| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 缩略语 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 1. 本课题的研究目的和意义 | 第11-12页 |
| 2. 本课题的主要研究内容 | 第12-13页 |
| ·磁性微粒分离纯化LCA以结合糖蛋白方法的建立 | 第12页 |
| ·肝脏疾病相关蛋白的研究分析 | 第12页 |
| ·磁性微粒分离纯化唾液酸化糖蛋白方法的建立 | 第12-13页 |
| 3. 本课题的主要技术路线 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献回顾 | 第14-34页 |
| 1. 磁性微粒研究现状 | 第14-19页 |
| ·磁性复合微粒的概念及组成 | 第14-15页 |
| ·磁性复合微粒的应用 | 第15-19页 |
| 2. 糖蛋白分离纯化技术 | 第19-20页 |
| 3. 凝集素固定化技术及其分离纯化糖蛋白的研究现状 | 第20-23页 |
| ·凝集素概述 | 第20-23页 |
| 4. 凝集素用于糖蛋白分离纯化的固定化策略 | 第23-31页 |
| ·非共价结合技术 | 第25-26页 |
| ·共价结合技术 | 第26-28页 |
| ·凝集素亲和层析的应用 | 第28-31页 |
| 5. 凝集素磁性微粒分离纯化糖蛋白技术及其研究现状 | 第31-34页 |
| ·凝集素磁性微粒分离纯化糖蛋白技术原理 | 第31-32页 |
| ·凝集素磁性微粒分离纯化糖蛋白技术优势 | 第32-33页 |
| ·凝集素磁粒分离纯化糖蛋白技术发展前景 | 第33-34页 |
| 第二部分 研究内容 | 第34-69页 |
| 第一章 环氧磁粒分离LCA结合糖蛋白方法的建立 | 第34-48页 |
| 1. 引言 | 第34-36页 |
| ·凝集素的选择 | 第34-35页 |
| ·蛋白质的固定化方法 | 第35-36页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第36-41页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| 3. 结果与讨论 | 第41-47页 |
| ·pH条件对偶联效率的影响 | 第41页 |
| ·偶联缓冲液的选择 | 第41页 |
| ·温度条件对偶联效率的影响 | 第41-42页 |
| ·偶联时间对偶联效率的影响 | 第42页 |
| ·磁性微粒量对偶联效率的影响 | 第42-43页 |
| ·LCA活性保护剂对偶联效率的影响 | 第43页 |
| ·LCA活性位点保护剂(α-甲基甘露糖苷)对偶联效率的影响 | 第43-44页 |
| ·封闭剂浓度的选择 | 第44页 |
| ·BSA作为平衡缓冲液减少磁粒凝聚 | 第44-45页 |
| ·洗提缓冲液的选择 | 第45页 |
| ·洗提缓冲液浓度的选择 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE及荧光染色 | 第46-47页 |
| 4. 本章小结 | 第47-48页 |
| 第二章 LCA磁粒分离提取糖蛋白技术在肝脏疾病蛋白质组学中的应用 | 第48-61页 |
| 1. 引言 | 第48-50页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第50-54页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·实验方法 | 第52-54页 |
| 3. 结果与讨论 | 第54-59页 |
| ·肝脏细胞和肝癌细胞总蛋白浓度测定 | 第54页 |
| ·LCA结合糖蛋白浓度测定 | 第54-55页 |
| ·SDS-PAGE电泳及银染 | 第55-56页 |
| ·双向电泳及银染结果 | 第56-59页 |
| 4. 本章小结 | 第59-61页 |
| 第三章 环氧磁粒分离纯化唾液酸化糖蛋白方法的建立 | 第61-69页 |
| 1. 引言 | 第61-63页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第63-66页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-66页 |
| 3. 实验结果与讨论 | 第66-68页 |
| ·最适偶联缓冲液的选择 | 第66-67页 |
| ·偶联时间的比较 | 第67-68页 |
| ·SDS-PAGE及银染 | 第68页 |
| 4. 本章小结 | 第68-69页 |
| 全文小结 | 第69-71页 |
| 1. 论文工作的主要内容和研究成果 | 第69-70页 |
| ·磁性微粒分离纯化LCA糖蛋白方法的建立 | 第69页 |
| ·LCA结合糖蛋白的蛋白质组学初步研究 | 第69-70页 |
| ·磁性微粒分离纯化唾液酸化糖蛋白方法的建立 | 第70页 |
| 2. 进一步工作需要解决的问题 | 第70-71页 |
| ·LCA结合糖蛋白蛋白质组学研究 | 第70页 |
| ·磁粒分离纯化唾液酸化糖蛋白条件的优化及其糖蛋白组学研究 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 攻读硕士期间的研究成果及发表的论文 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |