| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-30页 |
| 1 DNA损伤修复背景介绍 | 第13-15页 |
| ·造成DNA损伤的因素 | 第13-14页 |
| ·DNA损伤修复机制类型简介 | 第14-15页 |
| 2 核酸切除修复(NER)途径 | 第15-17页 |
| ·NER修复途径的组成部分 | 第15-16页 |
| ·NER修复途径的修复过程 | 第16-17页 |
| ·NER修复途径的保守性 | 第17页 |
| 3 泛素/蛋白酶体(UPP)途径 | 第17-21页 |
| ·底物蛋白泛素化 | 第18页 |
| ·泛素化蛋白降解 | 第18-21页 |
| 4 Rad23基因的研究进展 | 第21-28页 |
| ·Rad23蛋白的结构与功能域 | 第21-23页 |
| ·Rad23在UPP途径中的功能 | 第23-25页 |
| ·Rad23在NER途径中的功能 | 第25-28页 |
| 研究目的和方案 | 第28-30页 |
| 第二章 家蚕Rad23基因的克隆及生物信息学分析 | 第30-41页 |
| ·材料与试剂 | 第30-32页 |
| ·供试动物材料、工具酶和化学试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·常用试剂配制 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-36页 |
| ·家蚕总RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·核酸质量及浓度测定 | 第33页 |
| ·克隆家蚕Rad23基因 | 第33-36页 |
| ·家蚕Rad23基因的生物信息学分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-38页 |
| ·Rad23基因克隆结果 | 第36页 |
| ·家蚕Rad23基因序列分析 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| 第三章 BmRad23基因的原核表达及抗体制备 | 第41-52页 |
| ·材料和试剂 | 第41-44页 |
| ·质粒和菌株 | 第41页 |
| ·试剂及酶 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41-42页 |
| ·试剂的配制 | 第42-44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·BmRad23基因表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·BmRad23在大肠杆菌中的表达 | 第46页 |
| ·BmRad23融合表达产物的纯化 | 第46-47页 |
| ·多克隆抗体的制备及纯化 | 第47页 |
| ·多克隆抗体特异性鉴定 | 第47-48页 |
| ·实验结果 | 第48-51页 |
| ·表达载体构建及验证结果 | 第48-49页 |
| ·BmRad23表达与纯化 | 第49-50页 |
| ·抗体特异性鉴定结果 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 BmRad23基因组织、时期差异性表达 | 第52-63页 |
| ·材料与试剂 | 第52-55页 |
| ·供试动物材料、工具酶和化学试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52-53页 |
| ·常用试剂配制 | 第53-55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·Northern blot分析家蚕不同组织以及丝腺不同时期的BmRad23表达 | 第55-58页 |
| ·Western blot鉴定家蚕内源BmRad23蛋白及表达的时期差异性 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-61页 |
| ·Northern blot分析BmRad23在家蚕中的组织与时期特异性表达 | 第59页 |
| ·Western blot分析BmRad23在家蚕中的组织与时期特异性表达 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 外界刺激诱导BmRad23基因差异性表达 | 第63-74页 |
| ·材料与试剂 | 第63-67页 |
| ·细胞、工具酶和化学试剂 | 第63页 |
| ·主要仪器设备 | 第63-64页 |
| ·试剂配制 | 第64-67页 |
| ·实验方法 | 第67-69页 |
| ·紫外辐射处理细胞 | 第67页 |
| ·NA-AAF处理细胞 | 第67-68页 |
| ·热激处理细胞 | 第68-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-72页 |
| ·紫外辐射对BmRad23基因表达的影响 | 第69-70页 |
| ·NA-AAF、热激对BmRad23基因表达的影响 | 第70页 |
| ·热激因素对BmRad23基因表达的影响 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| 第六章 家蚕Rad4基因的克隆及生物信息学分析 | 第74-85页 |
| ·材料与试剂 | 第74-76页 |
| ·供试动物材料、工具酶和化学试剂 | 第74页 |
| ·主要仪器设备 | 第74-75页 |
| ·常用试剂配制 | 第75-76页 |
| ·实验方法 | 第76-80页 |
| ·数据库检索与分析 | 第76-77页 |
| ·实验克隆家蚕Rad4基因 | 第77-80页 |
| ·家蚕Rad4基因的生物信息学分析 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-82页 |
| ·Rad4基因克隆结果 | 第80-82页 |
| ·Rad4基因生物信息学分析 | 第82页 |
| ·讨论 | 第82-85页 |
| 第七章 总结与展望 | 第85-87页 |
| ·主要总结 | 第85-86页 |
| ·展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 附录 | 第94页 |
