中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
文献综述 | 第11-18页 |
1.1 产生几丁质酶的微生物种类 | 第11页 |
1.2 微生物几丁质酶的酶学性质 | 第11-12页 |
1.3 微生物几丁质酶基因的克隆现状 | 第12-13页 |
1.4 微生物几丁质酶的转基因研究 | 第13页 |
1.5 微生物几丁质酶在分子生物学其他方面的研究进展 | 第13-14页 |
1.6 几丁质酶在其他方面的应用研究 | 第14页 |
1.7 微生物几丁质酶抗血清的研究 | 第14-15页 |
1.8 球孢白僵菌几丁质酶的研究进展 | 第15-18页 |
1.8.1 球孢白僵菌及其杀虫作用 | 第15-16页 |
1.8.2 球孢白僵菌的杀虫作用与几丁质酶的关系 | 第16页 |
1.8.3 球孢白僵菌几丁质酶的研究现状及展望 | 第16-18页 |
引言 | 第18-20页 |
2.1 研究意义与背景 | 第18-19页 |
2.2 论文思路设计 | 第19-20页 |
2.2.1 球孢白僵菌几丁质酶的纯化 | 第19页 |
2.2.2 球孢白僵菌几丁质酶抗血清的制备 | 第19-20页 |
材料与方法 | 第20-24页 |
3.1 材料 | 第20页 |
3.1.1 实验材料 | 第20页 |
3.2 方法 | 第20-24页 |
3.2.1 几丁酶的检测 | 第20页 |
3.2.1.1 几丁酶的检测方法 | 第20页 |
3.2.1.2 NAG标准曲线的制作 | 第20页 |
3.2.2 蛋白质浓度测定 | 第20页 |
3.2.3 胶体几丁质的制备 | 第20页 |
3.2.4 球孢白僵菌几丁酶的诱导 | 第20-21页 |
3.2.5 球孢白僵菌实验菌株的比较 | 第21页 |
3.2.6 球孢白僵菌产几丁酶的时间曲线 | 第21页 |
3.2.7 球孢白僵菌几丁酶的纯化 | 第21页 |
3.2.7.1 粗酶液的制备 | 第21页 |
3.2.7.2 Ultragel AcA_(54)凝胶过滤层析 | 第21页 |
3.2.7.3 DEAE-Cellulose阴离子交换层析 | 第21页 |
3.2.8 纯化几丁质酶的电泳鉴定及分子量确定 | 第21-22页 |
3.2.9 聚丙烯酰胺凝胶薄层等电聚焦电泳(IEF-PAGE) | 第22页 |
3.2.10 几丁酶N-端氨基酸序列的测定及分析 | 第22页 |
3.2.10.1 几丁酶的电印渍及检测 | 第22页 |
3.2.10.2 几丁质酶N端序列测定及分析 | 第22页 |
3.2.11 几丁酶抗血清的制备 | 第22-24页 |
3.2.11.1 免疫程序及方法 | 第22-23页 |
3.2.11.2 耳静脉取血及效价鉴定 | 第23页 |
3.2.11.3 动脉取血及血清的分离 | 第23页 |
3.2.11.4 几丁酶抗血清的纯化及其保存 | 第23-24页 |
结果与分析 | 第24-31页 |
4.1 NAG标准曲线的制定 | 第24-29页 |
4.1.1 球孢白僵菌产几丁质酶菌株的比较 | 第24-25页 |
4.1.2 球孢白僵菌几丁质酶的诱导 | 第25页 |
4.1.3 球孢白僵菌内切几丁质酶Bbchitl的纯化 | 第25-28页 |
4.1.4 内切几丁质酶Bbchitl的性质测定 | 第28-29页 |
4.1.4.1 内切几丁质酶Bbchitl的分子量测定 | 第28页 |
4.1.4.2 内切几丁质酶Bbchitl的等电点测定 | 第28-29页 |
4.1.5 内切几丁质酶Bbchitl的氮端氨基酸序列测定 | 第29页 |
4.1.6 Bbchitl与其他几丁质酶的相似性分析 | 第29页 |
4.2 几丁质酶Bbchitl抗血清的制备及效价测定 | 第29-31页 |
讨论 | 第31-33页 |
5.1 纯化过程中检测反应体系的建立 | 第31页 |
5.2 纯化方案的优化及纯化技术在纯化过程中的掌握 | 第31-32页 |
5.3 纯化几丁质酶 | 第32-33页 |
结论 | 第33-34页 |
1. Bbl-l几丁质酶的纯化及N-端氨基酸序列的测定 | 第33页 |
2. Bbchitl几丁质酶抗血清的制备 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-39页 |
致谢 | 第39页 |