目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
部分英文缩写说明 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-29页 |
1.黄伞概述 | 第9页 |
1.1 野生菌株的生态习性 | 第9页 |
1.2 形态特征 | 第9页 |
2.食用菌的交配型简介 | 第9-11页 |
2.1 食用菌的生活史 | 第9-10页 |
2.2 同宗结合(homothallism) | 第10页 |
2.3 异宗结合(heterothallism) | 第10-11页 |
2.4 有性生殖的类型对育种工作的影响 | 第11页 |
3.交配型的研究概况 | 第11-15页 |
3.1 交配型的确定 | 第11-12页 |
3.2 不同交配反应所表现的形态特征的研究 | 第12-13页 |
3.3 交配因子对交配反应调控的研究 | 第13-14页 |
3.4 对交配型因子分布的研究 | 第14-15页 |
4.mRNA差异显示技术 | 第15-25页 |
4.1 mRNA差异显示技术概况 | 第15页 |
4.2 mRNA差异显示技术的原理 | 第15-16页 |
4.3 mRNA差异显示技术研究进展 | 第16-20页 |
4.4 mRNA差异显示技术在食用菌领域的应用 | 第20-21页 |
4.5 其它基因表达差异研究技术 | 第21-25页 |
5.定量PCR技术 | 第25-27页 |
5.1 定量PCR技术的研究现状 | 第25-27页 |
5.2 定量PCR技术在分子生物学上的应用 | 第27页 |
6.黄伞研究概况 | 第27-29页 |
第二章 黄伞的交配型性状研究 | 第29-39页 |
1.供试材料 | 第29页 |
1.1 供试菌种 | 第29页 |
1.2 供试培养基 | 第29页 |
1.3 试验仪器 | 第29页 |
2.研究内容和技术路线 | 第29-31页 |
2.1 主要研究内容 | 第29页 |
2.2 技术路线 | 第29-31页 |
3.实验方法 | 第31-32页 |
3.1 黄伞子实体的获得 | 第31页 |
3.2 孢子的收集 | 第31页 |
3.3 单核体分离 | 第31页 |
3.4 单孢萌发菌株的鉴定 | 第31页 |
3.5 单核体杂交及双核体检出 | 第31页 |
3.6 三轮杂交系统试验 | 第31-32页 |
3.7 对交配型测定结果的验证 | 第32页 |
4.结果与分析 | 第32-37页 |
4.1 黄伞子实体的获得及孢子的收集和再生 | 第32页 |
4.2 单核体的检出 | 第32-34页 |
4.3 黄伞交配型的测定 | 第34-36页 |
4.4 单核体四种类型交配型的验证 | 第36-37页 |
5.讨论 | 第37-39页 |
第三章 黄伞结实相关基因的研究 | 第39-75页 |
1.材料及试剂 | 第39-41页 |
1.1 供试材料 | 第39页 |
1.2 供试培养基 | 第39页 |
1.3 试验试剂及制备方法 | 第39-41页 |
2.研究内容和技术路线 | 第41-43页 |
3.实验方法 | 第43-50页 |
3.1 黄伞菌丝体的培养 | 第43页 |
3.2 黄伞原基、菇蕾、子实体菌柄、子实体菌盖的获得 | 第43页 |
3.3 提取RNA | 第43-44页 |
3.4 酶解总RNA中的DNA | 第44页 |
3.5 mRNA的反转录 | 第44页 |
3.6 PCR差异显示 | 第44-45页 |
3.7 差异DNA片段的重扩增 | 第45页 |
3.8 差异DNA片段的纯化和回收 | 第45-46页 |
3.9 差异DNA片段的克隆 | 第46-48页 |
3.10 差异DNA片段的测序 | 第48页 |
3.11 半定量PCR方法验证差异片段 | 第48-50页 |
4.结果分析与讨论 | 第50-75页 |
4.1 总RNA的提取 | 第50页 |
4.2 RNA的电泳 | 第50页 |
4.3 选择T_(11)N(N为A、G或C)作为锚定引物 | 第50-51页 |
4.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第51页 |
4.5 电泳差异展示的结果及其分析 | 第51-54页 |
4.6 差异片段的回收克隆 | 第54页 |
4.7 差异片段的序列分析 | 第54-62页 |
4.8 半定量PCR内标的获得 | 第62-73页 |
4.9 半定量PCR验证 | 第73-75页 |
全文结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第81页 |