| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1. 黄曲霉毒素 | 第10-13页 |
| ·黄曲霉的结构和理化性质 | 第10-11页 |
| ·黄曲霉毒素的毒性 | 第11页 |
| ·黄曲霉毒素的污染 | 第11-12页 |
| ·黄曲霉毒素的代谢和致癌机理 | 第12-13页 |
| 2. 异柠檬酸脱氢酶 | 第13-16页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶的种类 | 第14页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶的结构和功能 | 第14-15页 |
| ·异柠檬酸脱氢酶与癌症的关系 | 第15-16页 |
| 3. 活性氧簇 | 第16-19页 |
| ·活性氧簇的产生 | 第16-17页 |
| ·ROS 和癌症的关系 | 第17-19页 |
| 第二章 IDH3α多抗的制备 | 第19-36页 |
| 1. 实验材料及方法 | 第19-28页 |
| ·菌株、质粒、动物和细胞 | 第19页 |
| ·主要试剂和药品 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·细胞总 RNA 的提取 | 第20页 |
| ·单链 cDNA 的合成 | 第20-21页 |
| ·idh3α基因的扩增 | 第21-22页 |
| ·原核表达载体 pET28a（+）-idh3α的构建 | 第22-25页 |
| ·IDH3α融合蛋白的表达及纯化 | 第25-28页 |
| 2. 结果与分析 | 第28-34页 |
| ·细胞总 RNA 的提取 | 第28页 |
| ·idh3α的扩增 | 第28-29页 |
| ·重组载体的验证 | 第29-30页 |
| ·重组载体的测序验证 | 第30页 |
| ·融合蛋白的表达纯化 | 第30-31页 |
| ·血清效价的检测 | 第31-32页 |
| ·不同物种间 IDH3α蛋白序列的比较 | 第32-34页 |
| 3. 讨论 | 第34-35页 |
| ·RNA 的提取 | 第34页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第34页 |
| ·蛋白的纯化 | 第34页 |
| ·小鼠的免疫 | 第34-35页 |
| 4. 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 黄曲霉毒素的提取及对大鼠的处理 | 第36-51页 |
| 1. 实验材料及方法 | 第36-40页 |
| ·菌株和动物 | 第36页 |
| ·主要试剂和药品 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·黄曲霉菌株的培养和提取 | 第36-37页 |
| ·黄曲霉毒素 B1浓度的测定 | 第37页 |
| ·黄曲霉毒素 B1对大鼠的处理 | 第37页 |
| ·组织切片的制备 | 第37-39页 |
| ·血液指标的检测 | 第39页 |
| ·大鼠 IDH3α的免疫组化 | 第39-40页 |
| 2. 结果与分析 | 第40-49页 |
| ·黄曲霉菌株的培养 | 第40页 |
| ·黄曲霉毒素 B1浓度的测定 | 第40-41页 |
| ·大鼠体重变化 | 第41-42页 |
| ·大鼠肝脏的形态变化 | 第42-43页 |
| ·大鼠血液指标的检测 | 第43-45页 |
| ·大鼠肝脏切片 | 第45-46页 |
| ·大鼠 IDH3α的免疫组化 | 第46-49页 |
| 3. 讨论 | 第49-50页 |
| ·黄曲霉毒素 B1的提取 | 第49页 |
| ·黄曲霉毒素 B1处理大鼠 | 第49-50页 |
| ·大鼠血液指标 | 第50页 |
| 4. 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 黄曲霉毒素对细胞的处理 | 第51-69页 |
| 1. 实验材料及方法 | 第51-59页 |
| ·菌株、细胞和质粒 | 第51页 |
| ·主要试剂和药品 | 第51-52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·IDH3α过表达载体的构建 | 第52-54页 |
| ·IDH3α干扰载体的构建 | 第54-56页 |
| ·转染细胞及其检测 | 第56页 |
| ·黄曲霉毒素 B1对细胞的处理 | 第56-57页 |
| ·Western Blot 检测 | 第57-59页 |
| 2. 结果与分析 | 第59-67页 |
| ·用于构建 pCDNA3.1（-）的 idh3α基因的扩增 | 第59页 |
| ·pCDNA3.1（-）-idh3ɑ重组载体的验证 | 第59-61页 |
| ·干扰载体的测序验证 | 第61-62页 |
| ·转染效率的测定 | 第62-63页 |
| ·过表达和干扰载体的 Western 验证 | 第63-64页 |
| ·黄曲霉毒素对细胞的半致死量 | 第64-65页 |
| ·黄曲霉毒素 B1对 IDH3α蛋白的影响 | 第65-67页 |
| 3. 讨论 | 第67-68页 |
| ·过表达载体的构建 | 第67页 |
| ·干扰载体的构建 | 第67-68页 |
| ·细胞的转染 | 第68页 |
| 4. 小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
