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表达传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒的构建及其免疫保护效力的研究

1 引言第1-20页
   ·鸡传染性支气管炎概况第7-9页
   ·传染性支气管炎病毒疫苗研究进展第9-13页
   ·禽痘病毒载体研究进展第13-19页
   ·小结及本试验要达到的目的第19-20页
2 实验一 表达传染性支气管炎病毒S1基因重组禽痘病毒的构建第20-30页
   ·实验材料第20页
   ·实验方法第20-25页
     ·载体构建第20页
     ·鸡胚成纤维细胞的制备第20页
     ·S-FPV-017疫苗种毒的制备第20-21页
     ·转染和病毒筛选第21-22页
     ·重组病毒(RFPV-IBVS1)的PCR检测第22页
     ·IBVS1蛋白的间接免疫荧光检测第22-23页
     ·IBV S1的Western blot 检测第23-25页
   ·结果第25-27页
     ·表达鸡IBVS1基因的禽痘病毒转移载体的构建第25页
     ·鸡IBVS1重组鸡痘病毒的筛选与纯化第25-26页
     ·重组禽痘病毒的PCR鉴定第26页
     ·表达鸡IBVS1蛋白的间接免疫荧光检测第26-27页
     ·IBV S1蛋白在重组禽痘病毒中的表达产物检测第27页
   ·讨论第27-30页
3 实验二  重组鸡痘病毒对SPF鸡的免疫保护性研究第30-45页
   ·材料第30页
     ·病毒第30-130页
     ·重组鸡痘病毒(rFPV-IBVS第130-30页
     ·免疫试验用SPF鸡第30页
     ·SPF鸡胚第30页
   ·方法第30-34页
     ·重组鸡痘病毒和鸡痘病毒弱毒疫苗(S-FPV-017)的制备及滴定第30-31页
     ·免疫试验的设计第31页
     ·攻毒试验第31-32页
     ·鸡痘病毒的分离及PCR检测第32页
     ·鸡传染性支气管炎病毒的分离及PCR检测第32-33页
     ·抗体检测第33-34页
     ·SPF鸡外周血液中T淋巴细胞动态分布检测第34页
   ·结果第34-42页
     ·重组鸡痘病毒在鸡体内的复制和稳定性第34-35页
     ·重组鸡痘病毒的免疫原性第35-36页
     ·重组鸡痘病毒对IBV强毒攻击的免疫保护性第36-40页
     ·SPF鸡外周血液中CD4+、CD8+、TCR+T淋巴细胞的动态分布情况第40-42页
   ·讨论第42-45页
结论第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-52页
附录第52-55页
作者简介第55页

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