| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-36页 |
| ·转基因植物生产药用蛋白研究进展 | 第9-18页 |
| ·重组蛋白表达系统概述 | 第9-10页 |
| ·植物生物反应器表达的重组蛋白 | 第10-11页 |
| ·植物生物反应器与其他蛋白表达系统的比较 | 第11-12页 |
| ·利用转基因植物生产外源重组蛋白的策略 | 第12-13页 |
| ·影响植物中蛋白表达的因素 | 第13-15页 |
| ·宿主植物的选择 | 第15-16页 |
| ·植物生物反应器发展和应用前景 | 第16-18页 |
| ·油体蛋白表达系统研究进展 | 第18-28页 |
| ·油体(oil body) | 第18-19页 |
| ·油体蛋白(oleosin) | 第19-22页 |
| ·油体蛋白作为外源蛋白表达载体的应用 | 第22-26页 |
| ·油体蛋白表达系统研究进展 | 第26-28页 |
| ·基因工程表达降钙素研究进展 | 第28-34页 |
| ·降钙素概述 | 第28页 |
| ·降钙素结构与活性的关系 | 第28-30页 |
| ·降钙素的C-端酰胺化与活性 | 第30-31页 |
| ·基因工程生产降钙素研究进展 | 第31-34页 |
| ·人胰岛素样生长因子Ⅰ | 第34-36页 |
| 第二章 材料与方法 | 第36-51页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·菌株和质粒 | 第36页 |
| ·酶与试剂盒 | 第36-37页 |
| ·细菌和植物培养基 | 第37页 |
| ·抗生素配制 | 第37-38页 |
| ·引物合成与测序 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-51页 |
| ·油体蛋白及其启动子的获得 | 第38-40页 |
| ·载体构建方法 | 第40-42页 |
| ·农杆菌培养与转化 | 第42-43页 |
| ·拟南芥的培养与转化 | 第43-44页 |
| ·转基因拟南芥的分子检测 | 第44-46页 |
| ·转基因拟南芥植株蛋白提取 | 第46页 |
| ·蛋白电泳及检测方法 | 第46-51页 |
| 第三章 鲑鱼降钙素及酰胺化酶在拟南芥中的表达 | 第51-72页 |
| ·前言 | 第51-52页 |
| ·实验设计与方法 | 第52-59页 |
| ·突变型鲜鱼降钙素msCTgly油体表达载体构建 | 第52-55页 |
| ·天然鲑鱼降钙素在拟南芥中表达载体的构建 | 第55-56页 |
| ·大鼠酰胺化酶在拟南芥中中的表达 | 第56-58页 |
| ·酰胺化酶与降钙素共表达植株的获得 | 第58-59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-71页 |
| ·突变型鲑鱼降钙素msCTgly在拟南芥种子中的表达 | 第59-64页 |
| ·天然鲑鱼降钙素在拟南芥中的表达 | 第64-68页 |
| ·酰胺化酶在拟南芥中的表达 | 第68-70页 |
| ·降钙素基因与酰胺化酶基因在拟南芥中的共表达 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第四章 利用油体蛋白表达系统和大肠杆菌表达人胰岛素样生长因子Ⅰ | 第72-87页 |
| ·前言 | 第72-73页 |
| ·实验设计与方法 | 第73-78页 |
| ·hIGF-I基因的合成 | 第73-75页 |
| ·hIGF-I原核表达和植物表达载体的构建 | 第75页 |
| ·hIGF-I在大肠杆菌中的表达 | 第75-78页 |
| ·hIGF-I在拟南芥种子中的表达 | 第78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-86页 |
| ·基于PCR方法的hIGF-I基因的合成 | 第78-79页 |
| ·hIGF-I原核表达载体和植物表达载体的构建 | 第79-80页 |
| ·pET30-hIGF在大肠杆菌中的表达 | 第80-81页 |
| ·大肠杆菌表达的hIGF-I融合蛋白的纯化 | 第81-82页 |
| ·融合蛋白的酶切 | 第82-83页 |
| ·hIGF-I与油体蛋白的融合蛋白在拟南芥种子中的表达 | 第83-84页 |
| ·拟南芥种子中hIGF-I的表达量分析 | 第84-85页 |
| ·植物表达的融合蛋白的酶切 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第五章 总结与展望 | 第87-91页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·影响植物中外源蛋白表达量的因素 | 第87页 |
| ·油休蛋白表达系统生产药用蛋白的可行性 | 第87-88页 |
| ·融合蛋白中日标蛋白的释放 | 第88页 |
| ·植物表达外源蛋白的翻译后加工机制 | 第88-89页 |
| ·本工作的创新点 | 第89-90页 |
| ·后续研究展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-103页 |
| 博士期间参与的其他工作 | 第103-104页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
