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表达F4~+ETEC的双靶向性干酪乳杆菌的构建及其免疫效果评价

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第13-24页
    1.1 ETEC与仔猪腹泻第13-14页
    1.2 菌毛黏附素第14-15页
    1.3 肠毒素第15页
    1.4 用于防控F4+ETEC引起的仔猪腹泻疫苗研究现状第15-17页
        1.4.1 口服亚单位疫苗第16页
        1.4.2 口服活疫苗第16-17页
    1.5 M细胞靶向性疫苗研究进展第17-19页
    1.6 树突状细胞靶向性疫苗研究进展第19-22页
        1.6.1 DC生物学特性第20页
        1.6.2 免疫应答第20-21页
        1.6.3 树突状细胞靶向肽研究第21-22页
    1.7 乳酸杆菌作为活载体研究进展第22-23页
    1.8 研究目的和意义第23-24页
2 材料与方法第24-32页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 菌种和质粒第24页
        2.1.2 实验动物第24页
        2.1.3 引物第24页
        2.1.4 主要试剂第24-25页
        2.1.5 主要实验仪器与设备第25页
    2.2 试验方法第25-32页
        2.2.1 表达DCpep-K88ac-STa-LTB-STb-co1、K88ac-STa-LTB-STb-co1-DCpep、融合基因重组大肠杆菌的构建第25-28页
        2.2.2 重组干酪乳杆菌的构建、诱导表达与鉴定第28-30页
        2.2.3 重组乳酸菌免疫效果评价第30-32页
3 结果第32-40页
    3.1 目的基因DKC、 KCD的PCR扩增结果第32-33页
    3.2 重组乳酸菌的单双酶切鉴定结果第33页
    3.3 重组乳酸菌的PCR鉴定结果第33-34页
    3.4 重组乳酸杆菌表达蛋白的鉴定第34-36页
        3.4.1 表达产物Western blot鉴定第34-35页
        3.4.2 重组干酪乳杆菌间接免疫荧光鉴定第35-36页
    3.5 重组乳酸菌小鼠免疫学指标的测定第36-40页
        3.5.1 小鼠免疫血清IgG测定结果第36页
        3.5.2 小鼠免疫粪便sIgA测定结果第36-37页
        3.5.3 小鼠外生殖道sIgA测定结果第37页
        3.5.4 小鼠鼻冲洗液中sIgA测定结果第37-38页
        3.5.5 脾淋巴细胞增殖结果第38-39页
        3.5.6 细胞因子检测结果第39-40页
4 讨论第40-43页
    4.1 课题设计思路第40-41页
    4.2 口服表达靶向修饰抗原重组干酪乳杆菌免疫效果评价第41-42页
        4.2.1 增强粘膜免疫应答的功能第41页
        4.2.2 增强体液免疫应答的功能第41-42页
    4.3 双靶向修饰对免疫调节的影响第42-43页
5 结论第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-52页
附录第52-55页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第55页

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