缩写词 | 第3-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第12-33页 |
1.1 生长素的合成 | 第12-21页 |
1.1.1 色氨酸依赖途径 | 第13-20页 |
1.1.2 色氨酸非依赖途径 | 第20-21页 |
1.2 生长素的信号转导 | 第21-25页 |
1.2.1 SCF~(T1R1/AFB)-生长素-Aux/IAA共受体系统 | 第21-23页 |
1.2.2 SCF~(SKP2A)-生长素-DPB/E2FC受体系统 | 第23-24页 |
1.2.3 ABP1-TMK受体系统 | 第24-25页 |
1.3 生长素的运输 | 第25-28页 |
1.3.1 PIN输出载体家族 | 第25-26页 |
1.3.2 AUX/LAX输入载体家族 | 第26-27页 |
1.3.3 MDR/PGP家族 | 第27-28页 |
1.4 生长素与细胞分裂素的相互作用 | 第28-32页 |
本论文研究的目的和意义 | 第32-33页 |
第二章 实验材料和方法 | 第33-43页 |
2.1 实验材料 | 第33-35页 |
2.1.1 植物材料 | 第33页 |
2.1.2 菌株 | 第33页 |
2.1.3 载体 | 第33-34页 |
2.1.4 转基因植株 | 第34-35页 |
2.1.5 相关仪器 | 第35页 |
2.1.6 引物合成 | 第35页 |
2.1.7 DNA测序 | 第35页 |
2.1.8 药品 | 第35页 |
2.2 实验方法 | 第35-43页 |
2.2.1 拟南芥培养条件 | 第35-36页 |
2.2.2 突变体的筛选 | 第36页 |
2.2.3 表型实验分析 | 第36页 |
2.2.4 GUS染色 | 第36-37页 |
2.2.5 PI染液的配制及染色方法 | 第37页 |
2.2.6 总RNA的提取及反转录 | 第37-38页 |
2.2.7 Real-Time PCR | 第38-39页 |
2.2.8 转基因植株的构建与筛选 | 第39-41页 |
2.2.9 生长素含量的测定 | 第41页 |
2.2.10 酶活检测实验 | 第41-42页 |
2.2.11 杂交步骤 | 第42-43页 |
第三章 实验结果 | 第43-90页 |
3.1 突变体筛选结果总结 | 第43-46页 |
3.2 ckrc2-1部分 | 第46-72页 |
3.2.1 ckrc2-1突变体表现为主根、下胚轴变短及细胞分裂素培养基上根卷曲生长的表型 | 第46-47页 |
3.2.2 ckrc2-1突变体表现为根向地性缺陷以及细胞分裂素和生长素反应的异常 | 第47-51页 |
3.2.3 ckrc2-1对生长素运输抑制剂的反应改变 | 第51-53页 |
3.2.4 AT4G28720与ckrc2-1突变体表型连锁 | 第53-55页 |
3.2.5 ckrc2-1突变体的内源生长素含量明显降低 | 第55-56页 |
3.2.6 CKRC2的突变影响生长素有关基因的表达,但并不影响细胞分裂素相关基因的表达 | 第56-58页 |
3.2.7 CKRC2与CKRC1位于同一代谢通路,并编码一个限速酶 | 第58-60页 |
3.2.8 CKRC2参与催化IPyA到IAA的转化 | 第60-63页 |
3.2.9 CKRC2/YUC8是YUC家族的一个特例 | 第63-66页 |
3.2.10 CKRC2主要在根中表达并受细胞分裂素的明显诱导 | 第66-69页 |
3.2.11 AHK3-ARR1/12信号通路介导细胞分裂素对CKRC2的诱导 | 第69-70页 |
3.2.12 温度调控生长素的合成依赖于CKRC1-CKRC2途径 | 第70-72页 |
3.3 ckrc3-1部分 | 第72-90页 |
3.3.1 ckrc3-1突变体具有明显的低生长素表型 | 第72-73页 |
3.3.2 ckrc3-1是一个根向重力性特异性异常的突变体 | 第73-74页 |
3.3.3 ckrc3-1的低生长素表型能被外源补充生长素恢复 | 第74-76页 |
3.3.4 ckrc3-1突变体对外源细胞分裂素不敏感 | 第76-78页 |
3.3.5 ckrc3-1的生长素和细胞分裂素信号响应正常 | 第78-79页 |
3.3.6 ckrc3-1突变体的内源生长素含量降低 | 第79-80页 |
3.3.7 ckrc3-1突变体的基因克隆 | 第80-83页 |
3.3.8 CKRC3突变影响ckrc3-1中生长素,细胞分裂素的合成基因的表达以及对乙烯的反应 | 第83-86页 |
3.3.9 CKRC3参与生长素代谢调控的可能机制 | 第86-90页 |
第四章 讨论和展望 | 第90-96页 |
4.1 筛选体系的有效性 | 第90-91页 |
4.2 ckrc2-1可以被筛选到的原因 | 第91-92页 |
4.3 CKRC1/TAA1-CKRC2/YUC8途径重要性的分析 | 第92-94页 |
4.4 CKRC3调控IAA合成的机制 | 第94-96页 |
第五章 结论 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-117页 |
附录 | 第117-158页 |
附录一 58个突变体表型 | 第117-124页 |
附录二 引物序列 | 第124-129页 |
附录三 相关试剂的配法 | 第129-130页 |
附录四 土壤培养液配制方法 | 第130-131页 |
附录五 Tail-PCR克隆突变基因 | 第131-135页 |
附录六 Inverse-PCR克隆突变基因 | 第135-138页 |
附录七 SDS裂解法提取质粒DNA | 第138-139页 |
附录八 快速DNA提取法(图位克隆) | 第139-140页 |
附录九 ckrc2-1突变基因结构 | 第140-144页 |
附录十 ckrc3-1突变基因结构 | 第144-146页 |
附录十一 YUCCA蛋白载体构建 | 第146-152页 |
附录十二 ckrc3-1分子互补 | 第152-158页 |
在学期间的研究成果 | 第158-159页 |
致谢 | 第159-160页 |