| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-13页 |
| 第一章 实验材料 | 第13-16页 |
| ·吲哚醌及细胞株 | 第13页 |
| ·药品与试剂 | 第13-14页 |
| ·材料与仪器 | 第14-16页 |
| 第二章 实验方法 | 第16-33页 |
| ·细胞水平和分子水平的抗肿瘤活性及其机制研究(体外实验) | 第16-26页 |
| ·MTT法检测ISA对正常人成纤维细胞增殖活性的影响 | 第16页 |
| ·Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡的形态学改变 | 第16-17页 |
| ·Hoechst33258/PI荧光染色检测细胞凋亡的形态学改变 | 第17页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder | 第17-18页 |
| ·流式细胞术检测凋亡率的变化 | 第18-19页 |
| ·RT-PCR检测Bcl-2,Bax mRNA的表达 | 第19-21页 |
| ·Western blot检测Bcl-2,Bax蛋白表达 | 第21-22页 |
| ·流式细胞术检测线粒体膜电位的变化 | 第22-23页 |
| ·Western blot检测细胞色素c的释放 | 第23-24页 |
| ·流式细胞术检测活化的Caspase-3 | 第24页 |
| ·Western blot检测caspase-3的底物ICAD | 第24-25页 |
| ·MTT比色法检测细胞增殖活性 | 第25页 |
| ·PI染色流式细胞仪(FCM)分析细胞周期 | 第25-26页 |
| ·Western blot分析磷酸化的ERK,cyclinD1(CDK1)蛋白变化 | 第26页 |
| ·统计学分析方法 | 第26页 |
| ·动物整体水平的抗肿瘤活性及其机制研究(体内实验) | 第26-33页 |
| ·实验动物及其饲养 | 第26页 |
| ·建立裸鼠移植瘤模型 | 第26页 |
| ·动物实验 | 第26-27页 |
| ·观测移植瘤生长情况 | 第27页 |
| ·移植瘤常规病理检查 | 第27页 |
| ·免疫组化染色检测移植瘤嗜铬颗粒(Cga)、突触素(Syn)蛋白的表达 | 第27-28页 |
| ·荷瘤裸鼠外周血WBC水平及SOD活性、MDA含量 | 第28页 |
| ·RT-PCR检测瘤体内Bcl-2和Bax mRNA表达水平 | 第28-31页 |
| ·Western blot检测各组移植瘤Bcl-2、Bax蛋白的表达 | 第31-32页 |
| ·流式细胞术检测瘤组织caspase-3的活化情况 | 第32页 |
| ·统计学分析方法 | 第32-33页 |
| 第三章 实验结果 | 第33-57页 |
| ·细胞水平和分子水平的抗肿瘤活性及其机制研究(体外实验) | 第33-37页 |
| ·ISA对人正常成纤维细胞增殖活性的影响 | 第33页 |
| ·ISA处理后细胞形态学变化 | 第33页 |
| ·Hoechst33258/PI荧光染色检测细胞凋亡 | 第33页 |
| ·ISA处理后的DNA ladder | 第33页 |
| ·ISA处理后细胞凋亡率的变化 | 第33-34页 |
| ·ISA处理后SH-SY5Y细胞中Bcl-2、Bax mRNA表达水平的变化 | 第34页 |
| ·ISA处理后细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达水平的变化 | 第34页 |
| ·ISA作用后SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的变化 | 第34-35页 |
| ·ISA作用后SH-SY5Y细胞中细胞色素c的释放 | 第35页 |
| ·ISA处理后细胞中活化的Caspase-3的表达 | 第35-36页 |
| ·ISA处理后SH-SY5Y细胞中caspase-3的底物ICAD的表达 | 第36页 |
| ·不同浓度ISA对SH-SY5Y细胞增殖活性的影响 | 第36页 |
| ·不同浓度ISA对SH-SY5Y细胞周期的影响 | 第36-37页 |
| ·ISA处理后细胞中磷酸化的ERK,cyclinD1(CDK1)的表达水平 | 第37页 |
| ·动物整体水平的抗肿瘤活性及其机制研究(体内实验) | 第37-42页 |
| ·移植瘤生长动力学结果 | 第37-38页 |
| ·移植瘤大体病理及HE染色常规病理检查 | 第38-39页 |
| ·移植瘤嗜铬素A(CgA)、突触素(Syn)蛋白的表达 | 第39页 |
| ·荷瘤裸鼠外周血WBC水平及SOD活性、MDA含量 | 第39-40页 |
| ·移植瘤组织Bcl-2、Bax mRNA的表达 | 第40页 |
| ·移植瘤组织Bcl-2、Bax蛋白的表达 | 第40页 |
| ·移植瘤组织活化caspase-3的表达 | 第40-42页 |
| ·附图 | 第42-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 综述 | 第69-95页 |
| 综述的参考文献 | 第88-95页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
