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葡萄白藜芦醇合酶的生化信息研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一部分 文献综述第10-23页
 1 白藜芦醇的研究进展第10-13页
   ·植物中白藜芦醇的存在第10-11页
   ·Res的药理活性第11-13页
     ·抗癌活性第11页
     ·对心血管系统的影响第11-12页
     ·抗菌作用第12页
     ·抗氧化、抗自由基作用第12-13页
     ·其它作用第13页
 2 白藜芦醇合酶(简称RS)的研究进展第13-19页
   ·RS的酶学性质第13-14页
   ·Res生物合成途径第14-15页
   ·RS的诱导第15-16页
     ·诱导途径第15-16页
     ·诱导机制第16页
   ·RS的分子生物学研究第16-18页
     ·已克隆的RS cDNA分子第16页
     ·RS基因的研究第16-18页
   ·RS与CHS的比较研究第18-19页
 3 蛋白质的分离纯化策略第19-21页
   ·蛋白质分离纯化的一般程序第19-20页
   ·酶的分离纯化中应注意的问题第20-21页
 4 生物信息学分析第21-22页
 5 本实验的研究内容及意义第22-23页
第二部分 材料与方法第23-31页
 1 主要试剂与仪器第23-24页
   ·试剂第23页
   ·缓冲液类型第23页
   ·主要仪器第23-24页
 2 实验材料第24页
   ·植物材料第24页
   ·材料的处理第24页
 3 实验方法第24-31页
   ·RS的分离纯化第24-26页
     ·RS的提取第24页
     ·RS的分离纯化第24-26页
   ·RS的性质研究第26-28页
     ·凝胶过滤法测RS的相对分子质量(Mr)第26页
     ·PH值对酶活性的影响第26页
     ·RS的动力学研究第26-28页
   ·实验中的检测方法第28-29页
     ·可溶性总蛋白含量的测定第28页
     ·酶活力的测定第28页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)定性分析蛋白质第28-29页
     ·蛋白质的双向电泳第29页
   ·RS的生物信息分析第29-31页
     ·RS氨基酸序列的同源性比较第29页
     ·蛋白质结构分析第29-30页
     ·RS在细胞中的定位第30-31页
第三部分 结果与分析第31-47页
 1 RS的分离纯化第31-34页
   ·RS提取方案的确定第31-32页
   ·DEAE-cellulose离子交换柱层析第32-33页
   ·羟基磷灰石柱层析第33-34页
 2 RS的生化性质研究第34-37页
   ·凝胶过滤法测RS的相对分子量第34页
   ·PH值对酶活性的影响第34-35页
   ·RS的动力学研究第35-37页
     ·香豆酰辅酶A的K_m值测定及其V-[S]曲线的绘制第35-36页
     ·丙二酰辅酶A的K_m值测定及其V-[S]曲线的绘制第36-37页
 3 RS纯化效果定性、定量分析第37-39页
   ·总蛋白质的含量及其标准曲线第37页
   ·Res的HPLC法测定第37-38页
   ·SDS-PAGE实验结果第38-39页
   ·蛋白质的二维电泳第39页
 4 纯化过程评价第39-41页
 5 RS的生物信息分析第41-44页
   ·RS氨基酸序列的同源性比较第41-43页
   ·蛋白质结构分析第43-44页
     ·RS的结构域分析第43页
     ·RS的三维结构的预测第43-44页
   ·RS在细胞中定位的预测第44页
 6 讨论第44-47页
小结第47-48页
参考文献第48-56页
致谢第56页

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