SBE2B基因的克隆、表达载体的构建及水稻遗传转化体系的建立
| 本文缩略词 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第8-26页 |
| 1． 种子胚乳淀粉生物合成的研究进展 | 第8-12页 |
| 1．1 淀粉的合成过程 | 第8页 |
| 1．2 胚乳淀粉合成有关的酶 | 第8-10页 |
| 1．3 玉米淀粉突变基因 | 第10-11页 |
| 1．4 生物技术调控淀粉代谢 | 第11-12页 |
| 2． 基因克隆的方法和策略 | 第12-15页 |
| 2．1 对已知序列进行分子克隆 | 第12-13页 |
| 2．2 从蛋白质到基因序列 | 第13页 |
| 2．3 根据植株或细胞的表型变异进行基因分离 | 第13-14页 |
| 2．4 与已知基因紧密连锁基因的分离 | 第14-15页 |
| 3 表达载体的构建 | 第15-16页 |
| 3．1 构建表达载体的策略 | 第15页 |
| 3．2 构建表达载体的方法 | 第15-16页 |
| 4． 水稻遗传转化研究进展 | 第16-22页 |
| 4．1 遗传转化方法的研究进展 | 第16-18页 |
| 4．2 水稻基因转化的受体系统 | 第18-19页 |
| 4．3 标记与筛选 | 第19页 |
| 4．4 去除选择标记的方法 | 第19-22页 |
| 5． 基因工程技术在水稻品种改良中的运用 | 第22-25页 |
| 5．1 抗除草剂育种 | 第23页 |
| 5．2 抗病育种 | 第23页 |
| 5．3 抗虫育种 | 第23-24页 |
| 5．4 抗逆育种 | 第24页 |
| 5．5 功能性育种 | 第24-25页 |
| 6． 本文的立题思想 | 第25-26页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第26-43页 |
| 1． 实验材料 | 第26-27页 |
| 1．1 植物材料 | 第26页 |
| 1．2 质粒载体 | 第26-27页 |
| 1．3 细菌材料 | 第27页 |
| 1．4 PCR引物 | 第27页 |
| 2． 主要仪器设备 | 第27页 |
| 3． 工具酶、试剂盒及分子量标准Marker | 第27-28页 |
| 4． 有关溶液的配制 | 第28页 |
| 4．1 RNA的提取溶液（TE3D法） | 第28页 |
| 4．2 电泳中用到的溶液 | 第28页 |
| 5． 有关培养基的配制 | 第28-30页 |
| 5．1 细菌培养中用到的培养基 | 第28-29页 |
| 5．2 培养水稻愈伤各培养基的配制 | 第29-30页 |
| 6． 实验方法 | 第30-43页 |
| 6．1 sbe2b基因的克隆 | 第31-35页 |
| 6．2 sbe2b表达载体的构建 | 第35-39页 |
| 6．3 水稻遗传转化体系的建立 | 第39-43页 |
| Ⅲ． 结果与分析 | 第43-54页 |
| 1． sbe2b基因的克隆 | 第43-47页 |
| 1．1 玉米胚乳RNA的提取 | 第43页 |
| 1．2 RT-PCR扩增目的片段 | 第43页 |
| 1．3 连接产物阳性克隆的PCR分析 | 第43-44页 |
| 1．4 序列测定与同源性分析 | 第44-47页 |
| 2． Sbe2b表达载体的构建 | 第47-50页 |
| 2．1 Sbe2b的克隆与改造 | 第47-48页 |
| 2．2 pBPC47载体的改造 | 第48-49页 |
| 2．3 sbe2b与pBPC47的连接签定 | 第49-50页 |
| 2．4 连接方向性的确立 | 第50页 |
| 3． 水稻遗传转化体系的建立 | 第50-54页 |
| 3．1 愈伤组织的诱导 | 第50-51页 |
| 3．2 合适筛选浓度的确立 | 第51页 |
| 3．3 转化情况 | 第51-54页 |
| Ⅳ 讨论 | 第54-56页 |
| 1． 玉米胚乳淀粉分支酶基因的克隆 | 第54页 |
| 2． 表达载体的构建 | 第54页 |
| 3． 水稻遗传转化体系的建立 | 第54-56页 |
| 3．1 培养基对愈伤组织的影响 | 第55页 |
| 3．2 提高分化率的措施 | 第55页 |
| 3．3 改良稻米品质的措施 | 第55-56页 |
| Ⅴ 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
