| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 第一部分 引言 | 第9-36页 |
| 一、乳腺癌浸润与转移 | 第9-19页 |
| （一） 乳腺癌转移的临床特点 | 第9-10页 |
| （二） 预后指标 | 第10-11页 |
| （三） 乳腺癌转移机制研究进展 | 第11-18页 |
| (四) 乳腺癌转移的综合模型 | 第18-19页 |
| 二、三阴性乳腺癌的研究现状 | 第19-22页 |
| （一） 三阴性乳腺癌的特征及临床表现 | 第19-20页 |
| （二） 三阴性乳腺癌的治疗 | 第20-21页 |
| （三） 三阴性乳腺癌与转移 | 第21-22页 |
| 三、上皮-间质转化与肿瘤转移 | 第22-25页 |
| （一） EMT 分子机制 | 第22-25页 |
| （二） EMT 在肿瘤侵袭转移中作用研究 | 第25页 |
| 四、NEDD9 分子的研究进展 | 第25-33页 |
| （一） NEDD9 分子的发现及结构 | 第25-27页 |
| （二） NEDD9 的功能及研究现状 | 第27-33页 |
| 五、本论文研究的内容与意义 | 第33-36页 |
| （一） 立题依据 | 第33-34页 |
| （二） 本文研究内容和意义 | 第34-36页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第36-54页 |
| 一、实验材料 | 第36-37页 |
| （一） 质粒 | 第36页 |
| （二） 蛋白质和抗体 | 第36页 |
| （三） 哺乳动物细胞系 | 第36-37页 |
| （四） 试剂 | 第37页 |
| 二、实验方法 | 第37-54页 |
| Ⅰ. 分子生物学试验方法 | 第37-44页 |
| （一） 分子克隆 | 第37页 |
| （二） DNA 的琼脂糖电泳 | 第37页 |
| （三） 质粒大量制备的方法 | 第37-39页 |
| （四） 哺乳动物细胞总RNA 的提取和反转录 | 第39-40页 |
| （五） 逆转录（Reverse Transcription, RT） | 第40页 |
| （六） PCR 和荧光实时定量realtime PCR | 第40-42页 |
| （七） 染色质免疫沉淀实验（Chromatin immunoprecipitation，ChIP） | 第42-44页 |
| (八) RNA 干涉（RNAi） | 第44页 |
| Ⅱ. 细胞生物学实验方法 | 第44-53页 |
| （一） 哺乳动物细胞系的培养 | 第44-45页 |
| （二） 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第45-46页 |
| （三） Roche HD 转染 | 第46页 |
| （四） 电转染 | 第46页 |
| （五） 蛋白质的Western Blot 分析 | 第46-48页 |
| （六） 集落形成实验 | 第48-49页 |
| （七） 体外细胞划痕 | 第49页 |
| （八） 体外细胞迁移分析 | 第49-50页 |
| （九） 体外细胞侵袭分析 | 第50页 |
| （十） 明胶酶谱分析 | 第50-52页 |
| （十一） 免疫组化分析 | 第52页 |
| （十二） 免疫荧光 | 第52-53页 |
| Ⅲ 统计分析 | 第53-54页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第54-72页 |
| 一、NEDD9 在人类侵袭性乳腺癌中高表达 | 第54-56页 |
| （一） NEDD9 在乳腺癌组织中呈高表达 | 第54-55页 |
| （二） NEDD9 在侵袭性乳腺癌细胞系中呈高表达 | 第55-56页 |
| 二、NEDD9 促进三阴性乳腺癌细胞的迁移，侵袭及增殖 | 第56-63页 |
| （一） NEDD9 促进三阴性乳腺癌细胞的迁移和侵袭 | 第56-60页 |
| （二） NEDD9 促进三阴性乳腺癌细胞增殖 | 第60页 |
| （三） NEDD9 对乳腺上皮细胞迁移和侵袭能力的影响 | 第60-62页 |
| （四） NEDD9 促进金属蛋白酶表达 | 第62-63页 |
| 三、NEDD9 促进上皮-间质转化 | 第63-68页 |
| （一） NEDD9 促进人乳腺上皮细胞MCF10A 上皮-间质转化 | 第63-64页 |
| （二） NEDD9 促进MDCK 细胞上皮-间质转化 | 第64-66页 |
| （三） 干涉NEDD9 能够逆转三阴性乳腺癌细胞上皮-间质转化过程 | 第66-67页 |
| （四） 体内NEDD9 的表达与间质标志明显正相关 | 第67-68页 |
| 四、NEDD9 通过ERK-Snail/Slug 信号通路促进EMT 过程 | 第68-72页 |
| （一） NEDD9 通过转录因子Snail 、Slug 抑制E-cadherin 的表达 | 第68-70页 |
| （二） NEDD9 通过ERK 信号通路促进EMT 过程 | 第70-72页 |
| 第四部分 讨论 | 第72-75页 |
| 一、NEDD9 是乳腺癌治疗的潜在靶标 | 第72页 |
| 二、NEDD9 促进乳腺癌的迁移和浸润 | 第72-73页 |
| 三、NEDD9 促进金属蛋白酶表达 | 第73页 |
| 四、NEDD9 促进 EMT 的分子机制 | 第73-75页 |
| 主要结论和创新点 | 第75-76页 |
| 一、主要结论 | 第75页 |
| 二、主要创新点 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第86页 |
