| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-19页 |
| 1.1 弓形虫入侵宿主细胞 | 第13-14页 |
| 1.2 纳虫空泡的形成 | 第14-15页 |
| 1.3 钙离子结合蛋白对弓形虫入侵的作用 | 第15-18页 |
| 1.3.1 钙调蛋白家族(Calmodulin Family,CaMs) | 第15-16页 |
| 1.3.2 钙依赖蛋白激酶(Calcium Dependent Protein Kinase,CDPKs) | 第16-18页 |
| 1.3.3 类钙调神经素B亚基蛋白(CBL) | 第18页 |
| 1.3.4 总结 | 第18页 |
| 1.4 本课题研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 弓形虫pCaBP的生物信息学分析 | 第19-23页 |
| 2.1 生物信息学软件 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 查询目的基因 | 第19页 |
| 2.2.2 基因完整性预测 | 第19页 |
| 2.2.3 基因序列的下载 | 第19-20页 |
| 2.2.4 蛋白质保守性预测 | 第20页 |
| 2.2.5 蛋白质功能域的绘画 | 第20页 |
| 2.3 结果与分析 | 第20-22页 |
| 2.3.1 弓形虫pCaBP的生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.3.2 不同寄生虫种间pCaBP氨基酸序列分析 | 第21页 |
| 2.3.3 弓形虫pCaBP功能域 | 第21-22页 |
| 2.4 讨论 | 第22页 |
| 2.5 小结 | 第22-23页 |
| 第三章 弓形虫pCaBP基因的原核表达、重组蛋白质的纯化及多克隆抗体制备 | 第23-50页 |
| 3.1 材料 | 第23-29页 |
| 3.1.1 细胞及虫株 | 第23页 |
| 3.1.2 质粒及菌种 | 第23页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第23页 |
| 3.1.4 试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.5 主要试剂盒 | 第24-25页 |
| 3.1.6 主要仪器 | 第25-26页 |
| 3.1.7 溶液配制 | 第26-29页 |
| 3.2 方法 | 第29-43页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第29页 |
| 3.2.2 弓形虫体外培养及收集虫体 | 第29-30页 |
| 3.2.3 虫体RNA提取 | 第30-31页 |
| 3.2.4 甲醛变性电泳 | 第31页 |
| 3.2.5 RNA反转录成cDNA | 第31-32页 |
| 3.2.6 克隆载体的构建 | 第32-34页 |
| 3.2.7 原核表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 3.2.8 pET-28a-pCaBP及 pGEX-4T-1-pCaBP重组质粒的表达及纯化 | 第36-41页 |
| 3.2.9 制备抗pCaBP特异性血清及多克隆抗体纯化 | 第41-43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-49页 |
| 3.5 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 弓形虫pCaBP在虫体内表达、分布及体外蛋白质互作分析 | 第50-63页 |
| 4.1 材料 | 第50-52页 |
| 4.1.1 细胞及虫株 | 第50页 |
| 4.1.2 实验动物 | 第50页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第50-51页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第51页 |
| 4.1.5 荧光定量引物 | 第51-52页 |
| 4.1.6 溶液配制 | 第52页 |
| 4.2 方法 | 第52-56页 |
| 4.2.1 弓形虫pCaBP在 RH株与ME49 株的转录水平差异分析 | 第52-54页 |
| 4.2.2 弓形虫pCaBP在 RH株与ME49 株表达水平差异分析 | 第54页 |
| 4.2.3 弓形虫pCaBP在虫体内的分布 | 第54-55页 |
| 4.2.4 弓形虫pCaBP与虫体Myosin H蛋白质互作的体外分析 | 第55-56页 |
| 4.3 结果与分析 | 第56-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-62页 |
| 4.5 小结 | 第62-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第73-74页 |
