| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 本文常见缩写 | 第14-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-23页 |
| 1.1 维生素B_6的简介 | 第15页 |
| 1.2 维生素B_6的生物合成途径 | 第15-16页 |
| 1.2.1 DXP依赖途径 | 第16页 |
| 1.2.2 DXP非依赖途径 | 第16页 |
| 1.3 维生素B_6的代谢转换 | 第16-17页 |
| 1.4 PNPO研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4.1 PNPO的作用机理及催化特性 | 第17-18页 |
| 1.4.2 植物中PNPO的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 吡哆胺与吡哆醛的代谢转换 | 第19-20页 |
| 1.6 多胺氧化酶的研究进展 | 第20-23页 |
| 1.6.1 多胺氧化酶的作用机理及催化特性 | 第20-21页 |
| 1.6.2 植物中多胺氧化酶的研究进展 | 第21-23页 |
| 2 引言 | 第23-25页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第24-25页 |
| 3 材料与方法 | 第25-36页 |
| 3.1 材料、实验设备及主要试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.1.2 主要实验设备 | 第25页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 3.1.4 常用试剂配制 | 第25-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-36页 |
| 3.2.1 序列分析 | 第26-27页 |
| 3.2.2 NtPNPO-2、NtPNPO-3及NtPAO基因克隆 | 第27-30页 |
| 3.2.3 构建原核表达载体 | 第30-32页 |
| 3.2.4 重组蛋白的表达与分析 | 第32-33页 |
| 3.2.5 重组蛋白酶活的鉴定 | 第33-36页 |
| 4 结果与分析 | 第36-49页 |
| 4.1 烟草NtPNPO-2、NtPNPO-3及NtPAO基因的克隆与分析 | 第36-45页 |
| 4.1.1 烟草NtPNPO-2、NtPNPO-3cDNA序列的预测 | 第36-37页 |
| 4.1.2 烟草NtPAOcDNA序列的预测 | 第37-38页 |
| 4.1.3 烟草叶片总RNA的提取 | 第38页 |
| 4.1.4 NtPNPO-2、NtPNPO-3和NtPAO的克隆 | 第38-39页 |
| 4.1.5 NtPNPO-2、NtPNPO-3测序结果 | 第39-40页 |
| 4.1.6 NtPAO的测序结果 | 第40-41页 |
| 4.1.7 NtPNPO-2、NtPNPO-3氨基酸多序列比对 | 第41-42页 |
| 4.1.8 NtPAO氨基酸多序列比对 | 第42-45页 |
| 4.2 原核表达 | 第45-47页 |
| 4.2.1 NtPNPO-2、NtPNPO-3及NtPAO原核表达载体的构建 | 第45页 |
| 4.2.2 重组蛋白的诱导表达 | 第45-47页 |
| 4.3 重组蛋白活性分析 | 第47-49页 |
| 4.3.1 NtPNPO-1、NtPNPO-2及NtPNPO-3酶活性比较 | 第47页 |
| 4.3.2 NtPAO活性的测定 | 第47-48页 |
| 4.3.3 NtPAO对吡哆胺(PM)的催化 | 第48-49页 |
| 5 讨论 | 第49-52页 |
| 5.1 NtPNPO-2、NtPNPO-3氨基酸序列分析 | 第49页 |
| 5.2 NtPAO氨基酸序列分析 | 第49-50页 |
| 5.3 NtPNPO-1、NtPNPO-2、NtPNPO-3酶促反应活性比较 | 第50页 |
| 5.4 NtPAO酶活的检测 | 第50-52页 |
| 6 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
