摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-23页 |
1 白藜芦醇的研究进展 | 第10-13页 |
·植物中白藜芦醇的存在 | 第10-11页 |
·Res的药理活性 | 第11-13页 |
·抗癌活性 | 第11页 |
·对心血管系统的影响 | 第11-12页 |
·抗菌作用 | 第12页 |
·抗氧化、抗自由基作用 | 第12-13页 |
·其它作用 | 第13页 |
2 白藜芦醇合酶(简称RS)的研究进展 | 第13-19页 |
·RS的酶学性质 | 第13-14页 |
·Res生物合成途径 | 第14-15页 |
·RS的诱导 | 第15-16页 |
·诱导途径 | 第15-16页 |
·诱导机制 | 第16页 |
·RS的分子生物学研究 | 第16-18页 |
·已克隆的RS cDNA分子 | 第16页 |
·RS基因的研究 | 第16-18页 |
·RS与CHS的比较研究 | 第18-19页 |
3 蛋白质的分离纯化策略 | 第19-21页 |
·蛋白质分离纯化的一般程序 | 第19-20页 |
·酶的分离纯化中应注意的问题 | 第20-21页 |
4 生物信息学分析 | 第21-22页 |
5 本实验的研究内容及意义 | 第22-23页 |
第二部分 材料与方法 | 第23-31页 |
1 主要试剂与仪器 | 第23-24页 |
·试剂 | 第23页 |
·缓冲液类型 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
2 实验材料 | 第24页 |
·植物材料 | 第24页 |
·材料的处理 | 第24页 |
3 实验方法 | 第24-31页 |
·RS的分离纯化 | 第24-26页 |
·RS的提取 | 第24页 |
·RS的分离纯化 | 第24-26页 |
·RS的性质研究 | 第26-28页 |
·凝胶过滤法测RS的相对分子质量(Mr) | 第26页 |
·PH值对酶活性的影响 | 第26页 |
·RS的动力学研究 | 第26-28页 |
·实验中的检测方法 | 第28-29页 |
·可溶性总蛋白含量的测定 | 第28页 |
·酶活力的测定 | 第28页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)定性分析蛋白质 | 第28-29页 |
·蛋白质的双向电泳 | 第29页 |
·RS的生物信息分析 | 第29-31页 |
·RS氨基酸序列的同源性比较 | 第29页 |
·蛋白质结构分析 | 第29-30页 |
·RS在细胞中的定位 | 第30-31页 |
第三部分 结果与分析 | 第31-47页 |
1 RS的分离纯化 | 第31-34页 |
·RS提取方案的确定 | 第31-32页 |
·DEAE-cellulose离子交换柱层析 | 第32-33页 |
·羟基磷灰石柱层析 | 第33-34页 |
2 RS的生化性质研究 | 第34-37页 |
·凝胶过滤法测RS的相对分子量 | 第34页 |
·PH值对酶活性的影响 | 第34-35页 |
·RS的动力学研究 | 第35-37页 |
·香豆酰辅酶A的K_m值测定及其V-[S]曲线的绘制 | 第35-36页 |
·丙二酰辅酶A的K_m值测定及其V-[S]曲线的绘制 | 第36-37页 |
3 RS纯化效果定性、定量分析 | 第37-39页 |
·总蛋白质的含量及其标准曲线 | 第37页 |
·Res的HPLC法测定 | 第37-38页 |
·SDS-PAGE实验结果 | 第38-39页 |
·蛋白质的二维电泳 | 第39页 |
4 纯化过程评价 | 第39-41页 |
5 RS的生物信息分析 | 第41-44页 |
·RS氨基酸序列的同源性比较 | 第41-43页 |
·蛋白质结构分析 | 第43-44页 |
·RS的结构域分析 | 第43页 |
·RS的三维结构的预测 | 第43-44页 |
·RS在细胞中定位的预测 | 第44页 |
6 讨论 | 第44-47页 |
小结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
致谢 | 第56页 |