| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 中英文缩略词 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-35页 |
| 1 蛋白激酶概述 | 第13-20页 |
| 1．1 蛋白激酶在信号传导中的作用和意义 | 第13-14页 |
| 1．2 蛋白激酶的分类研究 | 第14-15页 |
| 1．3 蛋白激酶的共同特征 | 第15-19页 |
| 1．4 蛋白激酶的调控机制 | 第19-20页 |
| 2 真菌蛋白激酶的研究现状 | 第20-33页 |
| 2．1 蛋白激酶在真菌信号传导中的作用 | 第20-21页 |
| 2．2 丝状真菌蛋白激酶的种类及研究现状 | 第21-33页 |
| 2．2．1 cAMP依赖性蛋白激酶PKA | 第22-25页 |
| 2．2．2 蛋白激酶C | 第25-27页 |
| 2．2．3 促分裂蛋白激酶MAPK | 第27-31页 |
| 2．2．4 其他的Ser/Thr蛋白激酶 | 第31-33页 |
| 3 真菌功能基因的研究方法 | 第33-34页 |
| 4 本实验的研究目的意义 | 第34-35页 |
| 第二章 嗜热真菌Thermomyces lanuginosus的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因cDNA的克隆 | 第35-60页 |
| 第一节 概述 | 第35页 |
| 第二节 嗜热真菌蛋白激酶基因的cDNA的克隆 | 第35-55页 |
| 1 材料与方法 | 第35-53页 |
| 1．1 材料与试剂 | 第35-38页 |
| 1．1．1 真菌材料 | 第35页 |
| 1．1．2 真菌培养与处理 | 第35-36页 |
| 1．1．3 化学试剂及仪器 | 第36页 |
| 1．1．4 菌株及质粒 | 第36页 |
| 1．1．5 培养基及抗生素 | 第36-37页 |
| 1．1．6 抽提缓冲液 | 第37-38页 |
| 1．2 方法 | 第38-40页 |
| 1．2．1 引物设计 | 第38页 |
| 1．2．2 RNA处理方法 | 第38-40页 |
| 1．3 RT-PCR | 第40-42页 |
| 1．3．1 反转录反应 | 第40-41页 |
| 1．3．2 PCR扩增反转录产物 | 第41-42页 |
| 1．4 PCR产物回收 | 第42-43页 |
| 1．5 连接 | 第43页 |
| 1．6 转化 | 第43-44页 |
| 1．6．1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第43-44页 |
| 1．6．2 转化 | 第44页 |
| 1．7 重组克隆的鉴定 | 第44-45页 |
| 1．7．1 重组克隆的筛选和鉴定 | 第44-45页 |
| 1．7．2 质粒抽提 | 第45页 |
| 1．7．3 菌落PCR或质粒PCR | 第45页 |
| 1．8 cDNA片断的序列分析 | 第45-46页 |
| 1．8．1 cDNA核苷酸序列分析 | 第45页 |
| 1．8．2 推断氨基酸的同源性分析 | 第45-46页 |
| 1．8．3 对推断的氨基酸序列结构功能域的分析 | 第46页 |
| 1．9 嗜热真菌蛋白激酶的拷贝数鉴定 | 第46-48页 |
| 1．10 cDNA全长的克隆 | 第48-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-55页 |
| 2．1 引物设计 | 第53-54页 |
| 2．2 真菌菌丝体的总RNA的提取 | 第54页 |
| 2．3 RT-PCR | 第54页 |
| 2．4 阳性克隆的鉴定 | 第54页 |
| 2．5 得到的cDNA片断的同源性分析结果 | 第54-55页 |
| 2．6 推断的氨基酸序列同源性结果分析 | 第55页 |
| 2．7 推断的氨基酸序列结构功能域分析 | 第55页 |
| 2．8 Southern blot分析 | 第55页 |
| 第二节 利用生物信息学对嗜热真菌蛋白激酶蛋白质结构、功能预测 | 第55-57页 |
| 1 材料与方法 | 第56页 |
| 1．1 材料 | 第56页 |
| 1．2 蛋白质跨膜区域分析 | 第56页 |
| 1．3 蛋白质二级结构预测 | 第56页 |
| 1．4 蛋白质三维结构预测 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-57页 |
| 第三节 结论与讨论 | 第57-60页 |
| 图版 | 第60-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |