-18页 |
第二节 荧光定量PCR技术的原理与应用 | 第18-25页 |
1 荧光定量PCR的发展 | 第18页 |
2 实时荧光定量PCR原理 | 第18-21页 |
3 荧光定量PCR的特点 | 第21页 |
4 定量方法 | 第21-22页 |
5 荧光定量PCR应用 | 第22-25页 |
第三节 动物的胚胎发育 | 第25-28页 |
1 细胞的分化 | 第25页 |
2 形态发生 | 第25-26页 |
3 胚胎组织的相互影晌 | 第26页 |
4 牛的胚胎发育 | 第26-28页 |
第四节 所研究的发育相关基因的功能 | 第28-34页 |
1 对染色质进行修饰的基因:DNMT、PCAF、MeCP2、EED | 第28-29页 |
2 类胰岛素生长因子系统 | 第29-31页 |
3 成纤维细胞生长因子家族 | 第31-32页 |
4 血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子受体(EGFR)、血小板生长因子受体(PDGFRα)和应激蛋白基因(HSP70.1) | 第32-34页 |
第二章 体细胞核移植生产克隆牛 | 第34-41页 |
前言 | 第34页 |
1 材料与方法 | 第34-36页 |
·培养基及培养皿 | 第34页 |
·主要仪器设备 | 第34页 |
·主要溶液的配制 | 第34-35页 |
·核移植 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-39页 |
·核移植的囊胚率及发育成个体的数量 | 第36页 |
·死亡克隆牛的解剖记录 | 第36-39页 |
3 小结与讨论 | 第39-41页 |
第三章 体细胞克隆牛的组织病理学研究 | 第41-51页 |
前言 | 第41页 |
1 材料与方法 | 第41-42页 |
·染色液配制 | 第41页 |
·染色程序 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-49页 |
3 小结与讨论 | 第49-51页 |
第四章 发育相关基因在体细胞克隆牛组织中的表达 | 第51-86页 |
前言 | 第51页 |
第一节 材料与方法 | 第51-63页 |
1 实验材料 | 第51-53页 |
2 实验方法 | 第53-63页 |
第二节 染色质修饰基因(DNMT1、PCAF、MeCP2、EED)在体细胞克隆牛组织中的表达 | 第63-67页 |
1 结果与分析 | 第63-66页 |
2 讨论 | 第66-67页 |
第三节 类胰岛素生长因子、受体以及结合蛋白在体细胞克隆牛组织中的表达 | 第67-73页 |
1 结果与分析 | 第67-71页 |
2 讨论 | 第71-73页 |
第四节 成纤维生长因子(FGF2和FGF10)以及成纤维生长因子受体(FGFR1和FGFR2)在体细胞克隆牛组织中的表达 | 第73-77页 |
1 结果与分析 | 第73-76页 |
2 分析和讨论 | 第76-77页 |
第五节 EGFR、PDGFRa、VEGF、BMP4、Hsp70.1和Xist在体细胞克隆牛组织中的表达 | 第77-82页 |
1 结果与分析 | 第77-80页 |
2 分析和讨论 | 第80-82页 |
第六节 所有候选基因在来自两种供体细胞的体细胞克隆牛之间的表达差异 | 第82-83页 |
1 结果与分析 | 第82页 |
·来自两种不同供体细胞的克隆牛之间的基因差异表达差异 | 第82页 |
2 讨论 | 第82-83页 |
第七节 总结与讨论 | 第83-86页 |
1 总结 | 第83-84页 |
2 讨论 | 第84-86页 |
·关于相对定量 | 第84-85页 |
·关于荧光定量方法的选择 | 第85页 |
·关于UNG酶及实验室的PCR产物污染问题 | 第85-86页 |
第五章 结论 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
附录 PCR产物的测序结果 | 第100-102页 |
个人简历 | 第102页 |