摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
·蛋白质复性的意义 | 第11页 |
·蛋白质的变性和包涵体的溶解 | 第11-12页 |
·蛋白质复性技术 | 第12-18页 |
·稀释和透析复性 | 第12页 |
·蛋白质折叠液相色谱 | 第12-16页 |
·人工分子伴侣 | 第16-18页 |
·重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)研究概述 | 第18-19页 |
·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
参考文献 | 第20-24页 |
第二章 人工分子伴侣-离子交换色谱法复性还原变性溶菌酶 | 第24-43页 |
·概述 | 第24-25页 |
·实验部分 | 第25-28页 |
·仪器 | 第25-26页 |
·试剂 | 第26页 |
·还原变性溶菌酶的制备 | 第26页 |
·人工分子伴侣-离子交换色谱法复性还原变性溶菌酶 | 第26-27页 |
·离子交换色谱法复性还原变性溶菌酶 | 第27页 |
·人工分子伴侣法复性还原变性溶菌酶 | 第27页 |
·稀释法复性还原变性溶菌酶 | 第27页 |
·溶菌酶活性的测定 | 第27-28页 |
·结果与讨论 | 第28-40页 |
·AMC-IEC复性还原变性溶菌酶动力学 | 第29页 |
·流动相中脲浓度对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第29-31页 |
·流动相中β-环糊精浓度对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第31-33页 |
·Sarkosyl/溶菌酶摩尔比对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第33-34页 |
·流动相流速对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第34-35页 |
·流动相的pH对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第35-37页 |
·去垢剂种类对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第37-38页 |
·稀释法,AMC,IEC和AMC-IEC对还原变性溶菌酶复性的比较 | 第38-39页 |
·AMC-IEC对不同初始蛋白浓度还原变性溶菌酶的复性 | 第39-40页 |
·结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-43页 |
第三章 一步人工分子伴侣-离子交换色谱法辅助还原变性溶菌酶的复性 | 第43-55页 |
·概述 | 第43-44页 |
·实验部分 | 第44-45页 |
·仪器 | 第44页 |
·试剂 | 第44-45页 |
·还原变性溶菌酶的制备 | 第45页 |
·色谱复性 | 第45页 |
·溶菌酶活性的测定 | 第45页 |
·结果与讨论 | 第45-53页 |
·溶菌酶的Sarkosyl变性动力学 | 第45-46页 |
·流动相中脲浓度对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第46-48页 |
·流动相中β-环糊精浓度对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第48-50页 |
·流动相的流速对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第50-51页 |
·流动相pH对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第51-52页 |
·初始蛋白浓度对还原变性溶菌酶复性的影响 | 第52-53页 |
·结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-55页 |
第四章 人工分子伴侣-离子交换色谱法复性重组人粒细胞集落刺激因子 | 第55-64页 |
·概述 | 第55-56页 |
·实验部分 | 第56-59页 |
·仪器 | 第56页 |
·试剂 | 第56页 |
·菌体的破碎 | 第56-57页 |
·rhG-CSF包涵体的洗涤 | 第57页 |
·rhG-CSF包涵体的溶解 | 第57页 |
·离子交换色谱复性rhG-CSF | 第57-58页 |
·一步人工分子伴侣-离子交换色谱复性rhG-CSF | 第58页 |
·人工分子伴侣-离子交换色谱复性rhG-CSF | 第58页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第58-59页 |
·Bradford法测定蛋白含量 | 第59页 |
·结果讨论 | 第59-62页 |
·rhG-CSF包涵体的溶解方法 | 第59-60页 |
·不同复性方法对rhG-CSF的复性 | 第60-62页 |
·结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-64页 |
在读学位期间发表论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |