| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1. 引言 | 第9-18页 |
| ·天冬酰胺合成酶的概况 | 第9-12页 |
| ·天冬酰胺合成酶的概念 | 第9页 |
| ·天冬酰胺合成酶的种类 | 第9-10页 |
| ·天冬酰胺合成酶B 的结构 | 第10-12页 |
| ·高效液相色谱法检测技术 | 第12-14页 |
| ·氨基酸生物合成中除草剂靶酶的研究进展 | 第14-16页 |
| ·研究的目的和内容 | 第16-18页 |
| ·研究的目的和意义 | 第16页 |
| ·课题来源和研究内容 | 第16-18页 |
| 2. 实验材料和仪器 | 第18-22页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·基本试剂及生产厂家 | 第18-19页 |
| ·表达材料 | 第18页 |
| ·酶活测定、抑制实验、高效液相色谱分析材料 | 第18-19页 |
| ·培养基及溶液 | 第19-21页 |
| ·大肠杆菌培养基 | 第19页 |
| ·主要溶液 | 第19-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| 3. 实验方法 | 第22-35页 |
| ·AS-B 体外筛选模型的构建 | 第22-33页 |
| ·重组原核表达载体的构建和阳性克隆的筛选 | 第22-28页 |
| ·AS-B 在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析 | 第28-32页 |
| ·通过测定酶活性方法构建AS-B 体外筛选模型 | 第32-33页 |
| ·对AS-B 体外筛选模型的验证 | 第33页 |
| ·AS-B 体外筛选模型的应用 | 第33-35页 |
| ·对四株放线菌的介绍 | 第33-34页 |
| ·放线菌发酵产物的处理及利用AS-B 体外筛选模型对发酵产物的筛选 | 第34-35页 |
| 4. 结果与分析 | 第35-45页 |
| ·AS-B 体外筛选模型的构建 | 第35-42页 |
| ·重组原核表达载体pET30a-AS-B 的构建和阳性克隆的筛选4.1.1.1 目的基因的扩增 | 第35-37页 |
| ·pET30a-AS-B 表达条件优化 | 第37-39页 |
| ·表达蛋白的提取与纯化 | 第39-42页 |
| ·对AS-B 体外筛选模型的验证 | 第42-43页 |
| ·AS-B 体外筛选模型对四株放线菌发酵代谢产物的筛选 | 第43-45页 |
| 5. 讨论 | 第45-49页 |
| ·原核表达宿主的选择 | 第45-46页 |
| ·表达载体的选择 | 第46页 |
| ·诱导条件的选择 | 第46-47页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第47页 |
| ·RT-HPLC 法测定重组蛋白AS-B 活性 | 第47-48页 |
| ·环庚草醚与1,4-桉树脑对AS-B 的抑制 | 第48-49页 |
| 6. 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
