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低生长素缺陷突变体ckrc2和ckrc3的分离和研究

缩写词第3-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第一章 前言第12-33页
    1.1 生长素的合成第12-21页
        1.1.1 色氨酸依赖途径第13-20页
        1.1.2 色氨酸非依赖途径第20-21页
    1.2 生长素的信号转导第21-25页
        1.2.1 SCF~(T1R1/AFB)-生长素-Aux/IAA共受体系统第21-23页
        1.2.2 SCF~(SKP2A)-生长素-DPB/E2FC受体系统第23-24页
        1.2.3 ABP1-TMK受体系统第24-25页
    1.3 生长素的运输第25-28页
        1.3.1 PIN输出载体家族第25-26页
        1.3.2 AUX/LAX输入载体家族第26-27页
        1.3.3 MDR/PGP家族第27-28页
    1.4 生长素与细胞分裂素的相互作用第28-32页
    本论文研究的目的和意义第32-33页
第二章 实验材料和方法第33-43页
    2.1 实验材料第33-35页
        2.1.1 植物材料第33页
        2.1.2 菌株第33页
        2.1.3 载体第33-34页
        2.1.4 转基因植株第34-35页
        2.1.5 相关仪器第35页
        2.1.6 引物合成第35页
        2.1.7 DNA测序第35页
        2.1.8 药品第35页
    2.2 实验方法第35-43页
        2.2.1 拟南芥培养条件第35-36页
        2.2.2 突变体的筛选第36页
        2.2.3 表型实验分析第36页
        2.2.4 GUS染色第36-37页
        2.2.5 PI染液的配制及染色方法第37页
        2.2.6 总RNA的提取及反转录第37-38页
        2.2.7 Real-Time PCR第38-39页
        2.2.8 转基因植株的构建与筛选第39-41页
        2.2.9 生长素含量的测定第41页
        2.2.10 酶活检测实验第41-42页
        2.2.11 杂交步骤第42-43页
第三章 实验结果第43-90页
    3.1 突变体筛选结果总结第43-46页
    3.2 ckrc2-1部分第46-72页
        3.2.1 ckrc2-1突变体表现为主根、下胚轴变短及细胞分裂素培养基上根卷曲生长的表型第46-47页
        3.2.2 ckrc2-1突变体表现为根向地性缺陷以及细胞分裂素和生长素反应的异常第47-51页
        3.2.3 ckrc2-1对生长素运输抑制剂的反应改变第51-53页
        3.2.4 AT4G28720与ckrc2-1突变体表型连锁第53-55页
        3.2.5 ckrc2-1突变体的内源生长素含量明显降低第55-56页
        3.2.6 CKRC2的突变影响生长素有关基因的表达,但并不影响细胞分裂素相关基因的表达第56-58页
        3.2.7 CKRC2与CKRC1位于同一代谢通路,并编码一个限速酶第58-60页
        3.2.8 CKRC2参与催化IPyA到IAA的转化第60-63页
        3.2.9 CKRC2/YUC8是YUC家族的一个特例第63-66页
        3.2.10 CKRC2主要在根中表达并受细胞分裂素的明显诱导第66-69页
        3.2.11 AHK3-ARR1/12信号通路介导细胞分裂素对CKRC2的诱导第69-70页
        3.2.12 温度调控生长素的合成依赖于CKRC1-CKRC2途径第70-72页
    3.3 ckrc3-1部分第72-90页
        3.3.1 ckrc3-1突变体具有明显的低生长素表型第72-73页
        3.3.2 ckrc3-1是一个根向重力性特异性异常的突变体第73-74页
        3.3.3 ckrc3-1的低生长素表型能被外源补充生长素恢复第74-76页
        3.3.4 ckrc3-1突变体对外源细胞分裂素不敏感第76-78页
        3.3.5 ckrc3-1的生长素和细胞分裂素信号响应正常第78-79页
        3.3.6 ckrc3-1突变体的内源生长素含量降低第79-80页
        3.3.7 ckrc3-1突变体的基因克隆第80-83页
        3.3.8 CKRC3突变影响ckrc3-1中生长素,细胞分裂素的合成基因的表达以及对乙烯的反应第83-86页
        3.3.9 CKRC3参与生长素代谢调控的可能机制第86-90页
第四章 讨论和展望第90-96页
    4.1 筛选体系的有效性第90-91页
    4.2 ckrc2-1可以被筛选到的原因第91-92页
    4.3 CKRC1/TAA1-CKRC2/YUC8途径重要性的分析第92-94页
    4.4 CKRC3调控IAA合成的机制第94-96页
第五章 结论第96-98页
参考文献第98-117页
附录第117-158页
    附录一 58个突变体表型第117-124页
    附录二 引物序列第124-129页
    附录三 相关试剂的配法第129-130页
    附录四 土壤培养液配制方法第130-131页
    附录五 Tail-PCR克隆突变基因第131-135页
    附录六 Inverse-PCR克隆突变基因第135-138页
    附录七 SDS裂解法提取质粒DNA第138-139页
    附录八 快速DNA提取法(图位克隆)第139-140页
    附录九 ckrc2-1突变基因结构第140-144页
    附录十 ckrc3-1突变基因结构第144-146页
    附录十一 YUCCA蛋白载体构建第146-152页
    附录十二 ckrc3-1分子互补第152-158页
在学期间的研究成果第158-159页
致谢第159-160页

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