| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-18页 |
| 1 树鼩作为疾病模型的应用 | 第11-14页 |
| 2 细胞免疫表型分析 | 第14-15页 |
| 3 流式细胞分析术 | 第15-16页 |
| 4 抗体 | 第16-17页 |
| 5 课题研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第一章 树鼩外周血红细胞裂解方法的研究 | 第18-28页 |
| 1.1 引言 | 第18页 |
| 1.2 实验材料 | 第18-19页 |
| 1.2.1 树鼩 | 第18页 |
| 1.2.2 实验试剂 | 第18-19页 |
| 1.2.3 实验仪器 | 第19页 |
| 1.3 实验方法 | 第19-22页 |
| 1.3.1 采血方法 | 第19页 |
| 1.3.2 流式细胞分析评估红细胞裂解的有效性 | 第19页 |
| 1.3.3 红细胞裂解步骤 | 第19-21页 |
| 1.3.3.1 用BD Pharm LyseTM进行红细胞裂解 | 第20页 |
| 1.3.3.2 用BioLegend RBCs Lysis/Fixation solution进行红细胞裂解 | 第20页 |
| 1.3.3.3 用1.5%的甲醛进行红细胞裂解 | 第20页 |
| 1.3.3.4 用蒸馏水进行红细胞裂解 | 第20-21页 |
| 1.3.4 优化红细胞裂解条件 | 第21页 |
| 1.3.5 碘化丙啶染色 | 第21页 |
| 1.3.6 免疫表型染色 | 第21-22页 |
| 1.4 实验结果 | 第22-27页 |
| 1.4.1 树鼩外周血模型 | 第22页 |
| 1.4.2 四种试剂对树鼩外周血红细胞的裂解效果 | 第22-23页 |
| 1.4.3 树鼩外周血红细胞裂解条件的优化 | 第23-25页 |
| 1.4.4 外周血体积对红细胞裂解的影响 | 第25页 |
| 1.4.5 应用红细胞裂解优化后的方法进行免疫表型分析 | 第25-27页 |
| 1.5 本章小结 | 第27-28页 |
| 第二章 树鼩免疫细胞表型抗体的筛选 | 第28-61页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.2.1 树鼩 | 第28页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-35页 |
| 2.3.1 树鼩外周血单细胞悬液样品的制备 | 第29-30页 |
| 2.3.2 树鼩骨髓单细胞悬液样品的制备 | 第30页 |
| 2.3.3 树鼩脾脏单细胞悬液样品的制备 | 第30-31页 |
| 2.3.4 染色 | 第31-32页 |
| 2.3.4.1 细胞表面染色 | 第31页 |
| 2.3.4.2 细胞内染色 | 第31-32页 |
| 2.3.5 交叉反应性抗体的筛选 | 第32页 |
| 2.3.6 树鼩原代细胞培养刺激实验 | 第32-34页 |
| 2.3.6.1 树鼩外周血在有丝分裂原刺激后的细胞因子的检测 | 第32-33页 |
| 2.3.6.2 树鼩骨髓、脾脏原代细胞培养刺激实验 | 第33-34页 |
| 2.3.7 抗体特异性的检验 | 第34-35页 |
| 2.3.7.1 磁珠分选细胞 | 第34页 |
| 2.3.7.2 免疫荧光染色 | 第34页 |
| 2.3.7.3 吉姆萨染色 | 第34-35页 |
| 2.3.8 交叉反应性抗体滴度实验 | 第35页 |
| 2.4 实验结果 | 第35-60页 |
| 2.4.1 利用流式细胞术分析树鼩外周血、骨髓和脾脏模型 | 第35页 |
| 2.4.2 树鼩样品中筛选到具有交叉反应性的抗体 | 第35-52页 |
| 2.4.3 相同克隆不同公司的抗体间的比较 | 第52-53页 |
| 2.4.4 相同公司相同克隆不同染色抗体间的比较 | 第53-54页 |
| 2.4.5 同型对照和Fc受体封闭 | 第54-55页 |
| 2.4.6 树鼩原代细胞培养 | 第55-57页 |
| 2.4.7 磁珠分选 | 第57-58页 |
| 2.4.8 免疫荧光和吉母萨染色 | 第58-60页 |
| 2.4.9 抗体滴度 | 第60页 |
| 2.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 第三章 树鼩外周血、骨髓和脾脏中免疫细胞表型的分析 | 第61-81页 |
| 3.1 引言 | 第61页 |
| 3.2 实验材料 | 第61-62页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第61页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第61-62页 |
| 3.3 实验方法 | 第62-65页 |
| 3.3.1 树鼩外周血单细胞悬液样品的制备 | 第62页 |
| 3.3.2 树鼩骨髓单细胞悬液样品的制备 | 第62-63页 |
| 3.3.3 树鼩脾脏单细胞悬液样品的制备 | 第63页 |
| 3.3.4 各类免疫细胞的细胞表面标记 | 第63-64页 |
| 3.3.5 染色 | 第64页 |
| 3.3.5.1 细胞表面染色 | 第64页 |
| 3.3.5.2 多重染色 | 第64页 |
| 3.3.6 FMO对照 | 第64-65页 |
| 3.4 实验结果 | 第65-80页 |
| 3.4.1 树鼩中外周血中各类免疫细胞百分比 | 第65-70页 |
| 3.4.1.1 幼龄树鼩外周血中各类免疫细胞百分比 | 第65-67页 |
| 3.4.1.2 成年树鼩外周血中各类免疫细胞百分比 | 第67-69页 |
| 3.4.1.2.1 雌性树鼩外周血中各类免疫细胞百分比 | 第67-68页 |
| 3.4.1.2.2 雄性树鼩外周血中各类免疫细胞百分比 | 第68-69页 |
| 3.4.1.3 老年树鼩外周血中各类免疫细胞百分比 | 第69-70页 |
| 3.4.2 树鼩中骨髓中各类免疫细胞百分比 | 第70-75页 |
| 3.4.2.1 幼龄树鼩骨髓中各类免疫细胞百分比 | 第70-73页 |
| 3.4.2.2 成年树鼩骨髓中各类免疫细胞百分比 | 第73-74页 |
| 3.4.2.3 老年树鼩骨髓中各类免疫细胞百分比 | 第74-75页 |
| 3.4.3 树鼩中脾脏中各类免疫细胞百分比 | 第75-80页 |
| 3.4.3.1 幼龄树鼩脾脏中各类免疫细胞百分比 | 第75-77页 |
| 3.4.3.2 成年树鼩脾脏中各类免疫细胞百分比 | 第77-79页 |
| 3.4.3.2.1 雌性树鼩脾脏中各类免疫细胞百分比 | 第77-78页 |
| 3.4.3.2.2 雄性树鼩脾脏中各类免疫细胞百分比 | 第78-79页 |
| 3.4.3.3 老年树鼩脾脏中各类免疫细胞百分比 | 第79-80页 |
| 3.5 本章小结 | 第80-81页 |
| 第四章 分析和讨论 | 第81-83页 |
| 4.1 讨论 | 第81-82页 |
| 4.2 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 附录一 英文缩略词表 | 第88-89页 |
| 附录二 主要溶液配制 | 第89-90页 |
| 附录三 流式细胞分析筛选到与树鼩外周血细胞有交叉反应性的抗体 | 第90-99页 |
| 附录四 流式细胞分析筛选到与树鼩骨髓细胞有交叉反应性的抗体 | 第99-107页 |
| 附录五 流式细胞分析筛选到与树鼩脾脏细胞有交叉反应性的抗体 | 第107-114页 |
| 个人简介 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
