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家蚕苯丙氨酸羧化酶基因(BmPAH)和色氨酸羟化酶基因(BmTRH)克隆、表达及功能研究

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-18页
缩写表第18-19页
第一章 文献综述第19-35页
   ·芳香族氨基酸羟化酶(AAAH)第19-21页
   ·苯丙氨酸羟化酶(PAH)第21-32页
     ·人类苯丙氨酸羟化酶(PAH)第23-28页
     ·线虫苯丙氨酸羟化酶(PAH)第28页
     ·海绵苯丙氨酸羟化酶(PAH)第28-29页
     ·微生物苯丙氨酸羟化酶(PAH)第29-30页
     ·植物苯丙氨酸羟化酶(PAH)第30-31页
     ·昆虫苯丙氨酸羟化酶(PAH)第31-32页
   ·色氨酸羟化酶(TRH)的研究第32-34页
   ·家蚕芳香族氨基酸羟化酶(AAAH)的研究第34-35页
第二章 引言第35-39页
   ·研究背景第35页
   ·研究的主要目的和意义第35-36页
   ·研究内容第36-37页
   ·技术路线第37-39页
第三章 BmPAH基因克隆、序列分析及mRNA表达模式研究第39-59页
   ·材料和方法第39-48页
     ·材料第39页
     ·酶、载体和菌株第39页
     ·生物信息分析网站及工具软件第39-40页
     ·主要仪器设备第40页
     ·主要试剂及配方第40-42页
     ·实验方法第42-48页
   ·结果和分析第48-56页
     ·BmPAH基因克隆及序列分析第48-50页
     ·BmPAH基因染色体定位与结构分析第50-51页
     ·BmPAH基因蛋白结构分析第51-53页
     ·BmPAH基因组织表达分析第53-54页
     ·BmPAH基因发育表达分析第54-56页
   ·讨论第56-59页
     ·家蚕BmPAH基因结构特征第56页
     ·家蚕BmPAH基因蛋白结构域第56-59页
第四章 BmPAH基因原核表达及western和免疫组化分析第59-87页
   ·材料和方法第59-73页
     ·材料第59页
     ·酶、载体、菌株和引物第59-60页
     ·主要试剂第60页
     ·主要试剂及配方第60-65页
     ·主要仪器设备第65-66页
     ·实验方法第66-73页
   ·结果和分析第73-83页
     ·BmPAH基因表达过渡载体的构建第73页
     ·BmPAH基因原核表达载体的构建第73-74页
     ·BmPAH基因原核表达蛋白第74-75页
     ·BmPAH基因原核表达蛋白的质谱鉴定第75-77页
     ·Western blotting分析家蚕组织蛋白第77-79页
     ·BmPAH蛋白在家蚕组织中免疫组化分析第79-83页
   ·讨论第83-87页
     ·BmPAH基因表达的组织分布第83-84页
     ·从表达组织推测BmPAH基因功能第84-87页
第五章 BmPAH基因在家蚕黑色素合成上的功能研究第87-109页
   ·材料和方法第87-93页
     ·材料第87页
     ·引物及siRNA序列第87-88页
     ·主要试剂及配方第88页
     ·主要仪器第88-89页
     ·实验方法第89-93页
   ·结果和分析第93-103页
     ·胚胎期的RNA干涉及mRNA表达量检测第93-95页
     ·高效液相色谱——荧光法(HPLC-FLU)分析RNA干涉后胚胎第95-100页
     ·抑制剂注射体壁实验第100-102页
     ·抑制剂培养体壁实验第102-103页
   ·讨论第103-109页
     ·BmPAH基因在家蚕胚胎期黑色素合成上的作用第103-104页
     ·BmPAH基因在家蚕幼虫斑纹形成时黑色素合成上的作用第104页
     ·BmPAH基因是家蚕黑色素合成的关键基因之一第104-105页
     ·家蚕黑色素合成途径补充第105-106页
     ·组织培养在家蚕体壁功能代谢对环境反应研究上的优越性第106-109页
第六章 BmTRH基因克隆、序列分析及mRNA表达模式第109-119页
   ·材料和方法第109-110页
     ·材料第109页
     ·酶、载体和菌株第109页
     ·试剂及配方第109页
     ·主要仪器第109页
     ·实验方法第109-110页
   ·结果和分析第110-118页
     ·BmTRH基因染色体定位第110页
     ·BmTRH基因克隆及序列分析第110-112页
     ·BmTRH基因结构分析第112-114页
     ·BmTRH基因表达分析第114-118页
   ·讨论第118-119页
     ·BmTRH基因结构特征第118页
     ·BmTRH基因mRNA表达特征第118-119页
第七章 BmTRH基因原核表达及western和免疫组化分析第119-129页
   ·材料和方法第119页
     ·材料第119页
     ·酶、载体、菌株和引物第119页
     ·试剂和配方第119页
     ·主要仪器设备第119页
     ·实验方法第119页
   ·结果和分析第119-127页
     ·BmTRH基因表达过渡载体的构建第119-120页
     ·BmTRH基因原核表达载体的构建第120-121页
     ·BmTRH基因原核表达蛋白第121-122页
     ·BmTRH基因原核表达蛋白的质谱鉴定第122-123页
     ·western blotting分析家蚕组织蛋白第123页
     ·BmTRH蛋白在家蚕组织中免疫组化分析第123-127页
   ·讨论第127-129页
     ·BmTRH基因表达的组织分布第127-128页
     ·BmTRH基因的功能推测第128-129页
第八章 综合与结论第129-133页
论文的创新点第133-135页
参考文献第135-149页
致谢第149-151页

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