缩略语表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
英文摘要 | 第12-17页 |
前言 | 第18-20页 |
文献回顾 | 第20-36页 |
第一部分 褪黑素通过上调自噬水平减轻糖尿病心肌病的损伤 | 第36-52页 |
1 材料 | 第36-38页 |
1.1 实验动物 | 第36页 |
1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
1.3 主要仪器 | 第37-38页 |
2 方法 | 第38-44页 |
2.1 STZ注射构建糖尿病心肌病小鼠模型 | 第38-39页 |
2.2 小动物超声仪测定小鼠心功能 | 第39页 |
2.3 Western blotting法检测心脏组织的目的蛋白 | 第39-42页 |
2.4 分离原代心肌细胞 | 第42页 |
2.5 细胞实验分组 | 第42-43页 |
2.6 检测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量 | 第43页 |
2.7 透射电镜检测心肌细胞自噬小体 | 第43-44页 |
2.8 统计学分析 | 第44页 |
3 结果 | 第44-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
第二部分 MST1敲除上调自噬减轻糖尿病心肌病引起的心功能不全 | 第52-73页 |
1 材料 | 第52-54页 |
1.1 实验动物 | 第52页 |
1.2 主要试剂 | 第52-53页 |
1.3 主要仪器 | 第53-54页 |
2 方法 | 第54-60页 |
2.1 构建糖尿病心肌病小鼠模型 | 第54页 |
2.2 实验方案 | 第54页 |
2.3 小动物超声仪检测小鼠心功能 | 第54页 |
2.4 氟-18脱氧葡萄糖评估心肌葡萄糖代谢 | 第54-55页 |
2.5 Western blotting法检测心脏组织的目的蛋白 | 第55页 |
2.6 透射电镜观察心肌组织中线粒体的形态和自噬小体的数量 | 第55-56页 |
2.7 蛋白质免疫共沉淀(Co-Immuno precipitation,Co-IP)检测蛋白质相互结合 | 第56-57页 |
2.8 分离原代心肌细胞 | 第57页 |
2.9 细胞实验分组 | 第57页 |
2.10 共聚焦显微镜检测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量 | 第57-58页 |
2.11 Ad-sh-Mst1腺病毒转染原代心肌细胞 | 第58页 |
2.12 透射电镜观察原代心肌细胞自噬小体的数量 | 第58页 |
2.13 TUNEL法检测原代心肌细胞凋亡率 | 第58-59页 |
2.14 流式法检测原代心肌细胞凋亡率 | 第59页 |
2.15 JC-1染色法测量线粒体膜电位水平 | 第59页 |
2.16 统计学分析 | 第59-60页 |
3 结果 | 第60-71页 |
4 讨论 | 第71-73页 |
第三部分 MST1过表达加重糖尿病心肌病引起的心功能不全 | 第73-93页 |
1 材料 | 第73-75页 |
1.1 实验动物 | 第73页 |
1.2 主要试剂 | 第73-74页 |
1.3 主要仪器 | 第74-75页 |
2 方法 | 第75-78页 |
2.1 构建糖尿病心肌病小鼠模型 | 第75页 |
2.2 实验方案 | 第75页 |
2.3 小动物超声仪检测小鼠心功能 | 第75页 |
2.4 氟-18脱氧葡萄糖评估心肌葡萄糖代谢 | 第75-76页 |
2.5 Western blotting法检测心脏组织的目的蛋白 | 第76页 |
2.6 透射电镜观察心肌组织中自噬小体的数量 | 第76页 |
2.7 蛋白质免疫共沉淀(Co-Immuno precipitation,Co-IP)检测蛋白质相互结合 | 第76页 |
2.8 分离原代心肌细胞 | 第76页 |
2.9 细胞实验分组 | 第76页 |
2.10 共聚焦显微镜观测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量 | 第76-77页 |
2.11 Ad-Mst1腺病毒转染原代心肌细胞 | 第77页 |
2.12 观测原代心肌细胞自噬小体的数量 | 第77页 |
2.13 TUNEL法检测原代心肌细胞凋亡率 | 第77页 |
2.14 流式法检测原代心肌细胞凋亡率 | 第77-78页 |
2.15 JC-1染色检测原代心肌细胞线粒体膜电位水平 | 第78页 |
2.16 统计学分析 | 第78页 |
3 结果 | 第78-89页 |
4 讨论 | 第89-93页 |
第四部分 MST1敲除抑制褪黑素对糖尿病心肌病的心肌保护作用 | 第93-106页 |
1 材料 | 第93-95页 |
1.1 实验动物 | 第93页 |
1.2 主要试剂 | 第93-94页 |
1.3 主要仪器 | 第94-95页 |
2 方法 | 第95-97页 |
2.1 构建糖尿病心肌病小鼠模型 | 第95页 |
2.2 实验方案 | 第95页 |
2.3 小动物超声仪检测小鼠心功能 | 第95-96页 |
2.4 Western blotting法检测心脏组织的目的蛋白 | 第96页 |
2.5 原代心肌细胞培养 | 第96页 |
2.6 细胞实验分组 | 第96页 |
2.7 共聚焦显微镜检测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量 | 第96-97页 |
2.8 Ad-sh-Mst1腺病毒转染原代心肌细胞 | 第97页 |
2.9 观测原代心肌细胞自噬小体的数量 | 第97页 |
2.10 统计学分析 | 第97页 |
3 结果 | 第97-104页 |
4 讨论 | 第104-106页 |
第五部分 褪黑素抑制MST1改善糖尿病心肌病引起的心功能不全 | 第106-120页 |
1 材料 | 第106-108页 |
1.1 实验动物 | 第106页 |
1.2 主要试剂 | 第106-107页 |
1.3 主要仪器 | 第107-108页 |
2 方法 | 第108-110页 |
2.1 构建糖尿病心肌病小鼠模型 | 第108页 |
2.2 实验方案 | 第108页 |
2.3 小动物超声仪检测小鼠心功能 | 第108-109页 |
2.4 Westernblotting法检测心脏组织的目的蛋白 | 第109页 |
2.5 分离原代心肌细胞 | 第109页 |
2.6 细胞实验分组 | 第109页 |
2.7 共聚焦显微镜检测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量 | 第109-110页 |
2.8 Ad-Mst1腺病毒转染原代心肌细胞 | 第110页 |
2.9 观测原代心肌细胞自噬小体的数量 | 第110页 |
2.10 统计学分析 | 第110页 |
3 结果 | 第110-118页 |
4 讨论 | 第118-120页 |
小结 | 第120-121页 |
参考文献 | 第121-136页 |
个人简历和研究成果 | 第136-141页 |
致谢 | 第141-142页 |