| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-23页 |
| ·黏膜免疫的研究 | 第13-16页 |
| ·黏膜相关淋巴组织 | 第13-15页 |
| ·黏膜免疫细胞 | 第15-16页 |
| ·共同黏膜免疫系统 | 第16页 |
| ·口蹄疫病毒的相关研究 | 第16-20页 |
| ·病毒形态特征 | 第16页 |
| ·口蹄疫病毒的血清型 | 第16-17页 |
| ·基因组结构和功能 | 第17页 |
| ·主要抗原位点 | 第17-18页 |
| ·口蹄疫的预防与控制 | 第18页 |
| ·口蹄疫对经济、社会及公共卫生的影响 | 第18页 |
| ·口蹄疫新型疫苗的研究进展 | 第18-20页 |
| ·黏膜佐剂的研究 | 第20-22页 |
| ·细菌毒素佐剂 | 第20-21页 |
| ·细胞因子佐剂 | 第21-22页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料及溶液配制 | 第23-27页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验动物、细胞及病毒 | 第23页 |
| ·载体及质粒 | 第23页 |
| ·实验用引物 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·溶液配制 | 第25-27页 |
| 3 实验方法 | 第27-37页 |
| ·Asia 1 型表位抗原制备 | 第27-30页 |
| ·Asia 1 型抗原表位分析 | 第27页 |
| ·Asia 1 型抗原表位基因合成 | 第27-29页 |
| ·Asia 1 型抗原表位蛋白表达 | 第29-30页 |
| ·Asia 1 型抗原表位蛋白纯化 | 第30页 |
| ·牛干扰素γ佐剂制备 | 第30-32页 |
| ·牛脾脏淋巴细胞分离 | 第30-31页 |
| ·牛脾脏淋巴细胞增殖 | 第31页 |
| ·牛脾脏淋巴细胞总RNA 提取 | 第31页 |
| ·牛干扰素γ基因克隆 | 第31页 |
| ·牛干扰素γ成熟多肽重组质粒构建 | 第31-32页 |
| ·牛干扰素γ成熟多肽原核表达及纯化 | 第32页 |
| ·牛干扰素γ基因真核重组质粒构建 | 第32页 |
| ·实验动物分组与免疫 | 第32-33页 |
| ·免疫原准备 | 第32-33页 |
| ·动物分组及免疫 | 第33页 |
| ·实验小鼠取材 | 第33-34页 |
| ·口鼻流出液的取材 | 第33页 |
| ·生殖道冲洗液的取材 | 第33页 |
| ·血清的制备 | 第33-34页 |
| ·脾脏的取材 | 第34页 |
| ·颈部淋巴结取材 | 第34页 |
| ·肺脏取材 | 第34页 |
| ·ELISA 检测体液sIgA 抗体效价 | 第34页 |
| ·微量病毒中和试验 | 第34-35页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第35页 |
| ·Real-time PCR 检测细胞因子 | 第35-37页 |
| ·取材样品总RNA 的提取 | 第35页 |
| ·取材样品总RNA 第一链的合成 | 第35-36页 |
| ·PCR 反应条件的确定 | 第36-37页 |
| 4 结果与分析 | 第37-48页 |
| ·抗原制备 | 第37-43页 |
| ·Asia 1 型抗原表位分析 | 第37-38页 |
| ·Asia 1 型抗原表位基因合成 | 第38-39页 |
| ·Asia 1 型抗原表位蛋白表达 | 第39-40页 |
| ·Asia 1 型抗原表位蛋白纯化 | 第40-43页 |
| ·牛干扰素γ佐剂制备 | 第43页 |
| ·牛干扰素γ基因克隆 | 第43页 |
| ·牛干扰素γ成熟多肽原核表达及纯化 | 第43页 |
| ·牛干扰素γ基因真核重组质粒构建 | 第43页 |
| ·实验动物分组与免疫 | 第43-44页 |
| ·ELISA 检测体液sIgA 抗体效价 | 第44-45页 |
| ·微量病毒中和试验检测结果 | 第45-46页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第46页 |
| ·Real-time PCR 检测细胞因子mRNA 表达量 | 第46-48页 |
| 5 讨论 | 第48-53页 |
| ·口蹄疫抗原表位多肽 | 第48页 |
| ·细胞因子佐剂 | 第48-50页 |
| ·CTB 佐剂 | 第50-51页 |
| ·鼻腔免疫和皮下免疫 | 第51-52页 |
| ·多肽免疫与全病毒免疫 | 第52-53页 |
| 6 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第63页 |