| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一部分 前言 | 第14-37页 |
| 1.1 ERK1/2 MAPK信号通路 | 第14-17页 |
| 1.2 MAPKs和肠上皮细胞 | 第17-18页 |
| 1.3 PI3K/AKT/mTOR信号通路 | 第18-19页 |
| 1.4 RAS/RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT/mTOR信号之间的对话 | 第19-20页 |
| 1.5 结直肠癌中MEK和PI3K信号通路的对话 | 第20-22页 |
| 1.6 癌症治疗中抑制双信号通路的原理 | 第22-23页 |
| 1.7 小肠和大肠的器官发生 | 第23-26页 |
| 1.7.1 内胚层特化、管腔化及图样形成 | 第23-24页 |
| 1.7.2 肠上皮细胞重组,绒毛形态发生和绒毛间区的形成 | 第24-25页 |
| 1.7.3 隐窝发育与肠干细胞的生成 | 第25-26页 |
| 1.8 小肠上皮的功能单位—隐窝/绒毛模型 | 第26-30页 |
| 1.9 肠上皮和间质细胞间的相互作用 | 第30-31页 |
| 1.10 干细胞的微环境以及信号分子控制的细胞分化命运的走向 | 第31-35页 |
| 1.11 胃肠道疾病的干细胞治疗 | 第35-37页 |
| 第二部分 实验试剂、仪器与实验方法 | 第37-53页 |
| 2.1 主要实验试剂、耗材与仪器 | 第37-43页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.2 实验耗材 | 第38-39页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第39页 |
| 2.1.4 主要试剂配方 | 第39-43页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第43-52页 |
| 2.2.1 小鼠脚趾基因组DNA提取 | 第43页 |
| 2.2.2 小鼠肠组织RNA提取 | 第43-44页 |
| 2.2.3 反转录反应 | 第44页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第44-46页 |
| 2.2.5 苏木精-伊红染色(H-E染色) | 第46页 |
| 2.2.6 免疫组化染色 | 第46-47页 |
| 2.2.7 免疫荧光染色 | 第47-48页 |
| 2.2.8 免疫印迹实验 | 第48-49页 |
| 2.2.9 扫描电镜 | 第49-50页 |
| 2.2.10 透射电镜 | 第50页 |
| 2.2.11 流式分析(FACS) Lgr5阳性干细胞数目 | 第50-51页 |
| 2.2.12 小肠类器官分离培养 | 第51页 |
| 2.2.13 原位杂交 | 第51-52页 |
| 2.3 软件和数据库 | 第52-53页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第53-96页 |
| 第一章 p-Erk1/2在小鼠发育期肠道的表达分析及Erk1/2基因失活由于肠道发育缺陷导致出生后死亡 | 第53-58页 |
| 3.1.1 引言 | 第53-54页 |
| 3.1.2 结果与讨论 | 第54-57页 |
| 3.1.3 小结 | 第57-58页 |
| 第二章 Erk~(△IEC)小鼠肠上皮细胞增殖与迁移速度加快 | 第58-63页 |
| 3.2.1 引言 | 第58页 |
| 3.2.2 结果与讨论 | 第58-62页 |
| 3.2.3 小结 | 第62-63页 |
| 第三章 Erk~(△IEC)小鼠肠上皮细胞分化异常 | 第63-69页 |
| 3.3.1 引言 | 第63页 |
| 3.3.2 结果与讨论 | 第63-68页 |
| 3.3.3 小结 | 第68-69页 |
| 第四章 Erk~(△IEC)小鼠肠道中Wnt信号通路过度激活 | 第69-73页 |
| 3.4.1 引言 | 第69页 |
| 3.4.2 结果与讨论 | 第69-72页 |
| 3.4.3 小结 | 第72-73页 |
| 第五章 Erk~(△IEC)小鼠中肠干细胞数目减少 | 第73-77页 |
| 3.5.1 引言 | 第73页 |
| 3.5.2 结果与讨论 | 第73-76页 |
| 3.5.3 小结 | 第76-77页 |
| 第六章 ERK通过影响Hedgehog-BMP信号影响肠间质细胞发育 | 第77-83页 |
| 3.6.1 引言 | 第77页 |
| 3.6.2 结果和讨论 | 第77-82页 |
| 3.6.3 小结 | 第82-83页 |
| 第七章 ERK信号失活引起肠上皮细胞AKT-mTOR信号通路的激活 | 第83-91页 |
| 3.7.1 引言 | 第83-84页 |
| 3.7.2 结果与讨论 | 第84-90页 |
| 3.7.3 小结 | 第90-91页 |
| 第八章 Rapamycin抑制AKT/mTOR能部分缓解Erk~(△IEC)小鼠细胞增殖和分化的异常,使小鼠生存率提高 | 第91-96页 |
| 3.8.1 引言 | 第91页 |
| 3.8.2 结果与讨论 | 第91-95页 |
| 3.8.3 小结 | 第95-96页 |
| 结语 | 第96-101页 |
| 参考文献 | 第101-112页 |
| 科研成果 | 第112页 |
