| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 邻苯二甲酸酯概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 邻苯二甲酸酯的简介 | 第12页 |
| 1.1.2 PAEs的应用现状 | 第12-13页 |
| 1.1.3 PAEs的污染及危害性 | 第13-14页 |
| 1.2 非生物法降解PAEs | 第14页 |
| 1.3 生物法降解PAEs | 第14-19页 |
| 1.3.1 微生物降解法研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3.2 PAEs的代谢途径 | 第15-17页 |
| 1.3.3 酶降解法研究现状 | 第17页 |
| 1.3.4 目前生物法降解研究存在的问题 | 第17-19页 |
| 1.4 本课题的研究目的及意义 | 第19页 |
| 1.5 本课题的主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第2章 DEHP降解菌株的筛选与鉴定 | 第20-27页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料与方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 主要试剂和仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.2 土壤样品采集 | 第21页 |
| 2.2.3 培养基配制 | 第21-22页 |
| 2.2.4 培养条件 | 第22页 |
| 2.2.5 富集培养 | 第22页 |
| 2.2.6 薄层色谱分析(TLC) | 第22页 |
| 2.2.7 菌株初筛 | 第22页 |
| 2.2.8 纯种分离 | 第22页 |
| 2.2.9 菌株复筛 | 第22-23页 |
| 2.2.10 菌种鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第24-25页 |
| 2.3.1 菌株初筛结果 | 第24页 |
| 2.3.2 纯种分离结果 | 第24页 |
| 2.3.3 菌株复筛结果 | 第24页 |
| 2.3.4 菌种鉴定结果 | 第24-25页 |
| 2.4 本章小结 | 第25-27页 |
| 第3章 DEHP降解菌株的降解特性研究 | 第27-34页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 材料与方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 主要试剂和仪器 | 第27页 |
| 3.2.2 培养基配制 | 第27页 |
| 3.2.3 培养条件 | 第27页 |
| 3.2.4 菌液处理方法 | 第27页 |
| 3.2.5 测定菌降解DEHP的最适pH | 第27-28页 |
| 3.2.6 测定菌降解DEHP的最适温度 | 第28页 |
| 3.2.7 HPLC分析方法 | 第28页 |
| 3.2.8 GC-MS分析方法 | 第28页 |
| 3.2.9 DEHP降解进程 | 第28页 |
| 3.2.10 底物谱 | 第28页 |
| 3.2.11 降解中间产物的测定 | 第28-29页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第29-32页 |
| 3.3.1 反应最适pH | 第29页 |
| 3.3.2 降解反应最适温度 | 第29-30页 |
| 3.3.3 底物谱 | 第30页 |
| 3.3.4 DEHP降解进程 | 第30-31页 |
| 3.3.5 降解中间产物的鉴定结果 | 第31-32页 |
| 3.6 本章小结 | 第32-34页 |
| 第4章 DEHP 水解酶的基因挖掘 | 第34-45页 |
| 4.1 引言 | 第34页 |
| 4.2 材料与方法 | 第34-41页 |
| 4.2.1 主要试剂和仪器 | 第34页 |
| 4.2.2 数据库挖掘 | 第34-40页 |
| 4.2.3 Gordonia polyisoprenivorans 5F 基因组数据挖掘 | 第40-41页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第41-44页 |
| 4.3.1 数据库挖掘结果 | 第41-42页 |
| 4.3.2 Gordonia polyisoprenivorans 5F基因组数据挖掘结果 | 第42-43页 |
| 4.3.3 GoEst15蛋白序列分析 | 第43页 |
| 4.3.4 GoEst15同源建模 | 第43-44页 |
| 4.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第5章 GoEst15对PAEs的催化性能研究 | 第45-56页 |
| 5.1 引言 | 第45页 |
| 5.2 材料与方法 | 第45-48页 |
| 5.2.1 主要试剂和仪器 | 第45页 |
| 5.2.2 蛋白纯化 | 第45-46页 |
| 5.2.3 四级结构分析 | 第46页 |
| 5.2.4 酶活力分析方法 | 第46页 |
| 5.2.5 pH和温度对酶活力的影响 | 第46-47页 |
| 5.2.6 有机溶剂和金属离子对酶活力的影响 | 第47页 |
| 5.2.7 降解产物的鉴定 | 第47页 |
| 5.2.8 动力学参数测定 | 第47页 |
| 5.2.9 酶的底物谱测定 | 第47-48页 |
| 5.2.10 反应进程曲线的测定 | 第48页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第48-55页 |
| 5.3.1 蛋白纯化 | 第48页 |
| 5.3.2 四级结构信息 | 第48-49页 |
| 5.3.3 GoEst15反应的最适pH | 第49页 |
| 5.3.4 GoEst15的pH稳定性 | 第49-50页 |
| 5.3.5 GoEst15反应的最适温度 | 第50页 |
| 5.3.6 GoEst15的热稳定性 | 第50-51页 |
| 5.3.7 GoEst15的有机溶剂耐受性 | 第51页 |
| 5.3.8 GoEst15的金属离子耐受性 | 第51-52页 |
| 5.3.9 GoEst15对PAEs物质降解产物的鉴定 | 第52-53页 |
| 5.3.10 GoEst15的动力学参数 | 第53页 |
| 5.3.11 GoEst15的底物谱 | 第53-54页 |
| 5.3.12 GoEst15对DBP和DEHP的降解进程曲线 | 第54-55页 |
| 5.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第6章 双酶共表达体系的建立 | 第56-63页 |
| 6.1 引言 | 第56页 |
| 6.2 材料与方法 | 第56-58页 |
| 6.2.1 主要试剂和仪器 | 第56-57页 |
| 6.2.2 MEHP水解酶的挖掘 | 第57页 |
| 6.2.3 双酶共表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 6.2.4 共表达体系与DEHP反应 | 第58页 |
| 6.2.5 共表达体系底物谱及其反应进程的测定 | 第58页 |
| 6.3 实验结果与讨论 | 第58-61页 |
| 6.3.1 MEHP水解酶挖掘 | 第58-59页 |
| 6.3.2 双酶共表达体系的构建 | 第59页 |
| 6.3.3 双酶共表达体系的选择 | 第59-60页 |
| 6.3.4 双酶共表达体系的底物谱及其反应进程曲线 | 第60-61页 |
| 6.4 本章小结 | 第61-63页 |
| 结论与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 攻读硕士期间论文发表和专利公开情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-79页 |
