摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
前言 | 第7-17页 |
1、手足口病简介 | 第7页 |
2、手足口的流行病学 | 第7-8页 |
3、CA16病毒的基因结构 | 第8-9页 |
4、CA16病毒的动物模型 | 第9-10页 |
5、CA16的疫苗研究现状 | 第10-12页 |
6、呼吸道上皮屏障与病毒感染 | 第12-13页 |
7、固有免疫与病毒感染 | 第13-15页 |
8、本课题的研究意义、目的和基本策略 | 第15-17页 |
1 实验材料与方法 | 第17-29页 |
1.1 实验材料 | 第17-20页 |
1.1.1 细胞系 | 第17页 |
1.1.2 实验动物 | 第17页 |
1.1.3 病毒 | 第17页 |
1.1.4 试剂和商品化溶液 | 第17-18页 |
1.1.5 引物 | 第18-19页 |
1.1.6 主要耗材 | 第19页 |
1.1.7 主要仪器设备 | 第19页 |
1.1.8 主要溶液配制 | 第19-20页 |
1.2 方法 | 第20-29页 |
1.2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
1.2.2 病毒培养 | 第21-23页 |
1.2.3 CA16病毒接种与实验样品收获 | 第23页 |
1.2.4 CA16病毒抗原非感染性试验样品收获 | 第23页 |
1.2.5 CA16病毒抗原内化效率的荧光检测 | 第23页 |
1.2.6 实验样品mRNA的抽提与靶向基因qRT-PCR验证 | 第23-25页 |
1.2.7 实验样品免疫组织化学分析 | 第25页 |
1.2.8 实验样品免疫荧光分析 | 第25-26页 |
1.2.9 动物免疫 | 第26页 |
1.2.10 动物采血 | 第26页 |
1.2.11 血清制备 | 第26-27页 |
1.2.12 脾脏淋巴细胞分离 | 第27页 |
1.2.13 IFN-γ Elispot检测 | 第27-28页 |
1.2.14 中和抗体检测 | 第28页 |
1.2.15 乳鼠保护性实验 | 第28页 |
1.2.16 相对定量计算方法 | 第28页 |
1.2.17 统计方法 | 第28-29页 |
2 结果与分析 | 第29-44页 |
2.1 CA16感染人呼吸道上皮细胞后ILCs激活相关的信号通路分子变化 | 第29-31页 |
2.1.1 CA16的基本生物学特性 | 第29页 |
2.1.2 CA16感染16HBE细胞后增殖动力学检测 | 第29-30页 |
2.1.3 CA16感染16HBE细胞后ILCs激活相关的信号通路分子变化 | 第30-31页 |
2.2 CA16病毒抗原非感染性进入小鼠呼吸道上皮细胞后ILCs激活相关的信号通路分子变化情况 | 第31-33页 |
2.2.1 抗原内化效率的荧光检测 | 第31-32页 |
2.2.2 CA16病毒抗原非感染性进入CP-M175细胞后ILCs激活相关的信号通路分子的变化情况 | 第32-33页 |
2.3 CA16病毒抗原经鼻腔免疫小鼠后在呼吸道上皮组织中分布及相关信号分子的表达情况 | 第33-37页 |
2.3.1 CA16病毒抗原经鼻腔免疫小鼠后在呼吸道上皮组织中分布 | 第33-34页 |
2.3.2 CA16病毒抗原经鼻腔免疫小鼠后呼吸道组织中相关信号分子的表达情况 | 第34-37页 |
2.4 小鼠呼吸道黏膜组织中CA16病毒抗原与ILCs及DC的相互关系 | 第37-41页 |
2.4.1 CA16病毒抗原与ILCs及DC的共定位关系 | 第37-39页 |
2.4.2 各类ILCs分泌的细胞因子的免疫组化检测 | 第39-41页 |
2.5 CA16灭活疫苗在小鼠体内诱导的免疫反应分析 | 第41-44页 |
2.5.1 CA16灭活疫苗在小鼠体内诱导的免疫反应分析 | 第41-42页 |
2.5.2 CA16灭活疫苗在小鼠体内的保护效果 | 第42-44页 |
3 讨论 | 第44-47页 |
小结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录 | 第53-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
研究生简历 | 第58-59页 |