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嗜热厌氧杆菌工程菌(Δldh)的构建及其廉价生物质乙醇发酵的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-36页
   ·引言第14-15页
   ·乙醇发酵第15-26页
     ·乙醇概述第15-16页
     ·生物燃料乙醇生产的原料第16-18页
     ·乙醇发酵微生物第18-21页
     ·乙醇糖化发酵工艺第21-23页
     ·代谢途径第23-24页
     ·产物抑制第24-26页
   ·基因敲除技术在代谢工程中的应用第26-30页
     ·基因敲除第26-27页
     ·敲除策略的选择第27-28页
     ·DNA 转化技术和重组细胞的筛选第28-30页
   ·细胞固定化和纤维床反应器第30-32页
     ·固定化细胞的制备方法第30-31页
     ·固定化细胞生物反应器的主要类型第31页
     ·纤维床反应器第31-32页
   ·本课题的目的意义和主要研究内容第32-36页
     ·研究意义第32-33页
     ·课题来源第33页
     ·本课题的研究内容和研究思路第33-36页
第二章 嗜热厌氧杆菌工程菌Δldh的构建、筛选和鉴定第36-61页
   ·引言第36-37页
   ·材料与方法第37-46页
     ·实验载体和菌株第37页
     ·仪器与试剂第37-39页
     ·培养基第39-40页
     ·实验方法第40-44页
     ·分析测定方法第44-46页
   ·结果与讨论第46-59页
     ·染色体基因组的提取第46页
     ·Ldh-up 片段的PCR 扩增及克隆第46-48页
     ·Ldh-down 片段的PCR 扩增及克隆第48-49页
     ·P_(aph) 片段的PCR 扩增和克隆第49-50页
     ·电转化实验和PCR 初筛第50-51页
     ·Southern blot 实验第51-54页
     ·Δldh 突变株摇瓶发酵产物分析第54-57页
     ·工程菌Δldh 的稳定性考察第57-59页
   ·本章小结第59-61页
第三章 嗜热厌氧杆菌工程菌Δldh发酵特性的研究第61-84页
   ·引言第61页
   ·材料与方法第61-64页
     ·实验菌株第61页
     ·仪器与试剂第61页
     ·培养基第61页
     ·实验方法第61-63页
     ·分析测定方法第63-64页
   ·结果与讨论第64-81页
     ·Δldh 突变株生长曲线、温度和pH 的考察第64-65页
     ·底物广泛性研究第65-66页
     ·不同底物浓度的研究第66-67页
     ·不同酵母抽提物浓度的研究第67-68页
     ·添加一水半胱氨酸盐酸盐对发酵的研究第68-69页
     ·添加二盐酸吡哆胺对发酵的研究第69-70页
     ·不同初始细胞浓度(接种量)的研究第70页
     ·不同初始压力的研究第70-71页
     ·添加乙酸钾对发酵的研究第71-76页
     ·5L 罐不同底物补料分批发酵的研究第76-81页
   ·本章小结第81-84页
第四章 嗜热厌氧杆菌工程菌Δldh发酵甘蔗渣酶解液产乙醇的研究第84-96页
   ·引言第84-85页
   ·材料与方法第85-87页
     ·实验菌株和培养基第85页
     ·甘蔗渣第85页
     ·纤维素酶第85页
     ·仪器设备和试剂第85页
     ·实验方法第85-87页
     ·分析测定方法第87页
   ·结果与讨论第87-93页
     ·甘蔗渣超微粉碎时间的考察第87-88页
     ·甘蔗渣预处理的考察第88-89页
     ·分步糖化发酵甘蔗渣产乙醇第89-91页
     ·同步糖化发酵甘蔗渣产乙醇第91-93页
   ·本章小结第93-96页
第五章 嗜热厌氧杆菌工程菌Δldh发酵木薯淀粉和木薯渣水解液产乙醇的研究第96-111页
   ·引言第96-97页
   ·材料与方法第97-101页
     ·实验菌株和培养基第97页
     ·种子液的制备第97页
     ·木薯淀粉和木薯渣第97页
     ·仪器设备和试剂第97页
     ·实验方法第97-101页
     ·分析测定方法第101页
   ·结果与分析第101-109页
     ·木薯渣稀酸水解工艺第101-102页
     ·以葡萄糖和木糖为底物的发酵动力学研究第102-105页
     ·以木薯淀粉水解液为底物的发酵动力学研究第105-106页
     ·以木薯渣水解液为底物的发酵动力学研究第106-107页
     ·反复批次发酵木薯渣水解液生产乙醇的研究第107-109页
   ·本章小结第109-111页
第六章 嗜热厌氧杆菌工程菌Δldh乙醇耐受性驯化第111-119页
   ·引言第111页
   ·材料与方法第111-113页
     ·实验菌株和培养基第111页
     ·种子液的制备第111页
     ·仪器设备和试剂第111页
     ·实验方法第111-113页
     ·分析测定方法第113页
   ·结果与分析第113-117页
     ·乙醇耐受性考察第113-114页
     ·乙醇耐受性驯化第114页
     ·嗜热厌氧代谢工程菌乙醇耐受性变化第114-116页
     ·驯化菌FBB 反应器中发酵产乙醇的研究第116-117页
   ·本章小结第117-119页
结论与展望第119-122页
 结论第119-120页
 论文创新性第120-121页
 展望第121-122页
参考文献第122-141页
附录第141-144页
攻读博士期间取得的研究成果第144-146页
致谢第146-148页
附件第148页

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