中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
英文缩略语 | 第8-14页 |
引言 | 第14-19页 |
第一章 高等植物类胡萝卜素生物合成途径研究现状及本研究的目的与意义 | 第19-34页 |
·植物类胡萝卜素生物合成途径及其相关酶与编码基因 | 第19-28页 |
·1-脱氧木酮糖-5-磷酸合酶 (DXS) | 第24页 |
·1-脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶 (DXR) | 第24-25页 |
·羟甲基丁烯基二磷酸还原酶(HDR) | 第25页 |
·异戊烯二磷酸异构酶(IPPI) | 第25页 |
·牦牛儿基牦牛儿基二磷酸合酶(GGPPS) | 第25-26页 |
·八氢番茄红素合酶(PSY) | 第26页 |
·八氢番茄红素脱氢酶(PDS), Zeta-胡萝卜素异构酶(ZISO),Zeta-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)和类胡萝卜素异构酶(CRTISO) | 第26-27页 |
·番茄红素Beta-环化酶(LYCB)和番茄红素Epsilon-环化酶(LYCE) | 第27页 |
·胡萝卜素 Beta-环羟化酶 (HydB)和胡萝卜素 Epsilon-环羟化酶 (HydE) | 第27-28页 |
·玉米黄质环氧化酶(ZEP),堇菜黄质脱环氧化酶(VDE),新黄质合酶(NXS),9-顺式-环氧类胡萝卜素双氧化酶(NCED) | 第28页 |
·高等植物中类胡萝卜素生物合成调控的分子机制 | 第28-29页 |
·类胡萝卜素生物合成相关基因在植物基因工程中的应用 | 第29-33页 |
·模式植物(烟草、拟南芥和黄花烟草) | 第30页 |
·番茄 | 第30-31页 |
·油菜 | 第31页 |
·马铃薯 | 第31-32页 |
·胡萝卜 | 第32页 |
·水稻 | 第32页 |
·小麦 | 第32页 |
·玉米 | 第32-33页 |
·本项研究的目的与意义 | 第33-34页 |
第二章 材料和方法 | 第34-52页 |
·实验材料 | 第34-36页 |
·植物材料 | 第34页 |
·质粒和菌种 | 第34页 |
·试剂及培养基 | 第34-36页 |
·聚合酶链式反应(PCR)引物和 DNA 序列分析 | 第36页 |
·仪器与设备 | 第36页 |
·方法 | 第36-46页 |
·核酸分离和cDNA 合成 | 第36-39页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第39-40页 |
·玉米类胡萝卜素异构酶(CRTISO)和番茄红素 Epsilon-环化酶(LYCE)cDNAs的克隆 | 第40-41页 |
·PCR 产物或质粒 DNA 酶切产物回收与纯化(GENECLEAN) | 第41-42页 |
·PCR 产物克隆 | 第42-43页 |
·pUC8 载体与Zmcrtiso 或Zmlyce 基因片段的连接 | 第43-44页 |
·大肠杆菌转化 | 第44页 |
·质粒DNA 的提取 | 第44-46页 |
·生物信息学分析 | 第46页 |
·CRTISO 和LYCE 表达载体的构建 | 第46-47页 |
·CRTISO 和LYCE cDNAs 的功能鉴定 | 第47-48页 |
·共转化 | 第47页 |
·IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导 | 第47-48页 |
·类胡萝卜素的提取和HPLC 分析 | 第48页 |
·Southern 分子杂交 | 第48-51页 |
·玉米基因组DNA 的大量酶切 | 第48-49页 |
·杂交膜的制备 | 第49-50页 |
·DNA 探针的制备 | 第50页 |
·分子杂交 | 第50-51页 |
·玉米种子胚乳类胡萝卜素的提取和含量分析 | 第51页 |
·实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第51-52页 |
第三章 结果 | 第52-79页 |
·玉米CRTISO 和LYCE 基因的克隆和鉴定 | 第52-64页 |
·CRTISO1 基因的克隆和鉴定 | 第52-57页 |
·CRTISO2 基因的克隆和鉴定 | 第57-61页 |
·LYCE 基因的克隆和鉴定 | 第61-64页 |
·CRTISO 和LYCE 基因拷贝数分析 | 第64-70页 |
·CRTISO 和LYCE 的功能分析 | 第70-77页 |
·表达载体的构建 | 第70-74页 |
·CRTISO1 和CRTISO2 的功能分析 | 第74-76页 |
·LYCE 的功能分析 | 第76-77页 |
·玉米种子胚乳发育过程中类胡萝卜素的积累和CRTISO 基因表达之间的关系 | 第77-79页 |
第四章 讨论 | 第79-90页 |
结论 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第106-107页 |
在学期间国际基因数据库(Genbank)基因登录 | 第107-108页 |
附表 | 第108-126页 |