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枇杷耐冷生理生化与相关基因克隆的研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-17页
第一章 综述第17-30页
 1 前言第17页
 2 枇杷栽培现状及耐冷研究进展第17-18页
   ·枇杷栽培现状第17-18页
   ·枇杷耐冷的研究进展第18页
 3 植物耐冷相关性的研究进展第18-29页
   ·形态解剖结构第18-19页
   ·膜系统第19-20页
   ·细胞超微结构第20-21页
   ·细胞抗氧化能力第21-22页
   ·内源激素第22-23页
   ·Ca~(2+)(钙离子)第23-24页
   ·逆境蛋白第24-25页
   ·基因表达差异的研究与技术发展第25-26页
   ·mRNA 差异显示技术第26-28页
   ·全基因序列的获得第28页
   ·分子手段的应用第28-29页
 4 本研究的目的与意义第29-30页
第二章 不同耐冷性的枇杷叶片组织结构比较第30-35页
 1 前言第30页
 2 材料与方法第30-31页
   ·材料第30页
   ·方法第30-31页
     ·处理第30-31页
     ·叶片组织细胞结构特性的观察第31页
 3 结果与分析第31-33页
   ·枇杷成熟叶的基本形态第31页
   ·叶柄的形态解剖结构第31-32页
   ·叶脉的形态解剖结构第32-33页
   ·叶肉的形态解剖结构第33页
 4 讨论第33-35页
第三章 不同枇杷叶片与幼果的耐冷生理及相关性第35-47页
 1 引言第35页
 2 材料与方法第35-38页
   ·材料第35页
   ·方法第35-38页
 3 结果与分析第38-45页
   ·低温胁迫下枇杷叶片和果实的冻害情况第38页
   ·低温胁迫下枇杷叶片与幼果中 MDA 含量的变化第38-39页
   ·低温胁迫下枇杷叶片与幼果中 POD 、SOD 活性的变化第39-41页
   ·低温胁迫下枇杷叶片与幼果中 CAT、APX 活性的变化第41-43页
   ·低温胁迫下枇杷叶片与幼果的耐冷相关性第43-45页
 4 讨论第45-47页
第四章 低温胁迫下不同枇杷叶片中内源激素的变化第47-57页
 1 前言第47页
 2 材料与方法第47-50页
   ·材料第47-49页
   ·方法第49页
   ·仪器与试剂第49-50页
   ·标准品的配制第50页
 3 结果与分析第50-55页
   ·标样和样品 HPLC 图谱第50-51页
   ·方法的回收率第51页
   ·低温胁迫下 IAA 含量变化与枇杷耐冷性的关系第51-52页
   ·低温胁迫下 GA3 含量变化与枇杷耐冷性的关系第52-53页
   ·低温胁迫下 ABA 含量变化与枇杷耐冷性的关系第53页
   ·低温胁迫下 ZT 含量变化与枇杷耐冷性的关系第53-54页
   ·低温胁迫下 ABA/GA3 比值变化与枇杷耐冷性的关系第54-55页
 4 讨论第55-57页
第五章 低温胁迫下Ca~(2+)在枇杷叶肉细胞中的分布变化及其对枇杷抗性的影响第57-66页
 1 前言第57页
 2 材料和方法第57-58页
   ·材料第57页
   ·方法第57-58页
 3 结果与分析第58-63页
   ·低温处理后的枇杷叶片冻害情况统计第58-59页
   ·验证焦锑酸钙沉淀的真实性第59页
   ·验证外施 CaCl2 处理后叶片 Ca~(2+)含量变化第59页
   ·Ca~(2+)处理后正常条件下枇杷叶片叶绿体超微结构及 Ca~(2+)分布第59页
   ·Ca~(2+)处理后低温胁迫过程中枇杷叶片叶绿体超微结构及 Ca~(2+)的分布变化第59-60页
   ·Ca~(2+)对枇杷叶片中 MDA 含量变化的影响第60-61页
   ·Ca~(2+)对枇杷叶片中 SOD 活性的影响第61页
   ·Ca~(2+)对枇杷叶片中 POD 活性的影响第61-62页
   ·Ca~(2+)对枇杷叶片中 CAT 活性的影响第62-63页
   ·Ca~(2+)对枇杷叶片中 APX 活性的影响第63页
 4 讨论第63-66页
第六章 栎叶枇杷的差异显示分析第66-84页
 1 前言第66页
 2 材料与方法第66-76页
   ·实验材料第66-68页
   ·试验方法第68-76页
 3 结果与分析第76-84页
   ·枇杷叶片总 RNA 的提取与纯度检测第76-77页
   ·mRNA 差异显示结果第77页
   ·回收条带的二次扩增第77-78页
   ·重组克隆的筛选与鉴定第78-79页
   ·差异片段的 Reverse Northern 斑点杂交结果第79-80页
   ·阳性片段的测序及序列分析第80-84页
第七章 枇杷 Clp 基因全长的克隆第84-97页
 1 前言第84页
 2 材料与方法第84-85页
   ·植物材料第84页
   ·仪器与试剂第84页
   ·试剂盒、酶和 Marker第84页
   ·菌株和质粒载体第84页
   ·实验用具与耗材第84-85页
   ·引物合成与测序第85页
 3 枇杷叶片总 RNA 的提取及纯化第85-88页
   ·枇杷叶片总 RNA 的提取第85页
   ·总 RNA 的纯化第85页
   ·枇杷叶片 RNA 含量及浓度测定第85页
   ·5’RACE第85-88页
 4 结果和分析第88-91页
   ·枇杷叶片总 RNA 的提取与纯度检测第88页
   ·枇杷叶片 Clp 基因 5’RACE 扩增第88-89页
   ·枇杷叶片 Clp 基因 cDNA 全长的获得第89-91页
 5 生物信息学分析第91-95页
   ·Clp 基因 cDNA 序列的同源性分析第91-92页
   ·枇杷叶片 Clp 基因蛋白序列分析第92-95页
 6 讨论第95-97页
第八章 枇杷 H4 基因全长的克隆第97-106页
 1 前言第97页
 2 材料与方法第97页
   ·植物材料第97页
   ·仪器与试剂第97页
   ·试剂盒、酶和 Marker第97页
   ·菌株和质粒载体第97页
   ·实验用具与耗材第97页
   ·引物合成与测序第97页
 3 枇杷叶片总 RNA 的提取及纯化第97-99页
   ·枇杷叶总 RNA 的提取第97-98页
   ·枇杷叶片总 RNA 的纯化第98页
   ·枇杷叶片 RNA 含量及浓度测定第98页
   ·5’RACE第98-99页
 4 结果和分析第99-102页
   ·枇杷叶片总 RNA 的提取与纯度检测第99-100页
   ·枇杷叶片 H4 基因 5’RACE 扩增第100-101页
   ·枇杷叶片 H4 基因 cDNA 全长的获得第101-102页
 5 生物信息学分析第102-105页
   ·H4 基因 cDNA 序列的同源性分析第102-103页
   ·枇杷叶片 H4 基因蛋白序列分析第103-105页
 6 讨论第105-106页
结束语第106-108页
参考文献第108-119页
附图第119-130页
致谢第130页

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