| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-17页 |
| ·植物基因工程概况 | 第9页 |
| ·转基因作物发展概况 | 第9-10页 |
| ·转基因植物分类 | 第10页 |
| ·棉花基因工程的研究进展及意义 | 第10-12页 |
| ·根癌农杆菌介导法 | 第10-11页 |
| ·基因枪法 | 第11页 |
| ·花粉管通道法 | 第11-12页 |
| ·抗虫转基因研究进展 | 第12-13页 |
| ·Bt 毒蛋白基因 | 第12-13页 |
| ·其它抗虫基因 | 第13页 |
| ·抗除草剂研究进展 | 第13-16页 |
| ·草甘膦及其特性 | 第14-15页 |
| ·草甘膦的作用机理 | 第15页 |
| ·抗草甘膦研究进展 | 第15-16页 |
| ·本研究目的意义 | 第16-17页 |
| 第二章 植物表达载体PGBIF4ABCRUBPEPSPS 构建 | 第17-25页 |
| ·植物表达载体图谱及构建技术路线 | 第17-18页 |
| ·材料与方法 | 第18-21页 |
| ·试验材料 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-21页 |
| ·结果与分析 | 第21-24页 |
| ·pGBIRUBPEPSPS 酶切鉴定 | 第21页 |
| ·pGF4ABC 质粒鉴定回收及载体pGBIRUBPEPSPS 回收 | 第21页 |
| ·大肠杆菌阳性克隆的筛选 | 第21-23页 |
| ·pGBIF4ABCRUBPEPSPS 植物表达载体导入农杆菌的PCR 鉴定 | 第23-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 第三章 抗虫、抗除草剂烟草、棉花的获得及检测 | 第25-37页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·人工合成的寡核苷酸片段 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-31页 |
| ·烟草组织培养用相关培养基 | 第25-26页 |
| ·侵染烟草的农杆菌的准备 | 第26页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化方案 | 第26页 |
| ·含有pGBIF4ABCRUBPEPSPS 质粒 DNA 的大量制备 | 第26-27页 |
| ·花粉管通道法转化棉花 | 第27页 |
| ·转基因植株的Kna 筛选 | 第27页 |
| ·烟草、棉花总DNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·PCR 鉴定转基因植株 | 第28页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第28-31页 |
| ·转基因烟草的生物测试 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·烟草外植体的转化及再生植株的获得 | 第31-32页 |
| ·再生植株的PCR 检测 | 第32页 |
| ·转基因烟草southern 检测 | 第32-33页 |
| ·转融合杀虫基因烟草对棉铃虫的杀虫活性检测 | 第33页 |
| ·转基因烟草的抗草甘膦组织培养检测 | 第33-34页 |
| ·转基因烟草叶片草甘膦抗性检测 | 第34页 |
| ·花粉管通道法转化棉花 | 第34-35页 |
| ·棉花Kna 抗性植株的PCR 检测 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第四章 棉花Y18 农杆菌介导法转化体系的优化 | 第37-45页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·培养基及配制 | 第37页 |
| ·激素的配制方法 | 第37页 |
| ·棉花组织培养用系列培养基 | 第37页 |
| ·农杆菌介导的棉花下胚轴的遗传转化 | 第37-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-42页 |
| ·最佳消毒方法的确定 | 第39页 |
| ·最佳消毒时间的确定 | 第39页 |
| ·无菌苗培养天数的确定 | 第39-40页 |
| ·Knan 筛选浓度的确定 | 第40页 |
| ·农杆菌浓度和感染时间对外植体愈伤诱导的影响 | 第40-41页 |
| ·不同激素组合对愈伤组织诱导的影响 | 第41页 |
| ·不同激素组合对胚性愈伤诱导的影响 | 第41-42页 |
| ·不同激素组成对胚状体诱导及再生的影响 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-45页 |
| 第五章 抑菌蛋白在棉花、烟草组织培养中的应用 | 第45-49页 |
| ·材料与方法 | 第45-46页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·植物组织培养杀菌剂及试剂 | 第45页 |
| ·培养基成分 | 第45页 |
| ·不同的方法制备无菌苗 | 第45页 |
| ·抗菌肽对棉花根系的影响及最佳的抑菌浓度 | 第45页 |
| ·抗菌肽对棉花愈伤的影响 | 第45页 |
| ·不同的抑菌剂对烟草污染的防治效果比较及对愈伤的影响 | 第45-46页 |
| ·抗菌肽对烟草再生芽生根的影响 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·不同的方法制备无菌苗 | 第46页 |
| ·不同浓度的抗菌肽对棉花根系的影响及最佳抑菌浓度 | 第46-47页 |
| ·抗菌肽对棉花愈伤的影响 | 第47页 |
| ·不同的抑菌剂对烟草污染的防治些效果比较及对愈伤的影响 | 第47-48页 |
| ·抗菌肽对再生烟草生根的影响 | 第48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第六章 讨论和结论 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·植物表达载体构建的研究 | 第49页 |
| ·抗虫、抗除草剂基因转化烟草、棉花的研究 | 第49页 |
| ·棉花Y18 农杆菌介导的转化体系优化 | 第49-50页 |
| ·抑菌肽在棉花烟草组织培养中的应用 | 第50-51页 |
| ·结论 | 第51页 |
| ·创新点 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
| 作者简历 | 第56页 |
