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褪黑素调控Mst1在糖尿病心肌病损伤中的作用及机制研究

缩略语表第7-8页
中文摘要第8-12页
英文摘要第12-17页
前言第18-20页
文献回顾第20-36页
第一部分 褪黑素通过上调自噬水平减轻糖尿病心肌病的损伤第36-52页
    1 材料第36-38页
        1.1 实验动物第36页
        1.2 主要试剂第36-37页
        1.3 主要仪器第37-38页
    2 方法第38-44页
        2.1 STZ注射构建糖尿病心肌病小鼠模型第38-39页
        2.2 小动物超声仪测定小鼠心功能第39页
        2.3 Western blotting法检测心脏组织的目的蛋白第39-42页
        2.4 分离原代心肌细胞第42页
        2.5 细胞实验分组第42-43页
        2.6 检测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量第43页
        2.7 透射电镜检测心肌细胞自噬小体第43-44页
        2.8 统计学分析第44页
    3 结果第44-50页
    4 讨论第50-52页
第二部分 MST1敲除上调自噬减轻糖尿病心肌病引起的心功能不全第52-73页
    1 材料第52-54页
        1.1 实验动物第52页
        1.2 主要试剂第52-53页
        1.3 主要仪器第53-54页
    2 方法第54-60页
        2.1 构建糖尿病心肌病小鼠模型第54页
        2.2 实验方案第54页
        2.3 小动物超声仪检测小鼠心功能第54页
        2.4 氟-18脱氧葡萄糖评估心肌葡萄糖代谢第54-55页
        2.5 Western blotting法检测心脏组织的目的蛋白第55页
        2.6 透射电镜观察心肌组织中线粒体的形态和自噬小体的数量第55-56页
        2.7 蛋白质免疫共沉淀(Co-Immuno precipitation,Co-IP)检测蛋白质相互结合第56-57页
        2.8 分离原代心肌细胞第57页
        2.9 细胞实验分组第57页
        2.10 共聚焦显微镜检测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量第57-58页
        2.11 Ad-sh-Mst1腺病毒转染原代心肌细胞第58页
        2.12 透射电镜观察原代心肌细胞自噬小体的数量第58页
        2.13 TUNEL法检测原代心肌细胞凋亡率第58-59页
        2.14 流式法检测原代心肌细胞凋亡率第59页
        2.15 JC-1染色法测量线粒体膜电位水平第59页
        2.16 统计学分析第59-60页
    3 结果第60-71页
    4 讨论第71-73页
第三部分 MST1过表达加重糖尿病心肌病引起的心功能不全第73-93页
    1 材料第73-75页
        1.1 实验动物第73页
        1.2 主要试剂第73-74页
        1.3 主要仪器第74-75页
    2 方法第75-78页
        2.1 构建糖尿病心肌病小鼠模型第75页
        2.2 实验方案第75页
        2.3 小动物超声仪检测小鼠心功能第75页
        2.4 氟-18脱氧葡萄糖评估心肌葡萄糖代谢第75-76页
        2.5 Western blotting法检测心脏组织的目的蛋白第76页
        2.6 透射电镜观察心肌组织中自噬小体的数量第76页
        2.7 蛋白质免疫共沉淀(Co-Immuno precipitation,Co-IP)检测蛋白质相互结合第76页
        2.8 分离原代心肌细胞第76页
        2.9 细胞实验分组第76页
        2.10 共聚焦显微镜观测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量第76-77页
        2.11 Ad-Mst1腺病毒转染原代心肌细胞第77页
        2.12 观测原代心肌细胞自噬小体的数量第77页
        2.13 TUNEL法检测原代心肌细胞凋亡率第77页
        2.14 流式法检测原代心肌细胞凋亡率第77-78页
        2.15 JC-1染色检测原代心肌细胞线粒体膜电位水平第78页
        2.16 统计学分析第78页
    3 结果第78-89页
    4 讨论第89-93页
第四部分 MST1敲除抑制褪黑素对糖尿病心肌病的心肌保护作用第93-106页
    1 材料第93-95页
        1.1 实验动物第93页
        1.2 主要试剂第93-94页
        1.3 主要仪器第94-95页
    2 方法第95-97页
        2.1 构建糖尿病心肌病小鼠模型第95页
        2.2 实验方案第95页
        2.3 小动物超声仪检测小鼠心功能第95-96页
        2.4 Western blotting法检测心脏组织的目的蛋白第96页
        2.5 原代心肌细胞培养第96页
        2.6 细胞实验分组第96页
        2.7 共聚焦显微镜检测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量第96-97页
        2.8 Ad-sh-Mst1腺病毒转染原代心肌细胞第97页
        2.9 观测原代心肌细胞自噬小体的数量第97页
        2.10 统计学分析第97页
    3 结果第97-104页
    4 讨论第104-106页
第五部分 褪黑素抑制MST1改善糖尿病心肌病引起的心功能不全第106-120页
    1 材料第106-108页
        1.1 实验动物第106页
        1.2 主要试剂第106-107页
        1.3 主要仪器第107-108页
    2 方法第108-110页
        2.1 构建糖尿病心肌病小鼠模型第108页
        2.2 实验方案第108页
        2.3 小动物超声仪检测小鼠心功能第108-109页
        2.4 Westernblotting法检测心脏组织的目的蛋白第109页
        2.5 分离原代心肌细胞第109页
        2.6 细胞实验分组第109页
        2.7 共聚焦显微镜检测原代心肌细胞GFP-LC3的表达量第109-110页
        2.8 Ad-Mst1腺病毒转染原代心肌细胞第110页
        2.9 观测原代心肌细胞自噬小体的数量第110页
        2.10 统计学分析第110页
    3 结果第110-118页
    4 讨论第118-120页
小结第120-121页
参考文献第121-136页
个人简历和研究成果第136-141页
致谢第141-142页

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