中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英文缩略词对照表 | 第10-11页 |
1 绪论 | 第11-19页 |
1.1 问题的提出和研究意义 | 第11-12页 |
1.1.1 问题的提出 | 第11-12页 |
1.1.2 研究意义 | 第12页 |
1.2 国内外研究进展简介 | 第12-16页 |
1.2.1 EMT研究概况 | 第12-14页 |
1.2.2 EMT与肝癌 | 第14页 |
1.2.3 RBM3研究进展 | 第14-16页 |
1.3 研究目的和研究内容 | 第16-17页 |
1.3.1 研究目的 | 第16页 |
1.3.2 研究内容 | 第16-17页 |
1.4 技术路线 | 第17页 |
1.5 本研究的创新点 | 第17-19页 |
2 RBM3在肝癌中的表达及临床意义 | 第19-27页 |
2.1 前言 | 第19页 |
2.2 实验仪器、材料和试剂 | 第19-20页 |
2.2.1 实验仪器 | 第19页 |
2.2.2 实验材料和试剂 | 第19-20页 |
2.3 实验方法 | 第20-21页 |
2.3.1 免疫组织化学 | 第20-21页 |
2.3.2 免疫组化结果判定标准 | 第21页 |
2.3.3 数据统计分析 | 第21页 |
2.4 实验结果 | 第21-25页 |
2.4.1 RBM3在肝癌中的表达情况 | 第21-22页 |
2.4.2 RBM3和肝癌患者临床病理参数的统计分析 | 第22-24页 |
2.4.3 RBM3表达与肝癌患者生存预后的关系 | 第24-25页 |
2.5 讨论 | 第25-26页 |
2.6 本章小结 | 第26-27页 |
3 RBM3对肝癌细胞EMT过程的影响 | 第27-53页 |
3.1 前言 | 第27-28页 |
3.2 实验仪器、材料和试剂 | 第28-31页 |
3.2.1 实验仪器 | 第28-29页 |
3.2.2 实验材料和试剂 | 第29-31页 |
3.3 实验方法 | 第31-42页 |
3.3.1 构建RBM3过表达重组载体 | 第31-35页 |
3.3.2 构建过表达RBM3的HepG2稳定细胞株 | 第35-36页 |
3.3.3 Western blot | 第36-40页 |
3.3.4 siRNA转染 | 第40页 |
3.3.5 细胞迁移能力检测 | 第40-41页 |
3.3.6 细胞侵袭能力检测 | 第41-42页 |
3.3.7 数据统计分析 | 第42页 |
3.4 实验结果 | 第42-49页 |
3.4.1 肝癌细胞中RBM3的表达 | 第42-43页 |
3.4.2 构建RBM3过表达重组质粒 | 第43-45页 |
3.4.3 构建稳定过表达RBM3的HepG2细胞株 | 第45-46页 |
3.4.4 过表达RBM3对肝癌细胞EMT过程的影响 | 第46-47页 |
3.4.5 过表达RBM3对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响 | 第47页 |
3.4.6 siRNA敲低效率检测 | 第47-48页 |
3.4.7 敲低RBM3对肝癌细胞EMT过程的影响 | 第48-49页 |
3.4.8 敲低RBM3对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响 | 第49页 |
3.5 讨论 | 第49-50页 |
3.6 本章小结 | 第50-53页 |
4 microRNA-383调控肝癌细胞RBM3表达 | 第53-67页 |
4.1 前言 | 第53页 |
4.2 实验仪器、材料和试剂 | 第53-56页 |
4.2.1 实验仪器 | 第53-54页 |
4.2.2 实验材料和试剂 | 第54-56页 |
4.3 实验方法 | 第56-60页 |
4.3.1 构建pmirGLO-RBM3-3’UTR、PLKO.1-microRNA-383 重组载体 | 第56-58页 |
4.3.2 构建pmirGLO-mut-RBM33’UTR重组载体 | 第58-59页 |
4.3.3 质粒瞬时转染 | 第59页 |
4.3.4 Western blot | 第59-60页 |
4.3.5 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第60页 |
4.3.6 数据统计分析 | 第60页 |
4.4 实验结果 | 第60-65页 |
4.4.1 构建PLKO.1-microRNA-383重组质粒 | 第60-61页 |
4.4.2 microRNA-383对肝癌细胞RBM3表达的影响 | 第61-62页 |
4.4.3 pmirGLO-RBM3和pmirGLO-mut-RBM3重组质粒构建 | 第62-64页 |
4.4.4 双荧光素酶报告基因检测系统探究microRNA-383与RBM33’UTR的靶向关系 | 第64-65页 |
4.5 讨论 | 第65-66页 |
4.6 本章小结 | 第66-67页 |
5 结论与展望 | 第67-69页 |
5.1 主要结论 | 第67-68页 |
5.2 工作展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
附录 | 第79-81页 |
A.作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第79页 |
B.作者在攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第79页 |
C.学位论文数据集 | 第79-81页 |
致谢 | 第81-83页 |